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当前位置:教育论文中心首页--硕士论文--脂肪酶-P450脂肪酸脱羧酶融合蛋白催化的α烯烃合成的研究
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脂肪酶-P450脂肪酸脱羧酶融合蛋白催化的α烯烃合成的研究
 
     论文目录
 
摘要第3-5页
ABSTRACT第5-6页
第一章 前言第10-26页
    1.1 生物燃料和脂肪烃类生物燃料概述第10-12页
    1.2 基于异丙醇和丁醇代谢改造的生物燃料合成途径第12-14页
    1.3 基于脂肪酸代谢改造的脂肪烃生物合成途径第14-16页
    1.4 基于大肠杆菌脂肪酸代谢的脂肪烃合成途径第16-17页
    1.5 脂肪酶TlL和细胞色素P450酶第17-18页
    1.6 融合蛋白概述第18-22页
    1.7 融合蛋白在毕赤酵母系统中的表达第22-24页
    1.8 课题的内容、设计思路及意义第24-26页
        1.8.1 课题的研究内容第24页
        1.8.2 课题的设计思路第24-25页
        1.8.3 研究意义第25-26页
第二章 融合蛋白的表达、纯化以及酶活分析第26-62页
    2.1 引言第26-27页
    2.2 方案与技术路线第27-28页
    2.3 实验材料第28-36页
        2.3.1 目的基因和引物第28-31页
        2.3.2 化学试剂、工具酶及分子量maker、试剂盒、仪器和设备第31-33页
        2.3.3 相关溶液和培养基第33-36页
    2.4 实验方法第36-46页
        2.4.1 质粒提取第36页
        2.4.2 目的片段扩增第36-38页
        2.4.3 大肠杆菌化学感受态细胞的制备第38页
        2.4.4 大肠杆菌化学感受态细胞的DNA转化第38-39页
        2.4.5 表达载体的构建第39-40页
        2.4.6 重组蛋白诱导表达和Ni柱纯化第40-41页
        2.4.7 聚丙烯酰胺凝胶电泳第41页
        2.4.8 蛋白浓度测定第41-42页
        2.4.9 甘油三脂、脂肪酸和烯烃样品的配制第42-43页
        2.4.10 融合表达对TlL与OleTJE结构及活性的影响第43-45页
        2.4.11 重组蛋白的酶学特性测定第45-46页
        2.4.12 GC检测分析条件第46页
    2.5 结果与分析第46-60页
        2.5.1 菌株和质粒第46-48页
        2.5.2 表达质粒的构建及鉴定第48-49页
        2.5.3 重组融合蛋白的表达纯化第49-52页
        2.5.4 融合表达对TlL与OleTJE结构及活性的影响第52-54页
        2.5.5 融合蛋白脱羧活性研究第54-56页
        2.5.6 最佳活性融合蛋白体外产烃研究第56-57页
        2.5.7 最佳活性融合蛋白底物特异性研究第57-60页
    2.6 本章小结第60-62页
第三章 融合蛋白在毕赤酵母中的研究第62-85页
    3.1 引言第62-63页
    3.2 方案与技术路线第63-64页
    3.3 实验材料第64-72页
        3.3.1 目的基因和引物第64-66页
        3.3.2 化学试剂、工具酶及分子量maker、试剂盒、仪器和设备第66-69页
        3.3.3 相关溶液和培养基第69-72页
    3.4 实验方法第72-80页
        3.4.1 目的片段扩增第72-73页
        3.4.2 pPICZαA-TlL-OleT_(JE)的构建第73-74页
        3.4.3 重组DNA的大量提取第74-75页
        3.4.4 毕赤酵母电转化感受态细胞制备第75-76页
        3.4.5 毕赤酵母电转化重组DNA第76-77页
        3.4.6 毕赤酵母重组子的验证第77-78页
        3.4.7 重组蛋白的表达和纯化第78-80页
    3.5 结果与分析第80-83页
        3.5.1 菌株和质粒第80页
        3.5.2 表达质粒的构建及鉴定第80-82页
        3.5.3 重组融合蛋白的表达纯化第82-83页
    3.6 本章小结第83-85页
第四章 讨论第85-87页
结论第87-89页
致谢第89-90页
参考文献第90-97页
攻读学位期间发表的学术论文第97-98页

 
 
论文编号BS3171982,这篇论文共98
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