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当前位置:教育论文中心首页--博士论文--棉花纤维素生物合成复合体及相关蛋白功能研究
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棉花纤维素生物合成复合体及相关蛋白功能研究
 
     论文目录
 
第一篇 棉花纤维素生物合成复合体及相关蛋白功能分析第8-83页
    摘要第8-10页
    ABSTRACT第10-12页
    缩略词表第12-13页
    1. 文献综述第13-33页
        1.1 纤维素第13-15页
            1.1.1 纤维素结构第13页
            1.1.2 植物细胞壁第13-15页
        1.2 纤维素合酶第15-24页
            1.2.1 纤维素合酶第15-17页
            1.2.2 纤维素合酶复合体第17-18页
            1.2.3 纤维素合酶突变体第18-20页
            1.2.4 纤维素合酶酶学第20-22页
            1.2.5 纤维素合酶修饰第22页
            1.2.6 纤维素合酶复合体的装配和转运第22-24页
        1.3 纤维素生物合成相关蛋白第24-31页
            1.3.1 CESA互作蛋白第24-27页
            1.3.2 纤维素合成相关蛋白第27-31页
                1.3.2.1 KORRIGAN第27-28页
                1.3.2.2 β-谷甾醇糖苷及甾醇糖苷转移酶第28-30页
                1.3.2.3 细胞骨架第30页
                1.3.2.4 其它第30-31页
        1.4 本研究的目的和意义第31-33页
    2. 材料与方法第33-57页
        2.1 材料第33页
        2.2 菌株和载体第33-35页
        2.3 方法第35-57页
            2.3.1 棉花纤维素体外合成第35-41页
                2.3.1.1 纤维原生质膜的提取第35页
                2.3.1.2 纤维素体外(in vitro)合成第35页
                2.3.1.3 体外合成产物检测第35-36页
                2.3.1.4 抗体制备第36-38页
                2.3.1.5 免疫共沉淀(Co-IP)分离纤维素合酶复合体第38-39页
                2.3.1.6 Co-IP分离复合体的免疫印迹检测第39-41页
                2.3.1.7 Co-IP分离产物的纤维素合成第41页
            2.3.2 Co-IP分离产物分析和鉴定第41-44页
                2.3.2.1 SDS-PAGE分析第41页
                2.3.2.2 2D-PAGE分析第41-43页
                2.3.2.3 LC-MS鉴定第43-44页
            2.3.3 棉花甾醇糖苷转移酶基因克隆和表达分析第44-53页
                2.3.3.1 棉花纤维RNA提取第44-45页
                2.3.3.2 DNA的去除第45页
                2.3.3.3 第一链cDNA的合成第45-46页
                2.3.3.4 RACE法扩增cDNA末端第46-50页
                2.3.3.5 PCR产物加尾及回收第50-51页
                2.3.3.6 PCR回收产物连接第51页
                2.3.3.7 大肠杆菌DH5α感受态的制备第51页
                2.3.3.8 连接产物转化DH5α第51-52页
                2.3.3.9 菌落PCR检测阳性克隆第52页
                2.3.3.10 质粒提取第52页
                2.3.3.11 Real-time定量分析第52-53页
            2.3.4 棉花甾醇糖苷转移酶亚细胞定位第53-54页
            2.3.5 棉花甾醇糖苷转移酶活性分析第54-56页
                2.3.5.1 甾醇糖苷转移酶表达载体的构建第54页
                2.3.5.2 蛋白浓度测定第54-55页
                2.3.5.3 甾醇糖苷转移酶活性分析第55-56页
                2.3.5.4 纤维总甾醇的提取第56页
                2.3.5.5 甾醇糖苷转移酶合成产物鉴定第56页
            2.3.6 棉花热激处理第56-57页
    3. 结果与分析第57-76页
        3.1 外源纤维素酶添加与体外纤维素合成第57-58页
        3.2 Co-IP分离鉴定第58-59页
        3.3 2D-PAGE和SDS-PAGE检测第59-61页
        3.4 LC-MS鉴定第61-65页
        3.5 棉花甾醇糖苷转移酶基因克隆和生物信息学分析第65-68页
        3.6 棉花甾醇糖苷转移酶活性分析第68-74页
            3.6.1 酶纯化及酶活性第68-72页
            3.6.2 酶动力学第72-73页
            3.6.3 酶合成反应条件第73-74页
        3.7 棉花甾醇糖苷转移酶表达分析及热激反应第74-76页
    4. 讨论第76-82页
        4.1 纤维素合酶、纤维素合酶复合体和纤维素合成机理第76-79页
        4.2 甾醇、甾醇糖苷和甾醇糖苷转移酶与纤维素合成第79-82页
    5. 研究结论及工作展望第82-83页
第二篇 棉花纤维KORRIGAN和木葡聚糖转移酶基因功能初探第83-103页
    摘要第83-84页
    ABSTRACT第84-85页
    1. 文献综述第85-93页
    2. 材料与方法第93-98页
        2.1 材料第93页
        2.2 菌株和载体第93-94页
        2.3 方法第94-98页
            2.3.1 基因克隆及载体构建第94-95页
            2.3.2 农杆菌转化及质粒抽提第95-96页
            2.3.3 花粉管通道法第96页
            2.3.4 转基因棉株的PCR检测第96-98页
    3. 结果与分析第98-102页
        3.1 GhXTH2/JN968478基因全长序列的获得第98页
        3.2 GhXTH/XET系统发生学分析第98-99页
        3.3 GhXTH表达分析第99-100页
        3.4 重组载体构建第100-101页
        3.5 转基因注射第101-102页
    4. 讨论第102-103页
参考文献第103-127页
附录第127-139页
    附录1 常用试剂的配方第127-132页
    附录2 SGT编码序列和蛋白序列第132-138页
    附录3 引物序列第138-139页
作者简介第139-140页
攻读博士学位期间发表论文第140-168页
致谢第168页

 
 
论文编号BS3777335,这篇论文共168
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