| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 第一章 前言 | 第12-22页 |
| 1 纤维素乙醇的研究概况 | 第12-17页 |
| 1.1 纤维素 | 第12-13页 |
| 1.2 纤维素酶 | 第13页 |
| 1.3 降解纤维素产纤维素酶的微生物 | 第13-14页 |
| 1.4 微生物降解纤维素产乙醇的研究进展 | 第14-15页 |
| 1.5 纤维素乙醇的国内外研究进展 | 第15-17页 |
| 2 宏基因组文库的研究概况 | 第17-20页 |
| 2.1 宏基因组的概念 | 第17页 |
| 2.2 宏基因文库的构建策略 | 第17-20页 |
| 2.2.1 样品中DNA的提取和富集 | 第18页 |
| 2.2.2 载体系统的选择 | 第18页 |
| 2.2.3 宿主系统的选择 | 第18-19页 |
| 2.2.4 宏基因组文库的筛选方法 | 第19-20页 |
| 2.3 宏基因组技术的研究进展 | 第20页 |
| 3 本研究的目的、意义和内容 | 第20-22页 |
| 3.1 本研究的目的和意义 | 第20-21页 |
| 3.2 本研究的内容 | 第21页 |
| 3.3 本研究的创新点 | 第21-22页 |
| 第二章 厌氧降解纤维素菌群SVY42的鉴定 | 第22-32页 |
| 1 材料与方法 | 第22-27页 |
| 1.1 实验材料 | 第22-24页 |
| 1.1.1 菌种和载体 | 第22页 |
| 1.1.2 引物 | 第22页 |
| 1.1.3 主要分析软件 | 第22页 |
| 1.1.4 主要试剂 | 第22-23页 |
| 1.1.5 主要仪器 | 第23页 |
| 1.1.6 主要溶液和培养基的配置 | 第23-24页 |
| 1.2 实验方法 | 第24-27页 |
| 1.2.1 厌氧富集培养技术 | 第24页 |
| 1.2.2 SVY42基因组DNA的提取 | 第24-25页 |
| 1.2.3 16S rDNA基因的PCR扩增 | 第25页 |
| 1.2.4 PCR扩增产物的纯化 | 第25页 |
| 1.2.5 连接反应 | 第25-26页 |
| 1.2.6 质粒转化 | 第26页 |
| 1.2.7 质粒DNA提取 | 第26页 |
| 1.2.8 重组质粒酶切验证 | 第26页 |
| 1.2.9 测序分析 | 第26-27页 |
| 2 结果与分析 | 第27-31页 |
| 2.1 厌氧降解纤维素菌群SVY42的富集培养 | 第27页 |
| 2.2 厌氧降解纤维素菌群SVY42的总基因组DNA的提取 | 第27-28页 |
| 2.3 16S rDNA的PCR扩增及其产物纯化 | 第28页 |
| 2.4 16S rDNA文库的构建和验证 | 第28-29页 |
| 2.5 厌氧降解纤维素菌群SVY42系统发育树的构建 | 第29-31页 |
| 3 小结 | 第31-32页 |
| 第三章 厌氧降解纤维素菌群SVY42的发酵条件分析 | 第32-48页 |
| 1 材料与方法 | 第32-38页 |
| 1.1 实验材料 | 第32-33页 |
| 1.1.1 菌种 | 第32页 |
| 1.1.2 主要仪器 | 第32页 |
| 1.1.3 主要试剂和培养基 | 第32-33页 |
| 1.2 实验方法 | 第33-38页 |
| 1.2.1 菌液生长密度的测定 | 第33页 |
| 1.2.2 发酵液中还原糖得率的测定 | 第33-34页 |
| 1.2.3 纤维素酶活测定 | 第34-35页 |
| 1.2.4 发酵液中乙醇含量测定 | 第35-36页 |
| 1.2.5 厌氧降解纤维素菌群SVY42生长条件测定 | 第36-37页 |
