摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
第1章 序言 | 第13-22页 |
1.1 孢子丝菌生物学特性 | 第13-14页 |
1.2 孢子丝菌病临床表现 | 第14-16页 |
1.2.1 组织反应 | 第14-15页 |
1.2.2 临床表现 | 第15-16页 |
1.3 孢子丝菌检测方法 | 第16-19页 |
1.3.1 (1,3)-β-D-葡聚糖检测(G试验) | 第16-17页 |
1.3.2 半乳甘露聚糖检测(GM试验) | 第17页 |
1.3.3 涂片镜检 | 第17页 |
1.3.4 真菌培养 | 第17页 |
1.3.5 分子诊断 | 第17-18页 |
1.3.6 酶联免疫检测 | 第18-19页 |
1.3.7 血清学检测 | 第19页 |
1.4 孢子丝菌标志抗原研究 | 第19-20页 |
1.5 紫外杀菌应用 | 第20-21页 |
1.6 研究思路 | 第21-22页 |
第2章 致病抗原的原核表达、产物纯化及特异性分析 | 第22-44页 |
2.1 序言 | 第22页 |
2.2 实验材料 | 第22-25页 |
2.2.1 实验仪器 | 第22-23页 |
2.2.2 实验药品及试剂 | 第23-24页 |
2.2.3 实验菌株及载体 | 第24页 |
2.2.4 实验培养基及溶液 | 第24-25页 |
2.3 实验方法 | 第25-36页 |
2.3.1 重组质粒的构建 | 第25-32页 |
2.3.2 重组蛋白的表达 | 第32-33页 |
2.3.3 重组蛋白的分离纯化 | 第33-35页 |
2.3.4 抗原的特异性分析 | 第35-36页 |
2.4 实验结果 | 第36-43页 |
2.4.1 重组质粒的构建 | 第36-37页 |
2.4.2 重组蛋白表达 | 第37-39页 |
2.4.3 重组蛋白的分离纯化 | 第39-42页 |
2.4.4 gp70蛋白的特异性检测 | 第42-43页 |
2.5 小结和讨论 | 第43-44页 |
第3章 致病抗原真核表达、产物纯化及特异性分析 | 第44-61页 |
3.1 引言 | 第44页 |
3.2 实验材料 | 第44-46页 |
3.2.1 实验仪器 | 第44页 |
3.2.2 实验药品及试剂 | 第44-45页 |
3.2.3 实验菌株及载体 | 第45-46页 |
3.2.4 实验培养基及溶液 | 第46页 |
3.3 实验方法 | 第46-53页 |
3.3.1 重组质粒的构建 | 第46-52页 |
3.3.2 真核重组质粒的表达 | 第52页 |
3.3.3 重组蛋白的分离纯化 | 第52-53页 |
3.4 实验结果 | 第53-59页 |
3.4.1 重组质粒pPICZlphaB-gp70-TEV-His双酶切验证 | 第53-54页 |
3.4.2 重组质粒pPICZlphaB-gp70-TEV-His线性化验证 | 第54页 |
3.4.3 pPICZlphaB-gp70-TEV-His拷贝数筛选结果 | 第54-55页 |
3.4.4 转化X-33菌落PCR鉴定结果 | 第55-56页 |
3.4.5 重组蛋白表达及鉴定 | 第56-57页 |
3.4.6 蛋白纯化及鉴定 | 第57-58页 |
3.4.7 间接ELISA检测真核表达gp70特异性 | 第58-59页 |
3.4.8 Westen Blotting检测天然抗原特异性 | 第59页 |
3.5 本章小结与讨论 | 第59-61页 |
第4章 天然抗原的提取、纯化及蛋白分析 | 第61-72页 |
4.1 引言 | 第61页 |
4.2 实验材料 | 第61-63页 |
4.2.1 实验仪器 | 第61页 |
4.2.2 实验药品及试剂 | 第61-62页 |
4.2.3 实验培养基及溶液 | 第62-63页 |
4.2.4 实验菌株 | 第63页 |
4.3 实验方法 | 第63-65页 |
4.3.1 天然抗原的提取 | 第63-64页 |
4.3.2 SDS-PAGE及Western Blotting验证 | 第64页 |
4.3.3 天然抗原的纯化 | 第64页 |
4.3.4 天然抗原的特异性检测 | 第64页 |
4.3.5 质谱鉴定 | 第64-65页 |
4.3.6 NCBI数据库比对 | 第65页 |
4.4 实验结果 | 第65-70页 |
4.4.1 Western Blotting检验抗原特异性 | 第65-66页 |
4.4.2 切胶回收结果 | 第66-67页 |
4.4.3 质谱鉴定 | 第67-68页 |
4.4.4 序列比对结果及三维模拟 | 第68-70页 |
4.5 本章小结与讨论 | 第70-72页 |
第5章 基于无汞紫外光源的孢子丝菌杀灭方法研究 | 第72-80页 |
5.1 引言 | 第72页 |
5.2 实验材料 | 第72-73页 |
5.2.1 实验仪器 | 第72页 |
5.2.2 实验药品及试剂 | 第72页 |
5.2.3 实验培养基及溶液 | 第72-73页 |
5.2.4 实验菌株 | 第73页 |
5.3 实验方法 | 第73-75页 |
5.3.1 EBE-UV | 第73页 |
5.3.2 杀菌装置 | 第73-74页 |
5.3.3 培养条件 | 第74页 |
5.3.4 杀菌实验 | 第74页 |
5.3.5 细胞ROS分析 | 第74-75页 |
5.3.6 细孢DNA损伤分析 | 第75页 |
5.4 实验结果 | 第75-79页 |
5.4.1 EBE-UV灯特征 | 第75-77页 |
5.4.2 EBE-UV灯的杀菌效果 | 第77-78页 |
5.4.3 细胞ROS结果 | 第78页 |
5.4.4 细胞DNA损伤结果 | 第78-79页 |
5.5 本章小结与讨论 | 第79-80页 |
第6章 总结与展望 | 第80-82页 |
6.1 全文总结 | 第80页 |
6.2 展望 | 第80-82页 |
参考文献 | 第82-92页 |
致谢 | 第92-93页 |
在读期间发表的学术论文与取得的其它研宄成果 | 第93页 |