摘要 | 第4-6页 |
abstract | 第6-8页 |
引言 | 第14-19页 |
0.1 结直肠炎症与癌症 | 第14-15页 |
0.2 肠道菌群与炎症及肿瘤的关系 | 第15-16页 |
0.3 花青素 | 第16-17页 |
0.4 花青素对肠道菌群的影响 | 第17-18页 |
0.5 研究目的及意义 | 第18-19页 |
第1章 高通量测序检测黑树莓花青素对肠道菌群的影响 | 第19-26页 |
1.1 引言 | 第19页 |
1.2 实验材料 | 第19-20页 |
1.2.1 实验动物、试剂 | 第19页 |
1.2.2 主要仪器设备 | 第19-20页 |
1.2.3 BRB饲料配制 | 第20页 |
1.3 实验方法及步骤 | 第20-22页 |
1.3.1 动物模型的建立 | 第20-21页 |
1.3.2 肠道菌群鉴定 | 第21-22页 |
1.4 实验结果与讨论 | 第22-25页 |
1.5 结论 | 第25-26页 |
第2章 RT-PCR检测BRB花青素对个别菌种的调控作用 | 第26-32页 |
2.1 引言 | 第26页 |
2.2 实验材料 | 第26-27页 |
2.2.1 实验试剂 | 第26页 |
2.2.2 主要仪器设备 | 第26-27页 |
2.3 实验方法及步骤 | 第27-29页 |
2.3.1 小鼠粪便RNA的提取及cDNA的合成 | 第27-28页 |
2.3.2 引物设计及Real-Time PCR | 第28-29页 |
2.4 实验结果与讨论 | 第29-31页 |
2.4.1 黑树莓花青素上调肠道有益菌的表达 | 第29-30页 |
2.4.2 黑树莓花青素下调肠道有害菌的表达 | 第30-31页 |
2.4.3 各实验组中直肠真杆菌,柔嫩梭菌,乳酸杆菌,脱硫脱硫弧菌和粪肠球菌的相对表达 | 第31页 |
2.5 结论 | 第31-32页 |
第3章 黑树莓花青素及肠道菌群代谢物对结直肠癌细胞的影响 | 第32-52页 |
3.1 引言 | 第32页 |
3.2 实验材料 | 第32-36页 |
3.2.1 细胞系,生化试剂和耗材 | 第32-34页 |
3.2.2 主要仪器设备 | 第34页 |
3.2.3 试剂的配制 | 第34-36页 |
3.3 实验方法 | 第36-45页 |
3.3.1 肠道菌群的培养条件 | 第36-37页 |
3.3.2 肠道菌群代谢物的收集 | 第37页 |
3.3.3 Caco2,SW480和HCT-116 细胞的培养,处理和收集 | 第37-40页 |
3.3.4 体外培养细胞RNA的提取及cDNA的合成 | 第40-41页 |
3.3.5 引物设计及Real-Time PCR | 第41-42页 |
3.3.6 小鼠肠上皮细胞的获取 | 第42页 |
3.3.7 肠上皮细胞及体外培养细胞总蛋白质的提取 | 第42-43页 |
3.3.8 细胞总蛋白质浓度的测定(BCA法) | 第43页 |
3.3.9 蛋白质免疫印迹(Western Blot) | 第43-45页 |
3.4 实验结果与讨论 | 第45-50页 |
3.4.1 BRB花青素促进肠道微生物群落增加 | 第45-46页 |
3.4.2 肠道菌群代谢产物对结直肠癌细胞生存率的影响 | 第46-47页 |
3.4.3 肠道菌群代谢产物处理细胞后,SIRT1基因的表达水平变化 | 第47-48页 |
3.4.4 BRB花青素下调肿瘤相关基因的表达 | 第48-50页 |
3.5 结论 | 第50-52页 |
第4章 结论与展望 | 第52-53页 |
致谢 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-61页 |
攻读学位期间发表学术论文及参加科研情况 | 第61-62页 |