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当前位置:教育论文中心首页--硕士论文--副溶血弧菌和溶藻弧菌快速检测体系的建立与应用
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副溶血弧菌和溶藻弧菌快速检测体系的建立与应用
 
     论文目录
 
摘要第1-11页
Abstract第11-14页
缩略词表(Abbreviation)第14-15页
第一篇 文献综述第15-33页
 1 副溶血弧菌研究进展第15-22页
   ·传统方法第15-16页
     ·国家标准方法第15页
     ·最大可能数法(MPN)第15-16页
   ·免疫学方法第16-17页
     ·酶联免疫吸附(ELISA)法第16页
     ·免疫荧光抗体技术第16页
     ·胶体金技术第16-17页
   ·分子生物学技术第17-21页
     ·环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)第17页
     ·PCR第17-20页
       ·单一PCR法第18页
       ·多重PCR第18页
       ·荧光定量PCR(FQ-PCR)第18-19页
       ·纳米PCR第19-20页
     ·核酸探针技术第20页
     ·UPPCR—SSCP第20页
     ·基因芯片技术第20-21页
     ·变性高效液相色谱(DHPLC)技术第21页
     ·Transcription-reverse transcription concerted(TRC)方法第21页
     ·DNA指纹图谱技术第21页
   ·传感器技术第21-22页
     ·、电化学技术第21-22页
     ·电子鼻技术第22页
 2 溶藻弧菌研究进展第22-28页
   ·传统方法第23页
   ·免疫学方法第23-25页
     ·酶联免疫吸附(ELISA)法第24页
     ·免疫荧光抗体技术第24页
     ·胶体金技术第24-25页
   ·分子生物学技术第25-28页
     ·环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)第25页
     ·PCR第25-27页
       ·单一PCR法第25-26页
       ·多重PCR第26页
       ·荧光定量PCR(FQ-PCR)第26页
       ·纳米PCR第26-27页
     ·核酸探针技术第27页
     ·UPPCR-SSCP第27页
     ·变性高效液相色谱(DHPLC)技术第27-28页
     ·DNA指纹图谱技术第28页
 3 纳米PCR技术及其研究进展第28-29页
 4 免疫胶体金技术及其研究进展第29-33页
   ·免疫胶体金技术的基本原理第29-30页
   ·免疫胶体金快速诊断技术第30-32页
     ·斑点免疫金渗滤法(DIGFA)第30页
     ·胶体金免疫层析法(GICA)第30-32页
   ·前景与展望第32-33页
第二篇 试验研究第33-57页
 试验一 多重PCR技术同时检测副溶血弧菌和溶藻弧菌方法的建立与初步应用第33-41页
  1 材料与方法第33-37页
   ·试验菌株第33页
   ·仪器和试剂第33页
   ·引物设计与合成第33-34页
   ·细菌模板最佳提取方法的选择第34页
   ·PCR体系的建立第34-36页
     ·常规PCR方法检测VP和VA方法的建立第34-35页
     ·多重PCR一步法技术同时检测VP和VA方法的建立第35-36页
   ·最佳反应条件的测定第36页
   ·灵敏度检测第36页
   ·特异性测定第36页
   ·稳定性测定第36页
   ·人工污染试验第36-37页
   ·临床检测第37页
  2 结果与分析第37-39页
   ·细菌模板提取方法比较第37页
   ·最佳反应条件的测定第37-38页
   ·灵敏度的测定第38页
   ·特异性测定第38-39页
   ·稳定性测定第39页
   ·人工污染试验第39页
   ·临床检测第39页
  3 讨论第39-41页
 试验二 纳米PCR技术检测副溶血弧菌的建立与初步应用第41-45页
  1 材料与方法第41-43页
   ·试验材料第41页
     ·试验菌株第41页
     ·仪器和试剂第41页
     ·引物设计与合成第41页
   ·试验方法第41-43页
     ·纳米金PCR检测VP的反应体系的建立第41-42页
     ·最佳反应条件的测定第42页
     ·灵敏度检测第42页
     ·特异性测定第42页
     ·稳定性测定第42页
     ·与普通PCR进行比较第42-43页
  2 结果与分析第43-44页
   ·最佳反应条件的测定第43页
   ·灵敏度的测定第43-44页
   ·特异性的测定第44页
   ·稳定性测定第44页
  3 讨论第44-45页
 试验三 纳米PCR技术检测溶藻弧菌的建立与初步应用第45-49页
  1 材料与方法第45-47页
   ·试验材料第45页
     ·试验菌株第45页
     ·仪器和试剂第45页
     ·引物设计与合成第45页
   ·试验方法第45-47页
     ·纳米金PCR检测VA的反应体系第45-46页
     ·最佳反应条件的测定第46页
     ·灵敏度检测第46页
     ·特异性测定第46页
     ·稳定性测定第46页
     ·与普通PCR进行比较第46-47页
  2 结果与分析第47-48页
   ·最佳反应条件的测定第47页
   ·灵敏度的测定第47-48页
   ·特异性的测定第48页
   ·稳定性测定第48页
  3 讨论第48-49页
 试验四 快速检测副溶血弧菌免疫胶体金层析法的研究第49-57页
  1 材料第49-50页
   ·仪器与试剂第49页
   ·菌株第49页
   ·主要试剂溶液的配置第49-50页
   ·抗体第50页
  2 方法第50-52页
   ·胶体金的制备和金标多抗的制备第50页
     ·玻璃器皿的清洗第50页
     ·胶体金颗粒的烧制第50页
   ·兔抗IgG胶体金的制备第50-51页
     ·兔抗IgG最佳标记量的确定第50-51页
     ·胶体金标记及纯化第51页
   ·胶体金免疫层析试纸法(GICA)第51-52页
     ·金标快速检测试纸条的组装第51-52页
     ·最佳封闭液的选择第52页
     ·各成分最佳浓度和灵敏度的测定第52页
     ·特异性试验第52页
     ·稳定性试验第52页
  3 结果分析第52-55页
   ·兔抗副溶血弧菌抗体效价检测和筛选处理及抗体纯化第52-53页
   ·兔抗IgG-1最佳标记量的确定第53-54页
   ·最佳封闭液的选择第54页
   ·试纸条的最佳条件和灵敏度的确定第54-55页
   ·试纸条的特异性第55页
   ·试纸条的稳定性第55页
  4 讨论第55-57页
第三篇 结论第57-58页
创新点第58-59页
参考文献第59-66页
附录第66-71页
 附录1:细菌模板的提取方法第66-68页
  1 传统方法(酚-氯仿提取法)第66页
  2 直接菌体加入法第66页
  3 反复冻融法第66-67页
  4 热裂解法第67页
  5 柱式细菌基因组DNA提取试剂盒法第67-68页
 附录2:细菌的培养与计数第68-69页
 附录3:兔抗VP多克隆抗体的制备方法第69-70页
  1 兔抗VP多抗血清的制备第69页
  2 玻片凝集试验测血清抗体效价第69页
  3 合格兔抗血清的处理第69-70页
  4 兔抗血清的纯化(饱和硫酸铵沉淀法纯化)第70页
 附录4:胶体金颗粒的烧制第70-71页
在学期间发表的论文第71页
申请专利第71-72页
论文思路来源第72页
致谢第72页

 
 
论文编号BS1808935,这篇论文共72
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