| 1.2.6 厌氧降解纤维素菌群SVY42发酵产糖条件的分析 | 第37页 |
| 1.2.7 厌氧降解纤维素菌群SVY42发酵产纤维素酶的酶活测定 | 第37-38页 |
| 1.2.8 厌氧降解纤维素菌群SVY42发酵产乙醇的测定 | 第38页 |
| 2 结果与分析 | 第38-47页 |
| 2.1 厌氧降解纤维素菌群SVY42生长条件的分析 | 第38-40页 |
| 2.1.1 最适生长温度的确定 | 第38-39页 |
| 2.1.2 最适生长pH的确定 | 第39页 |
| 2.1.3 生长曲线的测定 | 第39-40页 |
| 2.2 厌氧降解纤维素菌群SVY42转化纤维素发酵产糖条件分析 | 第40-43页 |
| 2.2.1 培养时间对SVY42转化纤维素产糖的影响 | 第40页 |
| 2.2.2 培养温度对SVY42转化纤维素产糖的影响 | 第40-41页 |
| 2.2.3 起始pH对SVY42转化纤维素产糖的影响 | 第41页 |
| 2.2.4 不同碳源对SVY42转化纤维素产糖的影响 | 第41-42页 |
| 2.2.5 不同氮源对SVY42转化纤维素产糖的影响 | 第42-43页 |
| 2.3 厌氧降解纤维素菌群SVY42发酵产纤维素酶的酶活测定 | 第43页 |
| 2.4 厌氧降解纤维素菌群SVY42发酵产乙醇的测定 | 第43-47页 |
| 3 小结 | 第47-48页 |
| 第四章 厌氧降解纤维素菌群SVY42宏基因组文库的构建 | 第48-60页 |
| 1 材料与方法 | 第48-55页 |
| 1.1 实验材料 | 第48-49页 |
| 1.1.1 菌种和载体 | 第48页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第48页 |
| 1.1.3 主要仪器 | 第48页 |
| 1.1.4 主要培养基和溶液 | 第48-49页 |
| 1.2 实验方法 | 第49-55页 |
| 1.2.1 厌氧降解纤维素菌群SVY42宏基因组DNA的制备与纯化 | 第49-51页 |
| 1.2.2 厌氧降解纤维素菌群SVY42宏基因组文库的构建 | 第51-52页 |
| 1.2.3 厌氧降解纤维素菌群SVY42宏基因组文库的涂布和保存 | 第52-53页 |
| 1.2.4 厌氧降解纤维素菌群SVY42宏基因组文库质量检测评估 | 第53-55页 |
| 1.2.5 从SVY42宏基因组文库中初步筛选含纤维素基因克隆子 | 第55页 |
| 2 结果与分析 | 第55-59页 |
| 2.1 菌群SVY42宏基因组DNA的提取和纯化 | 第55-56页 |
| 2.2 菌群SVY42宏基因组文库的构建和保存 | 第56-57页 |
| 2.3 菌群SVY42宏基因组文库的鉴定及评价 | 第57-59页 |
| 2.3.1 SVY42宏基因组文库插入片段的检测 | 第57-58页 |
| 2.3.2 SVY42的宏基因组文库稳定性分析 | 第58-59页 |
| 2.4 含有纤维素酶基因阳性克隆的初步筛选 | 第59页 |
| 3 小结 | 第59-60页 |
| 第五章 讨论与展望 | 第60-64页 |
| 1 讨论 | 第60-63页 |
| 1.1 厌氧降解纤维素菌群SVY42的菌群结构 | 第60-61页 |
| 1.2 菌群SVY42的降解纤维素产乙醇分析 | 第61页 |
| 1.3 厌氧降解纤维素菌群SVY42宏基因组文库的构建 | 第61-63页 |
| 2 展望 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-69页 |
| 附录 | 第69-81页 |
| 致谢 | 第81页 |
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