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牦牛能量物质转运及代谢的部分相关基因的克隆测序、表达谱及多态性研究
 
     论文目录
 
摘要第1-7页
Abstract第7-9页
前言第9-10页
第一部分 文献综述第10-15页
 1 葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)的结构及分布第10-11页
 2 单羧酸转运蛋白1、4(MCT1、4)的结构及分布第11-12页
 3 能量代谢中GLUT4、MCT1、MCT4 的相关研究第12-15页
   ·MCT1、MCT4 功能研究第12-13页
   ·缺氧条件下GLUT4、MCT1、MCT4 基因表达研究第13页
   ·运动状态下GLUT4、MCT1、MCT4 基因表达研究第13-14页
   ·GLUT4、MCT1、MCT4 基因表达发育性变化研究第14-15页
第二部分 实验研究第15-55页
 第一章 九龙牦牛 GLUT4、MCT1、MCT4 基因的克隆及序列分析第15-32页
  1 实验材料第15-16页
   ·实验动物第15页
   ·实验试剂第15页
   ·主要仪器第15-16页
   ·生物学应用软件第16页
  2 实验方法第16-18页
   ·总RNA 的提取第16页
   ·反转录cDNA第16-17页
   ·PCR 扩增GLUT4、MCT1、MCT4 基因第17页
   ·PCR 产物胶回收第17页
   ·胶回收产物的T 载体连接第17-18页
   ·转化第18页
   ·挑菌第18页
   ·测序第18页
  3 实验结果第18-30页
   ·总RNA 的提取结果第18-19页
   ·GLUT4、MCT1、MCT4 基因RT-PCR 扩增结果第19-20页
   ·GLUT4、MCT1、MCT4 基因与载体的重组及重组子的鉴定第20页
   ·GLUT4、MCT1、MCT4 重组质粒测序第20页
   ·九龙牦牛 GLUT4 基因核苷酸序列及氨基酸序列与普通牛比对第20-24页
   ·九龙牦牛MCT1 基因核苷酸序列及氨基酸序列与普通牛比对第24-27页
   ·九龙牦牛MCT4 基因核苷酸序列及氨基酸序列与普通牛比对第27-30页
  4 讨论第30-32页
 第二章 九龙牦牛 GLUT4、MCT1、MCT4 基因mRNA 水平的表达研究第32-42页
  1 实验材料第32-33页
   ·实验动物第32页
   ·主要试剂第32页
   ·主要仪器第32-33页
  2 实验方法第33-35页
   ·RNA 提取和反转录第33页
   ·荧光定量引物设计第33页
   ·荧光定量PCR 的反应体系第33-34页
   ·荧光定量PCR 扩增程序的设定第34页
   ·标准曲线的建立第34页
   ·相对定量计算方法的确定第34-35页
  3 实验结果第35-40页
   ·GLUT4、MCT1、MCT4、GAPDH 基因标准曲线的建立第35-37页
   ·牦牛肌肉GLUT4、MCT1、MCT4 基因的发育谱第37-38页
   ·牦牛与黄牛肌肉GLUT4、MCT1、MCT4 基因表达比较第38-39页
   ·背最长肌与股四头肌GLUT4、MCT1、MCT4基因mRNA水平比较第39-40页
  4 讨论第40-42页
   ·GLUT4、MCT1、MCT4 基因表达的发育谱第40页
   ·GLUT4、MCT1、MCT4 基因表达的牛种间比较第40-41页
   ·背最长肌、股四头肌GLUT4、MCT1、MCT4 基因表达比较第41-42页
 第三章 九龙牦牛 LDH-1 基因遗传变异体的克隆测序分析第42-47页
  1 实验材料第42页
  2 实验方法第42-43页
   ·PCR 扩增LDH-1 基因第42-43页
  3 实验结果第43-46页
   ·LDH-1 的 RT-PCR 扩增结果第43页
   ·LDH-1 目标片段与载体的重组及重组子的鉴定第43-44页
   ·LDH-1 基因重组质粒测序第44页
   ·九龙牦牛 LDH-1 基因遗传变异体核苷酸序列的比对第44-45页
   ·九龙牦牛LDH-1 基因遗传变异体氨基酸序列的比对第45-46页
   ·九龙牦牛LDH-1 基因遗传变异体分子量及等电点预测第46页
  4 讨论第46-47页
 第四章 九龙牦牛LDH-1基因遗传变异体的多态性研究及与同工酶谱的关联第47-55页
  1 实验材料第47-48页
   ·实验动物第47页
   ·实验试剂第47页
   ·主要仪器第47-48页
  2 实验方法第48-50页
   ·基因组DNA 的提取第48页
   ·LDHB-F 的PCR 扩增第48页
   ·LDHB-F 酶切第48页
   ·基因型频率和等位基因频率计算第48-49页
   ·遗传平衡吻合度检验第49页
   ·同工酶样品处理第49页
   ·同工酶电泳相关试剂配制第49-50页
   ·同工酶电泳实验步骤第50页
  3 实验结果第50-53页
   ·牦牛肌肉组织DNA 提取结果第50页
   ·LDHB-F 的PCR 扩增结果第50-51页
   ·LDHB-F 基因的酶切检测结果第51页
   ·LDHB-F 基因的等位基因频率及基因型频率分析第51-52页
   ·LDHB-F 基因多态位点的Hardy-Weinberg 平衡检测第52页
   ·LDH 同工酶电泳结果第52-53页
   ·LDHB-F 基因多态性与LDH 同工酶电泳结果关联第53页
  4 讨论第53-55页
结论第55-56页
参考文献第56-59页
致谢第59-61页
附录1:基因克隆相关试剂的配制方法第61-62页
附录2: MCT1、 MCT4、GAPDH 基因扩增曲线及标准曲线第62-63页

 
 
论文编号BS781,这篇论文共63
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