摘要 | 第7-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
上篇 文献综述 | 第12-33页 |
第一章 DNA甲基化及ALKBH家族的研究进展 | 第13-33页 |
1 疫霉菌的基本概述 | 第13-16页 |
1.1 疫霉菌的分类地位 | 第13-14页 |
1.2 疫霉菌的田间发病症状 | 第14页 |
1.3 疫霉菌的生活史 | 第14-15页 |
1.4 疫霉菌基因组研究进展 | 第15-16页 |
2 DNA甲基化与ALKBH家族的功能研究 | 第16-24页 |
2.1 表观遗传学 | 第16页 |
2.2 DNA甲基化 | 第16-17页 |
2.2.1 DNA甲基化概述 | 第16页 |
2.2.2 DNA甲基转移酶和去甲基化酶 | 第16-17页 |
2.3 6mA在真核生物中的研究进展 | 第17-19页 |
2.3.1 6mA在真核生物中的研究进展 | 第17-18页 |
2.3.2 6mA在疫霉菌中的研究进展 | 第18-19页 |
2.4 ALKBH家族在哺乳动物中的研究进展 | 第19-24页 |
2.4.1 ALKBH家族的来源、结构及其发展历史 | 第19-20页 |
2.4.2 ALKBH家族在哺乳动物中的研究进展 | 第20-24页 |
参考文献 | 第24-33页 |
下篇 研究内容 | 第33-79页 |
第一章 大豆疫霉及致病疫霉ALKBH同源基因的鉴定及序列分析 | 第35-47页 |
1 材料与方法 | 第36-38页 |
1.1 供试菌株 | 第37页 |
1.2 核酸去甲基化酶的预测及进化树构建 | 第37页 |
1.3 基因功能域分析 | 第37页 |
1.4 基因共线性分析 | 第37页 |
1.5 基因序列多态性分析 | 第37-38页 |
1.6 基因表达谱分析 | 第38页 |
2 结果与分析 | 第38-43页 |
2.1 大豆疫霉及致病疫霉中ALKBH同源基因的鉴定及进化树构建 | 第38页 |
2.2 致病疫霉中ALKBH同源基因的序列比对 | 第38-39页 |
2.3 大豆疫霉及致病疫霉中ALKBH同源基因功能域分析 | 第39-40页 |
2.4 三种疫霉中ALKBH同源基因的共线性分析 | 第40-41页 |
2.5 大豆疫霉不同生理小种ALKBH同源基因的序列多态性分析 | 第41页 |
2.6 大豆疫霉及致病疫霉中ALKBH同源基因不同阶段表达量分析 | 第41-43页 |
3. 讨论 | 第43-45页 |
参考文献 | 第45-47页 |
第二章 大豆疫霉ALKBH同源基因敲除突变体的制备及获得 | 第47-63页 |
1 材料与方法 | 第48-53页 |
1.1 供试菌株 | 第48-49页 |
1.2 培养基的制备 | 第49页 |
1.3 sgRNA的设计与筛选 | 第49页 |
1.4 载体构建 | 第49-50页 |
1.5 大豆疫霉转化 | 第50-51页 |
1.6 转化子的筛选 | 第51-53页 |
1.6.1 提取转化子基因组DNA | 第51-52页 |
1.6.2 通过PCR和基因组测序来验证目的基因的敲除 | 第52-53页 |
2 结果与分析 | 第53-59页 |
2.1 psalkbh2敲除突变体的筛选 | 第53-54页 |
2.2 psalkbh3敲除突变体的筛选 | 第54-55页 |
2.3 psalkbh4敲除突变体的筛选 | 第55-56页 |
2.4 psalkbh5敲除突变体的筛选 | 第56-58页 |
2.5 psalkbh6敲除突变体的筛选 | 第58-59页 |
3 讨论 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-63页 |
第三章 PsALKBH基因家族敲除突变体表型测定及分析 | 第63-79页 |
1 材料与方法 | 第64-65页 |
1.1 生长速率的测定 | 第64页 |
1.2 大豆黄化苗下胚轴侵染 | 第64-65页 |
1.3 卵孢子数量的测定 | 第65页 |
2 结果分析 | 第65-75页 |
2.1 psalkbh2敲除突变体的表型分析 | 第65-67页 |
2.1.1 psalkbh2敲除突变体不影响菌丝的生长及菌落形态 | 第65-66页 |
2.1.2 psalkbh2敲除突变体不影响大豆疫霉的致病性 | 第66页 |
2.1.3 psalkbh2敲除突变体影响大豆疫霉卵孢子的数量 | 第66-67页 |
2.2 psalkbh3敲除突变体的表型分析 | 第67-69页 |
2.2.1 psalkbh3敲除突变体不影响菌丝的生长及菌落形态 | 第67页 |
2.2.2 psalkbh3敲除突变体不影响大豆疫霉的致病性 | 第67-68页 |
2.2.3 psalkbh3敲除突变体影响大豆疫霉卵孢子的数量 | 第68-69页 |
2.3 psalkbh4敲除突变体的表型分析 | 第69-71页 |
2.3.1 psalkbh4敲除突变体不影响菌丝的生长及菌落形态 | 第69页 |
2.3.2 psalkbh4敲除突变体不影响大豆疫霉的致病性 | 第69-70页 |
2.3.3 psalkbh4敲除突变体不影响大豆疫霉卵孢子的数量 | 第70-71页 |
2.4 psalkbh5敲除突变体的表型分析 | 第71-73页 |
2.4.1 psalkbh5敲除突变体不影响菌丝的生长及菌落形态 | 第71页 |
2.4.2 psalkbh5敲除突变体不影响大豆疫霉的致病性 | 第71-72页 |
2.4.3 psalkbh5敲除突变体不影响大豆疫霉卵孢子的数量 | 第72-73页 |
2.5 psalkbh6敲除突变体的表型分析 | 第73-75页 |
2.5.1 psalkbh6敲除突变体不影响菌丝的生长及菌落形态 | 第73页 |
2.5.2 psalkbh6敲除突变体不影响大豆疫霉的致病性 | 第73-74页 |
2.5.3 psalkbh6敲除突变体不影响大豆疫霉卵孢子的数量 | 第74-75页 |
3 讨论 | 第75-77页 |
参考文献 | 第77-79页 |
附录 | 第79-93页 |
全文总结及创新点 | 第93-95页 |
攻读硕士学位期间发表的研究论文 | 第95-97页 |
致谢 | 第97页 |