摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
第一章 绪论 | 第8-14页 |
1.1 高温高糖环境对酵母生长的影响 | 第8页 |
1.2 酵母细胞耐热及高糖研究 | 第8-11页 |
1.2.1 酵母细胞耐热机制 | 第8-9页 |
1.2.2 酵母细胞耐高糖机制 | 第9-10页 |
1.2.3 酵母细胞耐热耐高糖机制重叠性研究 | 第10-11页 |
1.3 反义RNA技术研究进展 | 第11-12页 |
1.4 产甘油假丝酵母研究进展 | 第12页 |
1.5 研究意义及主要研究内容 | 第12-14页 |
1.5.1 研究意义 | 第12页 |
1.5.2 主要研究内容 | 第12-14页 |
第二章 材料与方法 | 第14-27页 |
2.1 材料 | 第14-21页 |
2.1.1 实验菌株与载体 | 第14-20页 |
2.1.2 培养基 | 第20-21页 |
2.1.3 主要仪器 | 第21页 |
2.2 方法 | 第21-27页 |
2.2.1 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)样品处理 | 第21-22页 |
2.2.2 酵母总RNA的提取 | 第22页 |
2.2.3 酵母总RNA的纯化及反转录 | 第22-23页 |
2.2.4 实时荧光定量PCR(qRT-PCR) | 第23页 |
2.2.5 酵母染色体DNA的提取 | 第23-24页 |
2.2.6 目标基因的PCR扩增 | 第24页 |
2.2.7 PCR产物的回收 | 第24-25页 |
2.2.8 酵母表达载体构建与转化 | 第25-26页 |
2.2.9 反义RNA技术应用于产甘油假丝酵母可行性分析 | 第26页 |
2.2.10 重组菌耐受性测定 | 第26页 |
2.2.11 重组菌胞内物质及发酵乙醇测定 | 第26-27页 |
第三章 结果与讨论 | 第27-47页 |
3.1 产甘油假丝酵母高温高糖联合压力应答基因的获得 | 第27-33页 |
3.1.1 产甘油假丝酵母与酿酒酵母高温高糖耐受性比较 | 第27页 |
3.1.2 高温高糖联合压力应答基因克隆 | 第27-28页 |
3.1.3 高温高糖联合压力应答基因的生物信息学分析 | 第28-29页 |
3.1.4 高温高糖联合压力应答基因转录水平分析 | 第29-33页 |
3.2 高温高糖联合压力应答基因对C.glycerinogenes耐受性影响 | 第33-39页 |
3.2.1 反义RNA抑制基因表达技术的建立和验证 | 第33-36页 |
3.2.2 反义RNA抑制压力应答基因表达 | 第36页 |
3.2.3 重组C.glycerinogenes菌株的耐受性测定 | 第36-39页 |
3.3 过表达高温高糖联合压力应答基因对S. cerevisiae耐受及发酵的影响 | 第39-47页 |
3.3.1 过表达S.cerevisiae菌株的构建 | 第39-40页 |
3.3.2 重组S.cerevisiae菌株的耐受性测定 | 第40-44页 |
3.3.3 重组S.cerevisiae高温高糖及乙酸压力下发酵分析 | 第44-47页 |
主要结论与展望 | 第47-49页 |
主要结论 | 第47页 |
展望 | 第47-49页 |
致谢 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-55页 |
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第55页 |