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α-乙酰乳酸脱羧酶基因过表达和敲除的K.pneumoniae代谢特性分析
 
     论文目录
 
摘要第1-6页
Abstract第6-11页
引言第11-12页
1 文献综述第12-29页
   ·香料工业的国内外发展现状第12-15页
   ·丁二酮的简介第15-19页
     ·丁二酮的背景介绍第15页
     ·丁二酮的生产方法第15-16页
     ·丁二酮的代谢途径研究第16-18页
     ·丁二酮的检测方法第18-19页
   ·利用微生物发酵生产丁二酮的研究进展第19-22页
     ·优化培养条件第19-20页
     ·筛菌或者诱变育种第20页
     ·基因工程育种第20-22页
   ·过表达菌株的构建研究进展第22-24页
   ·基因敲除菌株的构建研究进展第24-27页
   ·本课题的研究内容第27-29页
2 过量表达α-乙酰乳酸脱羧酶基因重组菌的构建和代谢产物分析第29-51页
   ·引言第29页
   ·实验材料和仪器第29-33页
     ·实验仪器第29-30页
     ·酶和试剂第30-31页
     ·菌株和质粒第31页
     ·引物第31页
     ·溶液的配制第31-32页
     ·培养基第32-33页
   ·实验方法第33-41页
     ·K.pneumoniae CICC10011的耐药性分析第33页
     ·ALDC基因的扩增第33-35页
     ·重组质粒的构建第35-36页
     ·重组质粒电转化克雷伯氏菌感受态细胞(参照NEB公司)第36-37页
     ·α-乙酰乳酸脱羧酶酶活的测定(参考GB20713和NOVO公司)第37-39页
     ·菌体浓的测定第39页
     ·残糖和底物浓度的测定第39-41页
   ·实验结果和讨论第41-50页
     ·克雷伯氏菌的耐药性分析第41页
     ·ALDC基因扩增及鉴定第41-42页
     ·重组质粒PBR322-ALDC的构建及酶切验证第42-43页
     ·重组菌株的筛选及验证第43-44页
     ·α-乙酰乳酸脱羧酶酶活的测定第44-45页
     ·重组菌生长代谢特性的研究第45-50页
   ·小结第50-51页
3 α-乙酰乳酸脱羧酶基因敲除重组菌的构建和代谢产物分析第51-67页
   ·引言第51页
   ·实验材料和仪器第51-52页
     ·菌株和质粒第51页
     ·引物第51页
     ·试剂第51页
     ·仪器第51-52页
     ·培养基第52页
     ·溶液的配制第52页
   ·实验方法第52-57页
     ·菌株基因组的提取第52页
     ·ALDC基因的扩增第52页
     ·重叠PCR第52-55页
     ·电转化第55页
     ·重组菌的PCR验证第55-56页
     ·α-乙酰乳酸脱羧酶酶活的测定第56-57页
     ·菌体浓度的测定第57页
     ·残糖和底物浓度的测定第57页
   ·实验结果和讨论第57-65页
     ·ALDC基因的扩增第57页
     ·重组DNA片段的获得第57-58页
     ·重组菌的筛选及验证第58-60页
     ·α-乙酰乳酸脱羧酶酶活分析第60页
     ·重组菌株生长代谢特性的研究第60-65页
   ·小结第65-67页
结论第67-68页
展望第68-69页
参考文献第69-73页
附录A 标准物校正因子计算第73-74页
附录B 标准样品的气相图谱第74-76页
附录C 乙酰乳酸脱羧酶基因测序结果第76-78页
附录D 重叠基因片段测序结果第78-82页
攻读硕士学位期间发表学术论文情况第82-83页
致谢第83-84页

 
 
论文编号BS85,这篇论文共84
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