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紫云英共生固氮相关基因在铵胁迫及盐胁迫下的表达研究
 
     论文目录
 
摘要第1-9页
ABSTRACT第9-11页
缩略语表第11-12页
第一章 文献综述第12-39页
 1 共生固氮的概念和意义第12-14页
   ·微生物固氮的三种方式第12页
   ·根瘤菌与豆科植物的相互作用过程第12-13页
   ·根瘤菌中参与共生固氮的基因第13-14页
     ·结瘤基因第13-14页
     ·与根瘤菌细胞表面结构有关的基因第14页
     ·固氮基因第14页
 2 豆科植物中参与共生同氮的基因第14-20页
   ·参与宿主植物与根瘤菌相互识别的植物基因第15-18页
     ·宿主植物对根瘤菌结瘤因子的识别第15-16页
     ·宿主植物受体激酶基因第16-17页
     ·结瘤因子激活的信号传导途径第17-18页
   ·参与根瘤形成、发育的基因第18-19页
   ·与固氮等氮代谢有关的基因第19-20页
   ·与共生固氮相关的其他基因第20页
 3 共生固氮与自然环境的相互影响及作用第20-28页
   ·共生固氮对自然界生态平衡及农业生产的意义第20-21页
   ·影响共生固氮体系的环境因素第21-24页
     ·水分第22页
     ·氮素营养第22-23页
     ·温度第23页
     ·重金属第23页
     ·其它环境因子第23-24页
   ·盐胁迫对植物的生理影响及植物的应对机理第24-28页
     ·盐胁迫对植物生理生化和生长发育的影响第24-25页
     ·植物对盐胁迫的响应第25-26页
     ·增强植物耐盐性的途径第26-27页
     ·盐胁迫对豆科植物共生固氮功能的影响第27-28页
     ·豆科植物结瘤素基因在应对环境胁迫中的作用第28页
 4 本研究室对紫云英中共生固氮相关基因的研究工作第28-30页
 5 实时荧光定量PCR技术原理及应用第30-39页
   ·实时荧光定量PCR技术的原理简介第31页
   ·实时荧光定量PCR技术的相关参数第31-32页
   ·几种主要的荧光定量PCR技术第32-35页
     ·荧光标记探针技术第32-34页
     ·SYBR Green荧光染料法第34-35页
   ·实时荧光定量PCR的参照物第35-36页
     ·内参照第35页
     ·外参照物第35-36页
     ·荧光定量PCR参照物的选择第36页
   ·荧光定量RT—PCR反应系统实验设计原则第36-37页
     ·对扩增产物的要求第36页
     ·引物的设计第36-37页
   ·荧光定量PCR的应用第37-38页
     ·基因表达的研究第37页
     ·基因突变及其多态性第37页
     ·转基因植物产品检测第37-38页
   ·发展趋势及应用前景第38页
   ·本论文拟开展的研究内容和意义第38-39页
第二章 材料和方法第39-54页
 1 材料第39-42页
   ·植物及微生物材料第39页
   ·营养液与培养基配方第39页
   ·胁迫处理用的无机盐母液第39-40页
   ·常用贮存液和缓冲液配方第40-41页
   ·主要分子生物学试剂第41页
   ·主要耗材第41页
     ·提取RNA用耗材和器皿第41页
     ·荧光定量PCR用耗材第41页
   ·主要仪器设备第41页
   ·引物合成及测序第41-42页
 2 方法第42-54页
   ·盆栽紫云英第42-43页
     ·盆栽方法第42页
     ·接种根瘤菌第42-43页
   ·胁迫处理第43页
     ·胁迫处理安排第43页
     ·胁迫处理方法第43页
   ·盆栽植株的共生固氮效应检测第43-44页
   ·提取RNA第44-45页
     ·提取步骤第44页
     ·总RNA的纯化第44-45页
   ·Real—time PCR检测根瘤特异表达基因在胁迫下的表达特征第45-49页
     ·Real—time PCR引物设计及检验第45-46页
     ·普通RT—PCR第46-47页
     ·各胁迫处理样品的RNA浓度调整第47页
     ·各待测基因在各胁迫处理中的表达特征检测第47-49页
   ·对紫云英中若干共生固氮相关基因的克隆第49-51页
     ·引物设计第49-51页
     ·基因扩增 按TaKaRa公司试剂盒操作说明进行:第51页
   ·PCR产物的克隆与测序第51-54页
     ·PCR产物回收第52页
     ·PCR产物克隆 按pMD18—T载体说明书进行第52页
     ·连接产物转化大肠杆菌感受态细胞第52页
     ·质粒小量提取第52页
     ·阳性克隆的PCR验证第52-53页
     ·测序与序列分析第53-54页
第三章 结果与分析第54-88页
 1 紫云英在铵胁迫及盐胁迫下的共生固氮性状第54-59页
   ·各对照组的共生固氮效应分析第55页
   ·铵胁迫对共生固氮效应的影响第55-56页
   ·盐胁迫对共生固氮效应的影响第56-59页
     ·不添加额外氮源的盐胁迫第57-58页
     ·添加额外氮源的盐胁迫第58-59页
   ·小结第59页
 2 铵胁迫和盐胁迫对紫云英共生固氮相关基因表达的影响第59-80页
   ·紫云英植株RNA样品的提取第59页
   ·RNA样品的纯化和浓度调整第59-60页
   ·对Real—time PCR引物的验证第60页
   ·各样品RNA浓度的调整第60-62页
   ·豆血红蛋白基因AsB2510在胁迫处理下的表达特征第62-69页
     ·看家基因18SrRNA的标准曲线第62-64页
     ·豆血红蛋白基因AsB2510的标准曲线第64-66页
     ·AsB2510在各胁迫处理样品中的扩增曲线和融解曲线第66-67页
     ·豆血红蛋白基因AsB2510在胁迫处理下的表达特征第67-69页
   ·两个半胱氨酸蛋白(CCP)家族基因AsG2411和AsIIC2512在胁迫处理下的表达特征第69-73页
     ·个半胱氨酸蛋白(CCP)家族基因的标准曲线第69-71页
     ·两个半胱氨酸蛋白(CCP)家族基因在样品中的融解曲线第71-73页
   ·转脂质蛋白(LTP)基因AsE246在胁迫处理下的表达特征第73-76页
     ·转脂质蛋白(LTP)基因AsE246的标准曲线第73-74页
     ·LTP基因AsE246在胁迫处理下的表达特征第74-76页
   ·与结瘤素基因Nod3同源的AsIIA255在胁迫处理下的表达特征第76-78页
     ·结瘤素基因Nod3同源的AsIIA255的标准曲线第76-77页
     ·AsIIA255在样品中的融解曲线第77页
     ·AsIIA255基因在胁迫处理下的表达特征第77-78页
   ·小结第78-80页
 3 对紫云英中若干共生固氨相关基因的克隆第80-88页
   ·对紫云英共生受体激酶基因的克隆第80-84页
   ·对根瘤增强表达的磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因的克隆第84-85页
   ·对根瘤增强表达的二磷酸核苷酸磷酸酶基因的克隆第85-87页
   ·小结第87-88页
第四章 讨论第88-103页
 1 对铵胁迫及盐胁迫实验的讨论第88-90页
 2 对克隆的紫云英根瘤增强表达基因的讨论第90-92页
 3 要进一步进行的工作第92-103页
致谢第103-104页
论文发表情况第104页

 
 
论文编号BS1410332,这篇论文共104
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