| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 缩略词表 | 第9-10页 |
| 目录 | 第10-13页 |
| 前言 | 第13-14页 |
| 第1章 文献综述 | 第14-24页 |
| ·天然产物的生物转化 | 第14-18页 |
| ·甘草酸生物转化生成单葡萄糖醛酸甘草次酸 | 第14-17页 |
| ·非水介质中的生物转化 | 第17-18页 |
| ·非水介质中微生物细胞转化 | 第18页 |
| ·离子液体 | 第18-22页 |
| ·离子液体简介 | 第18-19页 |
| ·离子液体在生物催化中的应用 | 第19-21页 |
| ·离子液体对酶化学结构的影响 | 第21页 |
| ·离子液体应用前景 | 第21-22页 |
| ·论文研究的意义和技术框架 | 第22-24页 |
| ·论文研究的意义 | 第22-23页 |
| ·技术框架 | 第23-24页 |
| 第2章 材料与方法 | 第24-32页 |
| ·材料 | 第24-26页 |
| ·菌种 | 第24页 |
| ·培养基 | 第24-25页 |
| ·药品及试剂 | 第25-26页 |
| ·仪器 | 第26页 |
| ·方法 | 第26-32页 |
| ·全细胞酶活力的测定方法 | 第26-27页 |
| ·β-葡萄糖醛酸苷酶活力的测定方法 | 第27页 |
| ·蛋白质浓度的测定 | 第27-28页 |
| ·GL、GAMG及pNP标准曲线的绘制 | 第28-29页 |
| ·细胞固定化方法 | 第29-30页 |
| ·蛋白质的SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第30页 |
| ·重组大肠杆菌β-葡萄糖醛酸苷酶的分离纯化过程 | 第30页 |
| ·Ni-NTA Sepharose亲和层析 | 第30-31页 |
| ·高效液相色谱分析 | 第31页 |
| ·荧光光谱分析 | 第31页 |
| ·圆二色谱分析 | 第31-32页 |
| 第3章 甘草酸转化反应中非水介质和全细胞催化剂的筛选 | 第32-39页 |
| 引言 | 第32页 |
| ·确定全细胞收获的最佳时间 | 第32-35页 |
| ·收集全细胞w-PGUS的最佳时间 | 第33-34页 |
| ·收集全细胞r-PGUS-P的最佳时间 | 第34页 |
| ·收集全细胞r-PGUS-E的最佳时间 | 第34-35页 |
| ·非水介质和全细胞的筛选 | 第35-37页 |
| ·非水介质中全细胞的相对活性 | 第37-38页 |
| ·小结 | 第38-39页 |
| 第4章 水/离子液体两相体系中产紫青霉Li-3全细胞转化甘草酸 | 第39-49页 |
| 引言 | 第39页 |
| ·游离w-PGUS细胞在[Bmim]PF_6/水两相体系中的催化反应 | 第39-42页 |
| ·离子液体的添加比例对转化反应的影响 | 第39-40页 |
| ·缓冲液pH对w-PGUS转化反应的影响 | 第40-41页 |
| ·反应温度对w-PGUS转化反应的影响 | 第41-42页 |
| ·全细胞加入量对转化反应的影响 | 第42页 |
| ·固定化w-PGUS细胞在水/离子液体两相体系中的催化反应 | 第42-47页 |
| ·固定化材料的筛选 | 第42-43页 |
| ·[Bmim]PF_6加入比例对固定化细胞转化反应的影响 | 第43-44页 |
| ·缓冲液pH对固定化细胞转化反应的影响 | 第44-45页 |
| ·反应温度对固定化细胞转化反应的影响 | 第45页 |
| ·底物浓度对固定化细胞转化反应的影响 | 第45-46页 |
| ·两相体系中底物和产物的分配 | 第46-47页 |
| ·固定化细胞和离子液体的重复利用 | 第47页 |
| ·小结 | 第47-49页 |
| 第5章 水/离子液体两相体系中重组毕赤酵母全细胞转化甘草酸 | 第49-56页 |
| 引言 | 第49页 |
| ·水/离子液体体积比的影响 | 第49-50页 |
| ·两相体系中底物和产物的分配 | 第50-51页 |
| ·缓冲液pH的影响 | 第51-52页 |
| ·反应温度的影响 | 第52页 |
| ·底物浓度的影响 | 第52-53页 |
| ·细胞加入量和反应时间的影响 | 第53-54页 |
| ·最优条件下催化反应 | 第54页 |
| ·离子液体的重复利用 | 第54-55页 |
| ·小结 | 第55-56页 |
| 第6章 离子液体对β-葡萄糖醛酸苷酶催化特性及结构功能的影响 | 第56-68页 |
| 引言 | 第56页 |
| ·离子液体对β-葡萄糖醛酸苷酶的催化特性的影响 | 第56-62页 |
| ·离子液体的浓度对酶催化反应的影响 | 第56-57页 |
| ·离子液体对酶催化反应最适pH值的影响 | 第57-58页 |
| ·离子液体对酶催化最适反应温度的影响 | 第58-59页 |
| ·离子液体对酶催化最适反应底物浓度的影响 | 第59-60页 |
| ·反应动力学常数K_m及最大反应速度V_(max) | 第60-61页 |
| ·反应表观活化能的确定 | 第61-62页 |
| ·离子液体对β-葡萄糖醛酸苷酶结构和功能的影响 | 第62-67页 |
| ·重组β-葡萄糖醛酸苷酶的分离纯化过程 | 第62页 |
| ·Ni-NTA Sepharose亲和层析 | 第62-63页 |
| ·β-葡萄糖醛酸苷酶纯度鉴定 | 第63-64页 |
| ·Sephadex G-25凝胶过滤层析 | 第64页 |
| ·含离子液体介质中β-葡萄糖醛酸苷酶的荧光光谱 | 第64-65页 |
| ·圆二色谱二级构象分析 | 第65-67页 |
| ·小结 | 第67-68页 |
| 第7章 结论与展望 | 第68-70页 |
| ·结论 | 第68-69页 |
| ·展望 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
| 作者简介 | 第79-80页 |
| 导师评阅表 | 第80页 |
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