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当前位置:教育论文中心首页--博士论文--中国对虾感染白斑症病毒(WSSV)后血细胞差异表达蛋白质的鉴定及其特性分析
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中国对虾感染白斑症病毒(WSSV)后血细胞差异表达蛋白质的鉴定及其特性分析
 
     论文目录
 
摘要第5-8页
Abstract第8-10页
0 前言第15-32页
    0.1 参与 WSSV 感染的对虾分子第15-20页
        0.1.1 对虾免疫相关分子第15-17页
        0.1.2 WSSV结合蛋白第17-20页
        0.1.3 其他参与WSSV感染的分子第20页
    0.2 蛋白质组学第20-25页
        0.2.1 蛋白质组学的概念及研究内容第20-21页
        0.2.2 蛋白质组学的研究技术第21-23页
        0.2.3 蛋白质组学技术在对虾病毒病中的应用第23-25页
    0.3 SUMO 化研究进展第25-28页
        0.3.1 SUMO化简介第25-26页
        0.3.2 SUMO化修饰在病毒感染中的作用第26-28页
    0.4 丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶研究进展第28-32页
        0.4.1 蛋白磷酸酶1第29-30页
        0.4.2 蛋白磷酸酶2A第30-32页
1 中国对虾感染 WSSV 后血细胞差异表达蛋白质的鉴定第32-49页
    1.1 实验材料与方法第32-38页
        1.1.1 实验材料第32-33页
        1.1.2 WSSV感染实验第33-34页
        1.1.3 血细胞总蛋白的制备第34页
        1.1.4 双向电泳第34-35页
        1.1.5 凝胶染色及图像扫描与分析第35-36页
        1.1.6 质谱分析与GO功能分类第36页
        1.1.7 RNA提取和cDNA第一链合成第36-37页
        1.1.8 实时荧光定量PCR实验第37-38页
    1.2 实验结果第38-44页
        1.2.1 WSSV对中国对虾感染的巢式PCR检测第38-39页
        1.2.2 中国对虾血细胞差异表达蛋白质的双向电泳分析第39-40页
        1.2.3 差异表达蛋白质的质谱鉴定和功能分类第40-44页
        1.2.4 实时荧光定量PCR对蛋白组学结果的验证第44页
    1.3 讨论第44-48页
    小结第48-49页
2 中国对虾 SUMO 和 SUMO E2 结合酶 UBC9 的基因克隆与表达分析第49-62页
    2.1 实验材料与方法第49-54页
        2.1.1 实验材料第49-50页
        2.1.2 FcSUMO和FcUBC9核心片段的获得第50-51页
        2.1.3 3’RACE和5’RACE第51-52页
        2.1.4 cDNA全长的获得及验证第52页
        2.1.5 FcSUMO和FcUBC9的生物信息学分析第52页
        2.1.6 FcSUMO和FcUBC9 mRNA的组织分布情况检测第52页
        2.1.7 WSSV感染后FcSUMO和FcUBC9的表达变化情况检测第52-54页
    2.2 实验结果第54-60页
        2.2.1 FcSUMO和FcUBC9核心序列和两端序列的获得第54-55页
        2.2.2 FcSUMO和FcUBC9 cDNA全长序列分析第55-56页
        2.2.3 FcSUMO和FcUBC9 与其他物种的同源性分析第56-59页
        2.2.4 FcSUMO和FcUBC9 mRNA在各组织中的表达第59页
        2.2.5 WSSV感染后对虾血细胞和性腺中FcSUMO和FcUBC9的表达变第59-60页
    2.3 讨论第60-61页
    小结第61-62页
3 中国对虾 SUMO ORF 和 UBC9 ORF 的原核表达及多克隆抗体制备及应用第62-74页
    3.1 实验材料与方法第62-70页
        3.1.1 实验材料第62-63页
        3.1.2 FcSUMO ORF和FcUBC9 ORF的原核表达第63-66页
        3.1.3 重组蛋白的纯化第66-67页
        3.1.4 多克隆抗体的制备与效价测定第67-68页
        3.1.5 免疫印迹法鉴定重组蛋白与多抗的结合第68-69页
        3.1.6 免疫印迹法鉴定中国对虾血细胞中的SUMO和UBC蛋白第69页
        3.1.7 间接免疫荧光实验第69-70页
    3.2 实验结果第70-72页
        3.2.1 FcSUMO ORF和FcUBC9 ORF的原核表达与纯化第70页
        3.2.2 重组蛋白与多抗结合的免疫印迹法鉴定第70-71页
        3.2.3 中国对虾血细胞中SUMO和UBC蛋白的免疫印迹法鉴定第71-72页
        3.2.4 间接免疫荧光实验第72页
    3.3 讨论第72-73页
    小结第73-74页
4 RNA 干扰实验分析 SUMO 和 UBC9 在病毒感染中的作用第74-81页
    4.1 实验材料与方法第74-77页
        4.1.1 实验材料第74页
        4.1.2 SUMO和UBC9 RNA干扰用引物的设计第74-75页
        4.1.3 dsSUMO和dsUBC9的合成第75页
        4.1.4 dsSUMO和dsUBC9干扰效率的测定第75页
        4.1.5 注射dsSUMO或dsUBC9对WSSV感染的影响第75-77页
    4.2 实验结果第77-80页
        4.2.1 SUMO和UBC9的干扰效率第77-78页
        4.2.2 注射dsRNA对对虾死亡率的影响第78页
        4.2.3 注射dsRNA对血细胞中病毒拷贝数和病毒基因表达量的影响第78-80页
    4.3 讨论第80页
    小结第80-81页
5 中国对虾蛋白磷酸酶 1 催化亚基β的基因克隆及原核表达第81-92页
    5.1 实验材料与方法第81-84页
        5.1.1 实验材料第81页
        5.1.2 FcPP1β核心片段的获得第81-82页
        5.1.3 3’RACE和5’RACE第82页
        5.1.4 cDNA全长的获得及验证第82页
        5.1.5 FcPP1β的生物信息学分析第82页
        5.1.6 FcPP1β mRNA的组织分布情况检测第82页
        5.1.7 WSSV感染后FcPP1β的表达变化情况检测第82-83页
        5.1.8 FcPP1β ORF的原核表达与重组蛋白纯化第83-84页
    5.2 实验结果第84-90页
        5.2.1 FcPP1β核心序列和两端序列的获得第84-85页
        5.2.2 FcPP1β cDNA全长序列分析第85-86页
        5.2.3 FcPP1β与其他物种的同源性分析第86-88页
        5.2.4 FcPP1β mRNA在各组织中的表达第88-89页
        5.2.5 WSSV感染后中国对虾血细胞和性腺中FcPP1β的表达变化第89页
        5.2.6 FcPP1β ORF的原核表达与重组蛋白纯化第89-90页
    5.3 讨论第90-91页
    小结第91-92页
总结第92-94页
参考文献第94-103页
致谢第103-104页
个人简历、在校期间发表的学术成果第104-105页

 
 
论文编号BS3776286,这篇论文共105
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