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当前位置:教育论文中心首页--硕士论文--RF-SRCA方法检测抗除草剂草甘膦大豆及其制品的研究
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RF-SRCA方法检测抗除草剂草甘膦大豆及其制品的研究
 
     论文目录
 
摘要第4-6页
Abstract第6-8页
1 引言第12-26页
    1.1 立题背景与意义第12-13页
    1.2 转基因作物概述第13-14页
    1.3 转基因大豆概述第14-15页
    1.4 转基因作物的安全性第15页
    1.5 转基因食品的管理第15-16页
    1.6 国内外转基因食品检测方法研究进展第16-21页
        1.6.1 基于蛋白质的检测方法第16-17页
        1.6.2 基于DNA的检测方法第17-20页
        1.6.3 其他检测方法第20-21页
    1.7 跨越式滚环等温扩增技术第21-22页
        1.7.1 SRCA技术概述第21页
        1.7.2 SRCA技术扩增原理第21-22页
        1.7.3 SRCA技术的优点与局限性第22页
    1.8 实时荧光跨越式滚环等温扩增方法第22-24页
        1.8.1 RF-SRCA方法概述第22-23页
        1.8.2 荧光染料的选择第23页
        1.8.3 RF-SRCA扩增结果判定方法第23-24页
    1.9 本研究主要内容第24-25页
    1.10 本研究技术路线第25-26页
2 材料与方法第26-39页
    2.1 材料与试剂第26-28页
        2.1.1 试验材料第26-27页
        2.1.2 试验试剂第27页
        2.1.3 试验仪器与设备第27-28页
    2.2 试验方法第28-32页
        2.2.1 基因组DNA的提取第28页
        2.2.2 基因组DNA浓度及纯度测定第28页
        2.2.3 引物设计第28-30页
        2.2.4 引物稀释及保存第30页
        2.2.5 RF-SRCA预反应体系第30-31页
        2.2.6 RF-SRCA预反应条件和预反应程序第31页
        2.2.7 RT-PCR反应体系和反应程序第31-32页
        2.2.8 RT-LAMP反应体系和反应程序第32页
    2.3 RF-SRCA反应条件和反应体系的优化第32-34页
        2.3.1 反应温度的优化第32-33页
        2.3.2 MgSO_4添加量的优化第33页
        2.3.3 dNTPs添加量的优化第33页
        2.3.4 BstDNA聚合酶缓冲液添加量的优化第33-34页
        2.3.5 引物添加量的优化第34页
        2.3.6 BstDNA聚合酶添加量的优化第34页
        2.3.7 荧光染料添加量的优化第34页
    2.4 RF-SRCA扩增结果分析第34-35页
        2.4.1 实时荧光扩增曲线法结果分析第34-35页
        2.4.2 可视化法结果分析第35页
        2.4.3 凝胶电泳法结果分析第35页
    2.5 RF-SRCA扩增产物测序分析第35-36页
    2.6 引物特异性分析第36页
    2.7 灵敏度分析第36-37页
        2.7.1 RF-SRCA灵敏度分析第36页
        2.7.2 RT-PCR灵敏度分析第36页
        2.7.3 RT-LAMP灵敏度分析第36-37页
        2.7.4 RF-SRCA、RT-PCR和RT-LAMP的灵敏度比较第37页
    2.8 检出限分析第37-38页
        2.8.1 人工加标样品处理第37页
        2.8.2 RF-SRCA检出限分析第37页
        2.8.3 RT-PCR检出限分析第37页
        2.8.4 RT-LAMP检出限分析第37页
        2.8.5 RF-SRCA、RT-PCR和RT-LAMP的检出限比较第37-38页
    2.9 RF-SRCA方法的实际应用第38-39页
3 结果与分析第39-58页
    3.1 模板DNA质量测定结果分析第39页
    3.2 模板DNA质量控制结果分析第39-40页
    3.3 RF-SRCA反应条件和反应体系的优化第40-44页
        3.3.1 反应温度的优化第40-41页
        3.3.2 MgSO_4添加量的优化第41页
        3.3.3 dNTPs添加量的优化第41-42页
        3.3.4 BstDNA聚合酶缓冲液添加量的优化第42页
        3.3.5 引物添加量的优化第42-43页
        3.3.6 BstDNA聚合酶添加量的优化第43页
        3.3.7 荧光染料EvaGreen添加量的优化第43-44页
    3.4 RF-SRCA最终反应条件和反应体系第44页
    3.5 RF-SRCA扩增结果分析第44-46页
        3.5.1 实时荧光扩增曲线法扩增结果分析第44-45页
        3.5.2 可视化法扩增结果分析第45页
        3.5.3 凝胶电泳法扩增结果分析第45-46页
    3.6 RF-SRCA扩增产物测序分析第46-47页
    3.7 RF-SRCA引物特异性验证第47-50页
        3.7.1 实时荧光扩增曲线法特异性分析第48页
        3.7.2 可视化法特异性分析第48-49页
        3.7.3 凝胶电泳法特异性分析第49-50页
    3.8 灵敏度分析第50-53页
        3.8.1 RF-SRCA实时荧光扩增曲线法灵敏度测定第50-51页
        3.8.2 RF-SRCA可视化法灵敏度测定第51页
        3.8.3 RF-SRCA凝胶电泳法灵敏度测定第51-52页
        3.8.4 RT-PCR灵敏度测定第52-53页
        3.8.5 RT-LAMP灵敏度测定第53页
    3.9 检出限分析第53-56页
        3.9.1 RF-SRCA实时荧光扩增曲线法检出限测定第53-54页
        3.9.2 RF-SRCA可视化法检出限测定第54页
        3.9.3 RF-SRCA凝胶电泳法检出限测定第54-55页
        3.9.4 RT-PCR检出限测定第55-56页
        3.9.5 RT-LAMP检出限测定第56页
    3.10 RF-SRCA方法的应用与评价第56-58页
4 讨论第58-62页
    4.1 RF-SRCA方法评价第58页
    4.2 RF-SRCA方法的优势第58-59页
    4.3 不同转基因作物检测方法的比较第59-60页
    4.4 大豆基因组DNA的提取和质量控制第60页
    4.5 影响RF-SRCA反应的主要因素第60-61页
        4.5.1 靶基因的选择第60页
        4.5.2 引物设计第60-61页
        4.5.3 其他影响因素第61页
    4.6 RF-SRCA反应注意事项第61-62页
5 结论与展望第62-64页
    5.1 结论第62-63页
    5.2 展望第63-64页
参考文献第64-73页
作者简历第73-74页
硕士期间发表学术论文第74-75页
致谢第75页

 
 
论文编号BS4734485,这篇论文共75
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