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基于两种纳米抗体的亲和标签识别体系构建及其在色谱分离中的应用 |
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论文目录 |
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摘要 | 第2-4页 | Abstract | 第4-9页 | 引言 | 第9-10页 | 1文献综述 | 第10-27页 | 1.1抗体药物分离纯化 | 第10-13页 | 1.1.1概述 | 第10-11页 | 1.1.2抗体药物的纯化过程 | 第11-12页 | 1.1.3抗体纯化的一般方法 | 第12-13页 | 1.2免疫亲和层析技术 | 第13-20页 | 1.2.1免疫亲和层析介质 | 第14-15页 | 1.2.2免疫亲和层析配基 | 第15-16页 | 1.2.3亲和标签 | 第16-20页 | 1.2.3.1蛋白标签 | 第17页 | 1.2.3.2短肽标签 | 第17-20页 | 1.3纳米抗体 | 第20-26页 | 1.3.1纳米抗体概述 | 第20-21页 | 1.3.2纳米抗体的生物学特性 | 第21-22页 | 1.3.3纳米抗体的应用 | 第22-23页 | 1.3.4BC2-nb和BC2T亲和标签识别体系简介 | 第23-25页 | 1.3.5Syn2-nb和EPEA亲和标签识别体系简介 | 第25-26页 | 1.4本论文研究目的、意义 | 第26-27页 | 2两种纳米抗体和亲和标签识别体系的制备及活性检测 | 第27-44页 | 2.1引言 | 第27页 | 2.2实验试剂与仪器 | 第27-30页 | 2.2.1材料与试剂 | 第27-29页 | 2.2.2主要仪器及耗材 | 第29-30页 | 2.3实验方法 | 第30-37页 | 2.3.1BC2-nb和Syn2-nb重组序列构建 | 第30页 | 2.3.2eGFP-BC2T和eGFP-EPEA重组序列构建 | 第30-31页 | 2.3.3重组质粒的转化 | 第31页 | 2.3.4重组蛋白的表达与纯化 | 第31-32页 | 2.3.5菌体的破碎 | 第32页 | 2.3.6SDS-PAGE电泳 | 第32-34页 | 2.3.7IMAC纯化目标蛋白 | 第34-35页 | 2.3.8蛋白质浓度的测定方法 | 第35页 | 2.3.9蛋白质纯度的测定方法 | 第35-36页 | 2.3.10纳米抗体亲和力测定 | 第36-37页 | 2.4实验结果与分析 | 第37-43页 | 2.4.1BC2-nb和Syn2-nb的表达与纯化 | 第37-39页 | 2.4.2eGFP-BC2T和eGFP-EPEA的表达与纯化 | 第39-41页 | 2.4.3纳米抗体的亲和力测定 | 第41-43页 | 2.5本章小结 | 第43-44页 | 3免疫吸附柱的制备和性能评价 | 第44-55页 | 3.1引言 | 第44页 | 3.2实验材料与设备 | 第44-45页 | 3.2.1材料与试剂 | 第44-45页 | 3.2.2主要实验设备及耗材 | 第45页 | 3.3实验方法 | 第45-48页 | 3.3.1两种免疫亲和介质的制备 | 第45-46页 | 3.3.2洗脱条件的优化 | 第46-47页 | 3.3.3两种免疫亲和介质的动态结合载量测定 | 第47页 | 3.3.4吸附等温线测定 | 第47-48页 | 3.3.5蛋白质定量分析 | 第48页 | 3.4实验结果与讨论 | 第48-54页 | 3.4.1两种免疫亲和介质的制备 | 第48页 | 3.4.2洗脱缓冲液的优化 | 第48-51页 | 3.4.3动态结合载量测定 | 第51-52页 | 3.4.4等温吸附曲线的测定 | 第52-54页 | 3.5本章小结 | 第54-55页 | 4免疫亲和介质的实际使用效果评价 | 第55-61页 | 4.1引言 | 第55页 | 4.2实验材料与设备 | 第55-56页 | 4.2.1材料与试剂 | 第55页 | 4.2.2主要仪器及耗材 | 第55-56页 | 4.3实验方法 | 第56-57页 | 4.3.1从细胞破碎液中一步纯化目标蛋白 | 第56页 | 4.3.2目标蛋白精制纯化 | 第56页 | 4.3.3两种免疫亲和介质的循环使用次数测定 | 第56-57页 | 4.4实验结果与讨论 | 第57-60页 | 4.4.1从细胞破碎液中一步纯化目标蛋白 | 第57-58页 | 4.4.2目标蛋白精纯 | 第58-59页 | 4.4.3免疫亲和柱循环使用次数 | 第59-60页 | 4.5本章小结 | 第60-61页 | 结论 | 第61-62页 | 参考文献 | 第62-68页 | 附录A纳米抗体及模式蛋白序列 | 第68-69页 | 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第69-70页 | 致谢 | 第70-72页 |
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