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女贞子油的提取及稳定性研究

【医学论文集】作者:边永玲 梁惠花 刘晓河【摘要】 目的建立从女贞子中提取脂肪油的方法,并预测该脂肪油的稳定性。方法分别运用传统法和超声技术提取女贞子油 ,并采用初均速法预测女贞子油的稳定性。结果超声技术提取的出油率为17.55%;其稳定性在293K时为t0.9=0.76年,t0.8=1.61年,t0.7=2.57年。结论 用超声技术提取女贞子油,可以提高提取率;女贞子油具有较高的稳定性。
【关键词】 女贞子油 超声技术 稳定性
Abstract:ObjectiveTo extract the fatty oil from Ligustrum lucidum ait. and to assay its stability. MethodsOil was extracted by ultrasonic technology and traditional technology. The stability was assayed by first even-speed method. ResultsExtraction rate of oil extracted by ultrasonic technology was 17.55%, its stability: t0.9=0.76 y,t0.8=1.61 y,t0.7=2.57. ConclusionUltrasonic technology can improve extraction rate of oil in Ligustrum lucidum ait., and the oil in Ligustrum Lucidum ait is stable.
Key words:Ligustrum lucidum ait.; Ultrasonic technology; Stability
女贞子又名冬青子,系木犀科常绿乔木女贞Ligustrum lucidum Ait.的干燥成熟果实,性味甘,微苦,凉,具有滋补肝肾、明目乌发的功能,临床主要用于治疗眩晕耳鸣,腰膝酸软,须发早白,目暗不明,失眠多梦及急性菌痢,慢性支气管炎等多种疾病[1]。据文献报道女贞子中含有大量油脂,女贞子油中脂肪酸的主要成分为油酸、亚油酸、棕榈酸和亚麻酸等,种子油中不饱和脂肪酸(PUFA)含量达87.179%[2],PUFA是人体必需脂肪酸,具有重要的生物活性和药用价值,自从20世纪70年代丹麦Dyerbeg教授发表了爱斯基摩人具有较低的冠心病发病率及死亡率的流行病学报告以后,大量基础及临床研究表明,多不饱和脂肪酸特别是二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)具有明确的降低胆固醇(TG)的作用,并可升高高密度脂蛋白(HDL-C),抑制血小板聚集,从而可以预防各种心脏疾病[3];多不饱和脂肪酸中的γ-亚麻酸(GLA)已被确认对40多种肿瘤细胞有抑制作用,对类风湿性关节炎、肠炎、脉管炎、肾炎等多种炎症具有疗效或改善作用。GLA和其系列代谢物在免疫系统、心血管系统、生殖系统和内分泌系统中都具有重要的生理效应,其潜在的药用及临床价值受到广泛的关注。我们分别采用冷浸法、索氏提取法及超声技术[4]提取了女贞子中的脂肪油,并参照有关文献[5],采用初均速法[6]预测了该脂肪油的稳定性。现将结果报道如下。
1 仪器与试剂
1.1 仪器RE-52A旋转蒸发器(上海亚荣生化仪器厂);GOA-型电热真空干燥箱(天津市东郊机械加工厂);DL-720超声波仪(45 kHz±5%);ZWA-型阿贝折光仪(石家庄光学仪器厂);DR-HW-1电热恒温水浴箱(北京西城区医疗器械厂);索氏提取器一套。
1.2 试剂女贞子购于张家口市医药公司,于硅胶干燥器中干燥2 d后备用;石油醚(30~60℃),乙醚,无水Na2SO4,均为AR级。
  2 方法与结果
2.1 女贞子油的提取
2.1.1 索氏提取法提取女贞子油精密称取干燥女贞子10 g,2份,于索氏提取器中,分别以100 ml石油醚和乙醚为溶剂进行回流提取,提取至经检验无油迹为止。用旋转蒸发器减压挥尽溶剂,用无水Na2SO4脱水干燥,得金黄色女贞子油(较混浊),在真空干燥器中干燥至恒重。计算收率。结果见表1。
