| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 缩略词表 | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-25页 |
| 1 核盘菌的生物习性和致病机理 | 第10-12页 |
| ·油菜菌核病 | 第10-12页 |
| ·核盘菌的生物学特性 | 第10页 |
| ·油菜菌核病的致病机理 | 第10-12页 |
| 2.植物抗病防御 | 第12-24页 |
| ·植物抗病防御的病理生理 | 第12-14页 |
| ·超敏反应 | 第12-13页 |
| ·系统获得性抗性 | 第13-14页 |
| ·诱导系统抗性 | 第14页 |
| ·植物抗病反应的信号传导途径 | 第14-19页 |
| ·抗病基因介导的抗病信号传递 | 第15页 |
| ·细胞程序化死亡与植物的抗病性 | 第15-16页 |
| ·水杨酸(salicylic acid,SA)介导的抗病信号途径 | 第16-18页 |
| ·茉莉酸(jasmonic acid,JA)和乙烯介导的抗病信号转导途径 | 第18页 |
| ·诱导系统抗性的信号传导途径 | 第18-19页 |
| ·植物抗菌核病的研究 | 第19-20页 |
| ·cDNA芯片技术(cDNA microarray) | 第20页 |
| ·基因表达系列分析(Serial analysis of gene expression,SAGE) | 第20-21页 |
| ·cDNA-AFLP | 第21-22页 |
| ·差异展示PCR(Differential Display Reverse Transcription PCR,DDRT-PCR) | 第22-23页 |
| ·抑制消减杂交(Suppression Subtractive Hybridization,SSH) | 第23页 |
| ·现有功能基因组研究方法的缺点 | 第23-24页 |
| 3.本课题研究的目的和意义 | 第24-25页 |
| 第二章 材料与方法 | 第25-38页 |
| 1 材料及处理 | 第25页 |
| ·材料 | 第25页 |
| ·接种及取材 | 第25页 |
| 2.总RNA抽提和mRNA分离 | 第25-27页 |
| ·实验器皿的准备 | 第25-26页 |
| ·总RNA的抽提 | 第26页 |
| ·mRNA分离 | 第26-27页 |
| 3.SSH文库的构建 | 第27-33页 |
| ·mRNA反转录 | 第27-28页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第27页 |
| ·cDNA第二链的合成 | 第27-28页 |
| ·用RsaⅠ酶消化cDNA | 第28页 |
| ·接头连接 | 第28-29页 |
| ·将Tester cDNA加上接头 | 第28-29页 |
| ·分析连接结果 | 第29页 |
| ·第一次杂交 | 第29-30页 |
| ·第二次杂交 | 第30-31页 |
| ·第一次PCR扩增 | 第31页 |
| ·第二次PCR扩增 | 第31-32页 |
| ·PCR产物和T-载体连接 | 第32页 |
| ·电转化(以下操作均在无菌环境下进行) | 第32-33页 |
| 4.SSH文库的筛选 | 第33-35页 |
| ·插入片断扩增和点膜 | 第33页 |
| ·预杂交 | 第33-34页 |
| ·cDNA探针合成 | 第34页 |
| ·杂交和显影 | 第34-35页 |
| 5.Northern杂交分析 | 第35-38页 |
| ·转膜 | 第35-36页 |
| ·预杂交 | 第36页 |
| ·探针制备 | 第36-37页 |
| ·杂交和显影 | 第37-38页 |
| 第三章 结果与分析 | 第38-48页 |
| 1.RNA含量和质量的检测 | 第38页 |
| 2.mRNA的质量检测 | 第38-39页 |
| 3.SSH文库的构建及质量检测 | 第39-42页 |
| ·Rsa Ⅰ消化效率的检测 | 第39-40页 |
| ·文库插入片段的检测 | 第40页 |
| ·消减效率的检测 | 第40-42页 |
| 4.SSH文库的反向northern筛选 | 第42-43页 |
| 5.SSH文库和cDNA芯片中筛选到的阳性克隆的分析 | 第43-45页 |
| 6.基因功能分类 | 第45-46页 |
| 7.不同时间段的基因表达情况 | 第46页 |
| 8.Northern验证及几个相关基因的表达谱 | 第46-48页 |
| 第四章 讨论 | 第48-53页 |
| 1.抑制性差减杂交结合反向northern筛选分离差异表达基因的有效性 | 第48页 |
| 2.甘蓝型油菜抗菌核病早期局部互作信号转导途径的初步分析 | 第48-53页 |
| 参考文献 | 第53-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 华中农业大学学位论文独创性声明及使用授权书 | 第61页 |
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