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当前位置:教育论文中心首页--硕士论文--极端耐热木聚糖酶XYNH的异源表达及酶学性质鉴定
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极端耐热木聚糖酶XYNH的异源表达及酶学性质鉴定
 
     论文目录
 
部分英文缩写解释第8-9页
摘要第9-10页
ABSTRACT第10页
第1章 绪论第11-23页
    1.1 木聚糖和木聚糖酶第11-13页
        1.1.1 木聚糖第11页
        1.1.2 木聚糖酶第11-13页
    1.2 耐热木聚糖酶第13-19页
        1.2.1 耐热木聚糖酶的优势第13-14页
        1.2.2 耐热木聚糖酶的来源第14-16页
        1.2.3 耐热机制第16-18页
        1.2.4 提高耐热性的技术手段第18-19页
    1.3 离子液体概述第19-20页
    1.4 木聚糖酶的应用现状第20-22页
        1.4.1 饲料工业第20页
        1.4.2 食品工业第20-21页
        1.4.3 造纸工业第21页
        1.4.4 生物能源第21-22页
    1.5 研究目的和意义第22-23页
第2章 木聚糖酶XYNH在大肠杆菌和毕赤酵母中表达第23-38页
    2.1 实验材料第23-25页
        2.1.1 菌种和质粒第23页
        2.1.2 试剂盒、工具酶和生化试剂第23页
        2.1.3 主要仪器第23页
        2.1.4 培养基第23-24页
        2.1.5 常用试剂第24-25页
    2.2 木聚糖酶XYNH原核表达菌株构建第25-29页
        2.2.1 大肠杆菌BL21感受态制备第25-26页
        2.2.2 提取目的基因的重组质粒第26-27页
        2.2.3 转化大肠杆菌宿主细胞BL21第27页
        2.2.4 阳性克隆子筛选第27-29页
    2.3 木聚糖酶XYNH真核表达菌株构建第29-31页
        2.3.1 毕赤酵母GS115感受态制备第29页
        2.3.2 重组表达载体线性化第29-30页
        2.3.3 电击转化第30页
        2.3.4 转化子的筛选第30-31页
    2.4 木聚糖酶XYNH的诱导表达第31-32页
        2.4.1 大肠杆菌诱导表达第31页
        2.4.2 毕赤酵母诱导表达第31页
        2.4.3 XYNH比活力的测定第31-32页
    2.5 原核表达XYNH的纯化第32页
        2.5.1 硫酸铵沉淀第32页
        2.5.2 Ni柱纯化原核表达XYNH第32页
    2.6 真核表达XYNH的浓缩和脱糖基化第32-33页
    2.7 木聚糖酶XYNH的SDS-PAGE分析第33-35页
        2.7.1 电泳样品制备第33页
        2.7.2 制胶第33-34页
        2.7.3 SDS-PAGE凝胶电泳第34-35页
    2.8 结果与分析第35-37页
        2.8.1 木聚糖酶XYNH两种表达菌株构建第35-36页
        2.8.2 木聚糖酶XYNH的SDS-PAGE分析第36-37页
    2.9 小结第37-38页
第3章 木聚糖酶XYNH酶学性质研究第38-48页
    3.1 实验材料第38-39页
        3.1.1 菌种和质粒第38页
        3.1.2 工具酶和生化试剂第38页
        3.1.3 实验仪器第38-39页
        3.1.4 培养基和常用溶液第39页
    3.2 实验方法第39-40页
        3.2.1 木聚糖酶XYNH的最适反应温度检测第39页
        3.2.2 木聚糖酶XYNH的最适反应pH检测第39页
        3.2.3 木聚糖酶XYNH的 100°C半衰期检测第39-40页
        3.2.4 木聚糖酶XYNH的pH稳定性检测第40页
        3.2.5 木聚糖酶XYNH耐受NaCl检测第40页
    3.3 结果分析第40-46页
        3.3.1 XYNH的三维结构第40-41页
        3.3.2 XYNH的酶学特性鉴定第41-46页
    3.4 小结第46-48页
第4章 离子液体对木聚糖酶XYNH的影响研究第48-54页
    4.1 实验材料第48页
        4.1.1 菌株第48页
        4.1.2 生化试剂第48页
        4.1.3 实验仪器第48页
        4.1.4 常用溶液和培养基第48页
    4.2 实验方法第48-49页
        4.2.1 离子液体[EMIM]OAc对木聚糖酶XYNH热稳定性影响第48-49页
        4.2.2 离子液体[EMIM]OAc对XYNH的酶活力响第49页
        4.2.3 不同浓度[EMIM]OAc条件反应Arrhenius活化能计算第49页
    4.3 结果分析第49-52页
        4.3.1 离子液体[EMIM]OAc木聚糖酶XYNH的热稳定性影响第49-50页
        4.3.2 离子液体[EMIM]OAc对XYNH的酶活力影响第50-51页
        4.3.3 不同浓度[EMIM]OAc条件反应Arrhenius活化能计算第51-52页
    4.4 小结第52-54页
结论第54-56页
参考文献第56-61页
致谢第61-62页
附录A 攻读硕士学位期间发表的论文第62-63页
附录B XYNH基因全序列第63页

 
 
论文编号BS4097586,这篇论文共63
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