| 中文摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 目录 | 第7-9页 |
| 缩略词表 | 第9-10页 |
| 第一部分 引言 | 第10-16页 |
| 1.1 植物的抗冻能力 | 第10-15页 |
| 1.1.1 植物的抗冻生理研究 | 第10-12页 |
| 1.1.2 植物冷驯化相关分子信号机制 | 第12-15页 |
| 1.2 研究高山离子芥抗冻机理的意义 | 第15-16页 |
| 第二部分 实验材料与方法 | 第16-28页 |
| 2.1 高山离子芥的冷驯化机制 | 第16-19页 |
| 2.1.1 实验材料和处理方法 | 第16-17页 |
| 2.1.2 TRizol法提取高山离子芥RNA | 第17页 |
| 2.1.3 用提取的高山离子芥RNA反转录cDNA | 第17-18页 |
| 2.1.4 qPCR的方法和步骤 | 第18-19页 |
| 2.2 荧光定量PCR(qPCR)分析 | 第19-20页 |
| 2.3 高山离子芥愈伤组织中脯氨酸含量的测定 | 第20页 |
| 2.4 高山离子芥愈伤组织电导率的测定 | 第20页 |
| 2.5 高山离子芥相对细胞活性的检测 | 第20-21页 |
| 2.6 可溶性糖含量的测定 | 第21-22页 |
| 2.6.1 果糖含量的测定 | 第21页 |
| 2.6.2 蔗糖在愈伤组织中含量的测定 | 第21-22页 |
| 2.7 高山离子芥CB12798基因的克隆 | 第22-27页 |
| 2.7.1 愈伤组织总RNA的提取 | 第22页 |
| 2.7.2 RNA反转录后的cDNA | 第22页 |
| 2.7.3 PCR引物的设计和引物序列 | 第22页 |
| 2.7.4 用GATEWAY克隆技术构建植物过表达载体和转化 | 第22-27页 |
| 2.8. 转基因植株筛选 | 第27页 |
| 2.9 转基因CB12798拟南芥抗冻性生理实验 | 第27-28页 |
| 第三部分 实验结果 | 第28-39页 |
| 3.1 高山离子芥对冷驯化及冷冻处理的生理生化响应 | 第28-31页 |
| 3.1.1 质膜透性分析 | 第28页 |
| 3.1.2 TTC法测定细胞活性 | 第28-29页 |
| 3.1.3 可溶性糖含量的分析 | 第29-30页 |
| 3.1.4 高山离子芥愈伤组织内脯氨酸的测定结果 | 第30-31页 |
| 3.2 高山离子芥愈伤组织的基因表达对冷驯化及冷冻响应 | 第31-34页 |
| 3.3 CB12798基因的克隆 | 第34-37页 |
| 3.3.1 PCR扩增目的基因CDS区 | 第34-35页 |
| 3.3.2 CB12798基因的结构分析 | 第35-36页 |
| 3.3.3 转基因植株纯合体的筛选 | 第36页 |
| 3.3.4 纯合体的表型分析 | 第36-37页 |
| 3.4 CB12798转基因拟南芥的抗冻性 | 第37-39页 |
| 第四部分 讨论 | 第39-42页 |
| 4.1 高山离子芥冷驯化前后细胞活性的检测分析 | 第39页 |
| 4.2 高山离子芥愈伤组织中冷调节基因的表达分析 | 第39-40页 |
| 4.3 高山离子芥愈伤组织在不同温度处理条件下可溶性糖的检测结果分析 | 第40-41页 |
| 4.4 高山离子芥愈伤组织脯氨酸含量的实验结果分析 | 第41页 |
| 4.5 转基因CB12798拟南芥中抗冻性更强 | 第41-42页 |
| 第五部分 结论 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-48页 |
| 致谢 | 第48页 |
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