摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-15页 |
第一章 绪论 | 第15-32页 |
·猪圆环病毒病原学 | 第15-18页 |
·猪圆环病毒的基因组结构 | 第15-16页 |
·猪圆环病毒主要编码蛋白的结构与功能 | 第16-18页 |
·猪圆环病毒的分类 | 第18-19页 |
·猪圆环病毒 2 型的流行病学 | 第19-23页 |
·猪圆环病毒 2 型的流行概况 | 第19-20页 |
·猪圆环病毒 2 型流行毒株的变化 | 第20-22页 |
·PCV2 的传播 | 第22-23页 |
·PCV2 感染引起的疾病 | 第23-24页 |
·PCVAD 的发病机理 | 第24-25页 |
·PCVAD 相关致病因素 | 第25-28页 |
·PCV2 的动态感染 | 第25-26页 |
·饲养管理 | 第26页 |
·宿主因素 | 第26页 |
·病原的混合感染 | 第26-27页 |
·免疫调节 | 第27-28页 |
·PCV2 的疫苗研究现状 | 第28-31页 |
·原型疫苗 | 第28-29页 |
·商品化疫苗 | 第29-31页 |
·本研究的立题依据与研究意义 | 第31-32页 |
第二章 2008-2011 年中国部分地区猪圆环病毒 2 型的分子流行病学调查 | 第32-45页 |
·材料和方法 | 第32-36页 |
·样品采集 | 第32-33页 |
·主要菌株、试剂、载体 | 第33页 |
·样品处理及DNA的提取 | 第33页 |
·引物设计 | 第33页 |
·样品中PCV2的检测 | 第33-34页 |
·部分阳性样品PCV2 ORF2全序列的扩增 | 第34页 |
·PCV2 ORF2 序列的克隆与鉴定 | 第34-35页 |
·序列的测定与分析 | 第35-36页 |
·实验结果 | 第36-43页 |
·样品 PCV2 的 PCR 检测结果 | 第36-37页 |
·采集样品的 PCV2 感染统计结果 | 第37-38页 |
·部分阳性样品的 PCV2 ORF2 核苷酸序列分析 | 第38-39页 |
·部分阳性样品的 PCV2 ORF2 氨基酸序列分析 | 第39-43页 |
·讨论 | 第43-45页 |
第三章 猪圆环病毒衣壳蛋白在昆虫细胞中的表达 | 第45-65页 |
·材料和方法 | 第45-55页 |
·细胞、菌株与抗体 | 第45页 |
·载体与质粒 | 第45页 |
·主要试剂与主要仪器设备 | 第45-46页 |
·目的基因的扩增 | 第46页 |
·杆状病毒转移载体的构建与鉴定 | 第46-49页 |
·重组穿梭杆粒 rBacmid-cap 和 rBacmid- opt-cap 的构建与制备 | 第49-50页 |
·P1代重组杆状病毒的获得 | 第50-51页 |
·P2代重组杆状病毒的扩增、鉴定及滴度测定 | 第51-52页 |
·重组杆状病毒扩增条件的优化 | 第52-53页 |
·目的蛋白在Sf9昆虫细胞中的表达鉴定及表达量的比较 | 第53-55页 |
·目的蛋白在Sf9昆虫细胞中表达条件的优化 | 第55页 |
·猪圆环病毒PCV1A/1B VLPs的电镜观察 | 第55页 |
·结果 | 第55-63页 |
·PCV1A/1B ORF2基因密码子的优化 | 第55-56页 |
·PCV1A/1B野生型和密码子优化型ORF2基因片段的扩增 | 第56页 |
·重组转移质粒的酶切鉴定 | 第56-57页 |
·重组穿梭载体的PCR鉴定 | 第57页 |
·P2代重组杆状病毒的滴度测定和PCR鉴定 | 第57-58页 |
·重组杆状病毒扩增条件的优化 | 第58-59页 |
·P3 代重组杆状病毒的扩增和滴度测定 | 第59页 |
·间接免疫荧光检测目的蛋白的表达 | 第59-60页 |
·SDS-PAGE和Western-blotting检测 | 第60-61页 |
·目的蛋白在Sf9昆虫细胞中表达条件优化结果 | 第61-62页 |
·猪圆环病毒PCV1A/1B病毒样颗粒的电镜观察 | 第62-63页 |
·讨论 | 第63-65页 |
第四章 全文结论 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-83页 |
附录 | 第83-84页 |
致谢 | 第84-85页 |
作者简历 | 第85页 |