| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-14页 |
| 第一章 性别决定机制和性腺发育相关基因的研究进展 | 第14-55页 |
| 1 性别决定与性别分化 | 第15-29页 |
| ·性别决定机制 | 第16-19页 |
| ·环境与性别决定 | 第19-22页 |
| ·温度 | 第20-21页 |
| ·食物丰度 | 第21页 |
| ·密度及光照 | 第21-22页 |
| ·pH值 | 第22页 |
| ·性别决定和性腺发育相关基因 | 第22-29页 |
| ·Hox基因家族 | 第23页 |
| ·Sox基因家族 | 第23-26页 |
| ·其它基因 | 第26-29页 |
| 2 Dmrt基因研究进展 | 第29-48页 |
| ·Dmrt基因序列特征及聚类分析 | 第30-36页 |
| ·DM结构域序列特征分析 | 第30-32页 |
| ·氨基酸序列特征分析 | 第32-36页 |
| ·Dmrt基因的连锁关系分析 | 第36页 |
| ·Dmrt基因的功能 | 第36-47页 |
| ·Dmrt1 | 第36-39页 |
| ·Dmrt2 | 第39-40页 |
| ·Dmrt3 | 第40-41页 |
| ·Dmrt4 | 第41页 |
| ·Dmrt5 | 第41-42页 |
| ·Dmrt6 | 第42页 |
| ·Dmrt7和Dmrt8 | 第42-47页 |
| ·无脊椎动物dmrt基因的研究进展 | 第47-48页 |
| 3 基因功能研究现状 | 第48-53页 |
| ·RNA干扰策略 | 第50-51页 |
| ·RNA干扰技术在水生生物中的应用 | 第51-53页 |
| 4 本研究的立项依据和研究意义 | 第53-55页 |
| 第二章 栉孔扇贝(Chlamys farreri)dmrt家族基因的 DcNA克隆和序列特征分析 | 第55-76页 |
| 1 材料与方法 | 第55-61页 |
| ·材料 | 第55-56页 |
| ·方法 | 第56-61页 |
| ·DH5a感受态细胞的制备 | 第56页 |
| ·总RNA的提取和第一链cDNA的合成 | 第56-58页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第58页 |
| ·目的片段的PCR扩增 | 第58页 |
| ·目的片段的克隆 | 第58-59页 |
| ·基因全长cDNA序列的获得 | 第59-61页 |
| ·目的基因的核酸序列特征及氨基酸序列相似性分析 | 第61页 |
| 2 结果 | 第61-71页 |
| ·目的基因cDNA序列特征 | 第61-66页 |
| ·选择性剪接(Alternative splicing) | 第66-68页 |
| ·序列比对及系统进化分析 | 第68-71页 |
| ·栉孔扇贝CF-DMRT-LIKE蛋白三维结构 | 第71页 |
| 3 讨论 | 第71-76页 |
| ·Dmrt基因的命名原则 | 第71-72页 |
| ·选择性剪接 | 第72-74页 |
| ·核定位信号序列 | 第74-76页 |
| 第三章 栉孔扇贝(Chlamys farreri)dmrt基因的时空表达及Cf-dmrt4-like基因的发育表达图式 | 第76-99页 |
| 1 材料与方法 | 第77-85页 |
| ·材料 | 第77-78页 |
| ·成体组织 | 第77页 |
| ·胚胎、幼虫、稚贝和幼贝 | 第77-78页 |
| ·工具酶、试剂盒 | 第78页 |
| ·方法 | 第78-85页 |
| ·性腺组织学观察 | 第78页 |
| ·Dmrt家族基因的时空表达分析 | 第78-85页 |
| ·RT-PCR分析 | 第79页 |
| ·相对定量qRT-PCR分析 | 第79-80页 |
| ·原位杂交探针合成 | 第80-82页 |
| ·组织原位杂交 | 第82-84页 |
| ·整体原位杂交 | 第84页 |
| ·稚贝整体原位杂交和组织学观察 | 第84-85页 |
| 2 结果 | 第85-96页 |
| ·Cf-dmrt4-like基因的组织表达特征 | 第85-86页 |
| ·Cf-dmrt4-like基因在胚胎和幼虫中的表达 | 第85-86页 |
| ·原位杂交检测Cf-dmrt4-like基因在栉孔扇贝非性腺组织中的细胞学定位 | 第86页 |
| ·Cf-dmrt4-like基因在不同发育周期性腺中的表达 | 第86-92页 |
| ·Cf-dmrt4-like mRNA在发育周期性腺中的定量分析 | 第88页 |
| ·Cf-dmrt4-like基因在栉孔扇贝性腺发育周期中的表达图式 | 第88-92页 |
| ·性腺发育周期的组织学观察 | 第88-90页 |
| ·Cf-dmrt4-like mRNA在性腺中的原位杂交分析 | 第90-92页 |
| ·Cf-dmrt4-like基因的发育表达图式 | 第92-96页 |
| ·Cf-dmrt4-lik基因在发育过程中的定量表达分析 | 第92-93页 |
| ·Cf-dmrt4-like mRNA在栉孔扇贝发育中的原位杂交分析 | 第93-96页 |
| 3 讨论 | 第96-99页 |
| ·Cf-dmrt4-like mRNA的母源合成和在发育中的作用 | 第96-97页 |
| ·Cf-dmrt4-like mRNA在性腺中的表达 | 第97-98页 |
| ·Cf-dmrt4-like基因广泛参与非性腺组织的发育 | 第98-99页 |
| 第四章 栉孔扇贝Cf-dmrt4-like基因的RNA干扰尝试 | 第99-108页 |
| 1 材料和方法 | 第99-103页 |
| ·材料 | 第99-100页 |
| ·实验动物 | 第99-100页 |
| ·试剂 | 第100页 |
| ·方法 | 第100-103页 |
| ·引物设计 | 第100-101页 |
| ·dsRNA模板的制备 | 第101页 |
| ·体外转录合成dsRNA | 第101-102页 |
| ·dsRNA的鉴定 | 第102页 |
| ·dsRNA的注射和样品收集 | 第102-103页 |
| ·总RNA的提取 | 第103页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第103页 |
| ·qRT-PCR检测干扰效果 | 第103页 |
| 2 结果 | 第103-106页 |
| ·dsRNA的制备 | 第103-104页 |
| ·dsRNA的鉴定 | 第104-105页 |
| ·RNA干扰对栉孔扇贝Cf-dmrt4-like基因敲减的有效性分析 | 第105-106页 |
| 3 讨论 | 第106-108页 |
| 总结 | 第108-109页 |
| 参考文献 | 第109-121页 |
| 发表和完成的论文 | 第121-122页 |
| 致谢 | 第122页 |
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