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限制性内切酶介导的玫烟色拟青霉原生质转化体系构建 |
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| 论文目录 |
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| 致谢 | 第1-9页 | | 中文摘要 | 第9-11页 | | 1 玫烟色拟青霉生物学及原生质体转化体系的研究现状 | 第11-23页 | | ·玫烟色拟青霉生物学基础 | 第11页 | | ·玫烟色拟青霉的寄主范围与侵染方式 | 第11-12页 | | ·寄主范围 | 第11页 | | ·侵染方式 | 第11-12页 | | ·丝状真菌的原生质体转化 | 第12-17页 | | ·原生质体转化的条件 | 第12-13页 | | ·REMI转化 | 第13-17页 | | ·丝状真菌原生质体转化技术的应用 | 第17-23页 | | ·转化技术在表达外源基因上的研究现状 | 第17-19页 | | ·转化技术在基因标记上的研究现状 | 第19-23页 | | 2 玫烟色拟青霉原生质体的制备和再生 | 第23-28页 | | ·材料与试剂 | 第23-25页 | | ·供试菌株 | 第23-24页 | | ·试剂、缓冲液与培养基 | 第24页 | | ·原生质体的释放步骤 | 第24页 | | ·原生质体对不同抗生素的敏感性测定 | 第24-25页 | | ·结果与分析 | 第25-27页 | | ·菌丝的原生质体转化效率 | 第25页 | | ·不同酶解时间对原生质体产生的影响 | 第25-26页 | | ·潮霉素HygB对原生质体生长的影响 | 第26页 | | ·PPT对Pfr116原生质体生长的影响 | 第26-27页 | | ·讨论 | 第27-28页 | | 3 限制性内切酶介导的原生质体转化(REMI)与转化子鉴定 | 第28-41页 | | ·材料与试剂 | 第29-31页 | | ·质粒pAn52-1N-Bar | 第29页 | | ·KTC | 第29页 | | ·过氧乙酸消毒液 | 第29页 | | ·200mg／mL氨苄青霉素 | 第29页 | | ·50mg／mL PPT | 第29页 | | ·细菌LB培养基 | 第29页 | | ·含300μg／mL PPT的查氏再生培养基 | 第29页 | | ·DNA提取缓冲液 | 第29页 | | ·2％ Tween 40溶液 | 第29页 | | ·酚-氯仿-异戊醇混液 | 第29页 | | ·氯仿-异戊醇混液 | 第29-30页 | | ·3mol／L NaAc | 第30页 | | ·TE缓冲液 | 第30页 | | ·0.8％和1.5％琼脂液 | 第30页 | | ·核酸电泳上样缓冲液(6×) | 第30页 | | ·NA Marker Ⅳ | 第30页 | | ·100 bp DNA Ladder | 第30页 | | ·Washing Buffer | 第30页 | | ·Maleic Acid Buffer | 第30页 | | ·Detection Buffer | 第30页 | | ·20×SSC | 第30页 | | ·碱性变性缓冲液 | 第30页 | | ·10×TBE(pH 8.3) | 第30页 | | ·试剂盒 | 第30-31页 | | ·Working Blocking Solution | 第31页 | | ·Antibody Solution | 第31页 | | ·Color Substrate Solution | 第31页 | | ·0.1％ DEPC水 | 第31页 | | ·实验步骤 | 第31-36页 | | ·大肠杆菌DH5α的培养 | 第31页 | | ·质粒的提取与纯化 | 第31-32页 | | ·质粒的电泳鉴定 | 第32页 | | ·质粒的单酶切 | 第32页 | | ·酶切后质粒的柱回收 | 第32页 | | ·限制性内切酶介导的原生质体转化(REMI) | 第32-33页 | | ·转化子的初步筛选和转接培养 | 第33页 | | ·转化子基因组DNA的提取酶切后质粒的柱回收 | 第33-34页 | | ·PCR鉴定 | 第34页 | | ·核酸电泳 | 第34页 | | ·Southern Blotting杂交 | 第34-36页 | | ·结果与分析 | 第36-38页 | | ·质粒的电泳鉴定和浓度测定 | 第36-37页 | | ·Pfr116原生质体转化效率 | 第37页 | | ·转化子的稳定性 | 第37-38页 | | ·转化子基因组DNA的PCR鉴定 | 第38页 | | ·转化子基因组DNA的Southern Blotting杂交鉴定 | 第38页 | | ·讨论 | 第38-41页 | | 4 转化子突变性状的鉴定 | 第41-45页 | | ·材料和方法 | 第41-42页 | | ·供试菌株 | 第41页 | | ·转化子的菌落生长稳定性观察 | 第41页 | | ·转化子产孢能力的鉴定 | 第41-42页 | | ·结果与分析 | 第42-43页 | | ·转化子的菌落生长稳定性 | 第42页 | | ·两个特异转化子的产孢性状 | 第42-43页 | | ·讨论 | 第43-45页 | | 5 总讨论 | 第45-46页 | | 参考文献 | 第46-51页 | | 英文摘要 | 第51-52页 |
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论文编号BS1134881，这篇论文共52页
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