| 中文摘要 | 第7-9页 |
| 英文摘要 | 第9-10页 |
| 英文缩略词 | 第11-13页 |
| 前言 | 第13-15页 |
| 技术路线图 | 第15-16页 |
| 1 实验材料 | 第16-18页 |
| 1.1 实验药材 | 第16页 |
| 1.2 实验仪器 | 第16页 |
| 1.3 实验试剂 | 第16-18页 |
| 1.4 实验动物 | 第18页 |
| 1.5 实验细胞株 | 第18页 |
| 2 实验方法 | 第18-25页 |
| 2.1 PC12细胞的培养 | 第18页 |
| 2.2 供试品的制备 | 第18-19页 |
| 2.2.1 通窍活血汤汤剂的提取 | 第18页 |
| 2.2.2 大鼠脑缺血模型的制作 | 第18-19页 |
| 2.2.3 通窍活血汤含药脑脊液的制备 | 第19页 |
| 2.3 谷氨酸损伤PC12细胞模型的建立 | 第19-20页 |
| 2.4 不同浓度空白大鼠脑脊液培养基对PC12细胞增值度选择 | 第20页 |
| 2.5 实验分组 | 第20页 |
| 2.6 相差倒置显微镜观察 | 第20页 |
| 2.7 细胞增殖及活力检测 | 第20-21页 |
| 2.8 细胞膜通透性作用的检测 | 第21页 |
| 2.8.1 台盼兰染色 | 第21页 |
| 2.8.2 AO/EB染色 | 第21页 |
| 2.8.3 LDH活力检测 | 第21页 |
| 2.9 细胞氧化应激水平检测 | 第21-22页 |
| 2.9.1 NO检测 | 第21页 |
| 2.9.2 ROS检测 | 第21-22页 |
| 2.9.3 SOD、MDA检测 | 第22页 |
| 2.10 细胞能量代谢与线粒体功能变化检测 | 第22页 |
| 2.10.1 ATP酶活性检测 | 第22页 |
| 2.10.2 线粒体膜电位检测 | 第22页 |
| 2.11 细胞胞浆内游离钙离子检测 | 第22-23页 |
| 2.12 Western-blotting法检测细胞损伤蛋白Bcl-2、Bax | 第23-25页 |
| 2.12.1 溶液配制 | 第23-24页 |
| 2.12.2 蛋白提取 | 第24页 |
| 2.12.3 Westen-blotting | 第24-25页 |
| 2.13 统计处理方法 | 第25页 |
| 3 实验结果 | 第25-46页 |
| 3.1 不同浓度谷氨酸对PC12细胞的增殖及活性影响 | 第25-26页 |
| 3.2 不同浓度大鼠空白脑脊液对PC12细胞增殖度影响 | 第26-27页 |
| 3.3 细胞形态变化 | 第27-28页 |
| 3.4 PC12细胞存活率测定结果 | 第28-30页 |
| 3.5 细胞膜通透性改变影响结果 | 第30-34页 |
| 3.5.1 AO/EB染色结果 | 第30-31页 |
| 3.5.2 台盼兰染色结果 | 第31-32页 |
| 3.5.3 LDH活力检测结果 | 第32-34页 |
| 3.6 细胞氧化应激水平变化 | 第34-39页 |
| 3.6.1 NO浓度检测结果 | 第34-35页 |
| 3.6.2 ROS浓度检测结果 | 第35-37页 |
| 3.6.3 SOD、MDA浓度检测结果 | 第37-39页 |
| 3.7 细胞能量代谢与线粒体功能变化 | 第39-42页 |
| 3.7.1 ATP酶活性检测结果 | 第39-40页 |
| 3.7.2 线粒体跨膜电位检测结果 | 第40-42页 |
| 3.8 细胞内游离钙离子浓度变化结果 | 第42-44页 |
| 3.9 Western-blotting法检测细胞损伤蛋白Bcl-2、Bax结果 | 第44-46页 |
| 4 讨论 | 第46-54页 |
| 4.1 脑脊液药理学以及脑脊液浓度选择 | 第46-47页 |
| 4.2 大鼠急性脑缺血模型制作以及采集脑脊液实验要点 | 第47-48页 |
| 4.3 PC12细胞及其谷氨酸损伤模型在抗脑缺血性脑卒中研究方面的应用 | 第48页 |
| 4.4 通窍活血汤含药脑脊液对谷氨酸损伤的PC12细胞的保护作用 | 第48-49页 |
| 4.5 NO、ROS与神经细胞损伤 | 第49-50页 |
| 4.6 ATP酶活性与MDA、SOD与细胞损伤 | 第50-51页 |
| 4.7 线粒体跨膜电位与细胞损伤 | 第51-52页 |
| 4.8 钙超载与神经细胞兴奋性损伤 | 第52页 |
| 4.9 Bcl-2、Bax与细胞凋亡之间的关系 | 第52-54页 |
| 总结 | 第54-56页 |
| 参考文献 | 第56-63页 |
| 综述 | 第63-71页 |
| 参考文献 | 第68-71页 |
| 附录 | 第71-72页 |
| 致谢 | 第72页 |
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