2.1.2 冷浸法提取女贞子油精密称取样品10 g,用300 ml石油醚室温浸泡样品3次,用100 ml/次溶剂,浸泡时间为12 h/次,合并提取液,以下同“2.1.1”项处理,所得脂肪油澄清透明。结果见表1。
2.1.3 超声法提取女贞子油精密称取样品10 g,用50 ml/次石油醚为溶剂进行超声提取30 min,共提取两次,合并提取液,以下同“2.1.1”项处理,所得脂肪油澄清透明。结果见表1。表1 女贞子油的收率(略)
2.2 采用正交实验设计以确定最佳超声提取条件
2.2.1 实验因素水平表设计实验选择溶剂用量、提取时间、提取次数3个因素为考察对象,根据初步实验,每个因素确定3个水平,采用L9正交表安排实验。结果见表2。表2 因素水平表(略)
2.2.2 正交实验精密称取样品10 g,以石油醚为溶剂,按正交表进行实验,称重并计算产率。结果见表3。
从表3中数据可以看出,最佳提取条件为A2B2C3,即用50 ml溶剂,提取20 min/次,共提取3次。但A2B1C2与之很接近,为操作上的方便,我们采用了后者,即用50 ml溶剂,超声提取30 min/次,共提取2次。表3 正交实验结果(略)
2.3 女贞子油稳定性实验
2.3.1 女贞子油的恒温加速破坏实验 精密量取女贞子油1.0 ml于5 ml的具塞试管中,分别于恒温槽中经不同温度及对应时间(见表4)进行恒温加速破坏,到时间后,立即取出冷却至室温,终止反应的进行。
2.3.2 女贞子油折光率的测定取阿贝折光仪,用蒸馏水校正零点,用乙醚-丙酮棉球擦洗干净,待挥发干后,分别测定经破坏实验后的脂肪油的折光率数值。结果见表4。室温下的折光率为1.4750。表4 脂肪油的折光率(略)
2.3.3 数据处理以(lnVi+10)所得数值为Y,以1T×1000所得数值为X。实验中5个不同温度对应5个点,结果见表5。表5 破坏实验结果(略)
将上述数据进行线性回归,得回归方程为 Y=-21.019X+70.699,r=-0.997。根据Arrhenius公式lnki=A-EaRT,求出Ea=174762.48J/mol;用外推法求得293K时的k=1.608×10-5h-1,根据一级反应动力学方程求出反应掉10%,20%,30%时所需要的时间分别为t0.9=0.76年,t0.8=1.61年,t0.7=2.57年。通过留样观察,结果与恒温加速破坏实验结果一致。
  3 讨论
由表1数据可以看出,提取溶剂以石油醚的提取率较高,原因可能是石油醚的极性比乙醚小,因而提取脂溶性物质的能力比乙醚强。从表1数据还可以看出,在女贞子油的提取过程中,超声技术与传统方法相比,节省了溶剂,缩短了提取时间,简化了提取操作步骤,提高了出油率。原因是超声波的空化作用,以及超声波的许多次级效应,如机械振动、乳化、扩散粉碎等,有利于样品中有效成分的转移,同时,超声技术应用于有效成分的提取是在常温常压下进行的,避免了高温对有效成分的破坏,所以,超声技术特别适合于富含PUFA的油脂的提取。
通过正交实验,确立了超声提取女贞子油的最佳条件,用50 ml石油醚超声提取,30 min/次,提取2次即可。
通过恒温加速破坏实验,采用初均速法预测了女贞子油的稳定性,因为油脂在空气中放置过久会发生酸败,颜色加深,密度增大,折光率增大,并与留样观察结果相一致,说明采用折光率的变化来预测该脂肪油的稳定性的方法是可行的。该方法所用仪器简单,操作方便,数据处理结果线性关系良好。
实验结果表明,女贞子中油脂含量较高,女贞子油的稳定性也较好,具有很好的开发价值。
【参考文献】
[1]黄 婉,杨耀芳.女贞子及其有效成分的药理与临床研究进展[J].现代中西医结合杂志,2003,12(7):772.
[2]林文群,刘剑秋,陈 忠.女贞果实多糖提取工艺优选和种子油成分分析[J].福建师范大学学报(自然科学版),2003,19(1):81.
[3]洪 衡,项志敏.Omega-3不饱和脂肪酸与心血管病[J].中国医刊,2003,38(6):29.
[4]赵 兵,王玉春,欧阳藩,等.超声波在植物提取中的应用[J].中草药,1999,30(9):附1.
[5]姚松林,朱 英,许向群,等.川芎挥发油的稳定性研究[J].中成药,1999,21(5):255.
[6]姚松林,李国桢,韩修林,等.初均速法预测丹参注射液的稳定性[J].中国药学杂志,1989,24(5):286.

 
 
 
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