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当前位置:教育论文中心首页--硕士论文--双峰驼CYP2J全长cDNA的克隆、生物信息学分析及其原核表达
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双峰驼CYP2J全长cDNA的克隆、生物信息学分析及其原核表达
 
     论文目录
 
摘要第4-5页
abstract第5-6页
缩略语表第11-12页
1 引言第12-22页
    1.1 双峰驼概述第12-13页
        1.1.1 双峰驼特性第12页
        1.1.2 双峰驼相关研究第12-13页
    1.2 细胞色素P450概述第13-15页
        1.2.1 细胞色素P450特性第13页
        1.2.2 细胞色素P450的命名规则第13页
        1.2.3 细胞色素P450的结构特征第13-14页
        1.2.4 细胞色素P450作用机制第14-15页
    1.3 CYP2J酶概述第15-16页
        1.3.1 CYP2J酶种类第15页
        1.3.2 CYP2J酶的表达分布第15页
        1.3.3 CYP2J的代谢作用第15-16页
        1.3.4 CYP2J的生理功能第16页
    1.4 cDNA末端快速克隆技术(RACE)概述第16-19页
        1.4.1 RACE技术的特点第16-17页
        1.4.2 RACE技术原理第17-18页
        1.4.3 RACE技术的应用前景第18-19页
    1.5 生物信息学概述第19-20页
        1.5.1 生物信息学的发展第19页
        1.5.2 生物信息学的应用第19-20页
    1.6 蛋白表达与纯化第20-21页
        1.6.1 蛋白原核表达系统第20页
        1.6.2 蛋白纯化第20-21页
    1.7 本研究的目的与意义第21-22页
2 双峰驼CYP2J完整cDNA的克隆及生物信息学分析第22-43页
    2.1 实验材料、试剂及仪器第22-24页
        2.1.1 实验材料第22页
        2.1.2 主要实验试剂第22页
        2.1.3 主要实验仪器第22-23页
        2.1.4 主要溶液和培养基的配制第23-24页
    2.2 实验内容和方法第24-32页
        2.2.1 引物设计与合成第24-25页
        2.2.2 双峰驼总RNA的提取第25-26页
        2.2.3 RACE实验第一链cDNA的合成第26-27页
        2.2.4 双峰驼CYP2J基因的3'RACE和5'RACE扩增第27-28页
        2.2.5 RACE产物的检测与纯化第28页
        2.2.6 RACE产物In-Fusion克隆及测序第28-29页
        2.2.7 双峰驼CYP2J基因开放阅读框的扩增第29-30页
        2.2.8 RT-PCR产物的检测和纯化第30-31页
        2.2.9 目的片段的连接、转化和鉴定第31页
        2.2.10 双峰驼CYP2J蛋白的生物信息学分析第31-32页
    2.3 结果第32-41页
        2.3.1 双峰驼总RNA的提取第32-33页
        2.3.2 双峰驼CYP2J基因的RACE克隆第33-34页
        2.3.3 重组载体pAT2-CYP2J的鉴定第34-35页
        2.3.4 双峰驼CYP2J基因的生物信息学分析第35-41页
    2.4 讨论第41-42页
    2.5 小结第42-43页
3 双峰驼CYP2J基因的原核表达及纯化第43-58页
    3.1 实验材料、仪器和方法第43-46页
        3.1.1 实验材料第43页
        3.1.2 主要实验试剂第43-44页
        3.1.3 主要实验仪器第44页
        3.1.4 主要溶液和培养基的配制第44-46页
    3.2 实验内容和方法第46-52页
        3.2.1 目的基因合成第46-48页
        3.2.2 表达载体的构建第48-49页
        3.2.3 重组表达载体的转化与鉴定第49页
        3.2.4 蛋白的表达第49-50页
        3.2.5 蛋白样品的SDS-PAGE检测第50页
        3.2.6 蛋白的纯化第50-51页
        3.2.7 蛋白纯化后的SDS-PAGE和Westernblot检测第51-52页
        3.2.8 蛋白纯化后的浓度测定第52页
    3.3 实验结果第52-57页
        3.3.1 CYP2J基因的合成第52-53页
        3.3.2 原核表达载体pET21a-CYP2J的鉴定第53-54页
        3.3.3 pET21a-CYP2J蛋白的表达第54页
        3.3.4 融合蛋白的纯化第54-55页
        3.3.5 纯化蛋白的Westernblot鉴定第55-56页
        3.3.6 蛋白纯化后浓度的测定第56-57页
    3.4 讨论第57-58页
    3.5 小结第58页
4 全文结论第58-60页
致谢第60-61页
参考文献第61-67页
作者简介第67页

 
 
论文编号BS3833331,这篇论文共67
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