摘要 | 第1-10页 |
Abstract | 第10-15页 |
1 引言 | 第15-31页 |
·活性氧产生的途径及其清除活性氧的系统 | 第15-24页 |
·活性氧产生的途径 | 第16-17页 |
·叶绿体内活性氧产生的途径 | 第17-18页 |
·活性氧的作用及其氧化损伤 | 第18-19页 |
·清除活性氧的酶促与非酶促系统 | 第19-22页 |
·有关抗氧化酶系统的基因工程 | 第22-24页 |
·APX 研究进展 | 第24-30页 |
·APX 的结构特点及系统分布 | 第24-27页 |
·APX 的分子功能 | 第27-29页 |
·叶绿体APX 的抗氧化功能 | 第29-30页 |
·本研究目的意义 | 第30-31页 |
2 材料与方法 | 第31-50页 |
·实验材料 | 第31-32页 |
·植物材料及处理 | 第31页 |
·菌株与质粒 | 第31页 |
·酶及生化试剂 | 第31页 |
·PCR 引物 | 第31-32页 |
·分子生物学实验方法 | 第32-45页 |
·总RNA 的提取(TRIZOL 试剂盒法) | 第32-33页 |
·反转录cDNA 第一条链的合成 | 第33-34页 |
·目的基因全长cDNA 的分离 | 第34-37页 |
·叶绿体tAPX 基因正义表达载体的构建 | 第37-39页 |
·农杆菌介导转化烟草 | 第39-40页 |
·转基因烟草的验证 | 第40-42页 |
·Northern 杂交分析(参考Sambrook 等,1989) | 第42-45页 |
·生理生化指标的测定 | 第45-50页 |
·测定种子发芽率 | 第45-46页 |
·测定植株的鲜重、干重 | 第46页 |
·光合速率的测定 | 第46-47页 |
·荧光参数的测定 | 第47页 |
·活性氧清除酶活性测定 | 第47-48页 |
·活性氧含量测定及AsA 含量测定 | 第48页 |
·膜脂伤害程度测定 | 第48-50页 |
3 结果与分析 | 第50-80页 |
·LetAPX 基因的分离及其特征 | 第50-56页 |
·APX 基因全长的克隆 | 第50-52页 |
·LetAPX 基因序列分析 | 第52-56页 |
·基因表达特性分析 | 第56-58页 |
·LetAPX 在番茄不同器官中的表达量不同 | 第56页 |
·低温诱导LetAPX 的表达 | 第56页 |
·高温诱导LetAPX 的表达 | 第56-57页 |
·盐胁迫诱导LetAPX 的表达 | 第57-58页 |
·干旱胁迫诱导LetAPX 的表达 | 第58页 |
·氧化胁迫诱导LetAPX 的表达 | 第58页 |
·转基因株系的获得及检测 | 第58-63页 |
·正义表达载体pBI-LetAPX 的构建 | 第58-59页 |
·克隆载体的PCR 检测 | 第59-60页 |
·表达载体的PCR 检测 | 第60页 |
·番茄LetAPX 基因转化烟草及转基因植株的分子检测 | 第60-61页 |
·番茄LetAPX 基因在烟草中的表达 | 第61-63页 |
·转 LetAPX 基因烟草的表型特征 | 第63-66页 |
·逆境胁迫下 LetAPX 基因的过量表达提高了烟草种子发芽率 | 第63-64页 |
·逆境胁迫下转基因种苗具有更强的生长势 | 第64-65页 |
·盐胁迫下转基因烟草维持较大的鲜重和干重 | 第65-66页 |
·逆境胁迫下转基因烟草生理生化指标的变化 | 第66-80页 |
·逆境胁迫下转基因烟草光合速率和叶绿素荧光参数的变化 | 第66-71页 |
·低温胁迫下转基因烟草光合速率和叶绿素荧光参数的变化 | 第66-67页 |
·高温胁迫下转基因烟草光合速率和叶绿素荧光参数的变化 | 第67-68页 |
·盐胁迫下转基因烟草光合速率和叶绿素荧光参数的变化 | 第68-70页 |
·干旱胁迫下转基因烟草叶绿素荧光参数的变化 | 第70页 |
·氧化剂胁迫下转基因烟草叶绿素荧光参数的变化 | 第70-71页 |
·逆境胁迫下转基因烟草 APX 和 CAT 活性的变化 | 第71-75页 |
·逆境胁迫下转基因烟草活性氧含量及膜伤害程度的变化 | 第75-80页 |
4 讨论 | 第80-88页 |
·逆境胁迫与植物活性氧代谢及APX 的作用 | 第80-81页 |
·tAPX 与植物的活性氧清除 | 第81-83页 |
·tAPX 的氨基酸序列分析 | 第83-84页 |
·tAPX 与植物抗逆性表达分析 | 第84-85页 |
·tAPX 与植物的生长发育 | 第85-86页 |
·tAPX 与植物的光破坏防御机制 | 第86-88页 |
5 结论 | 第88-89页 |
参考文献 | 第89-99页 |
附录 | 第99-102页 |
附录1 转基因愈伤及小苗 | 第99页 |
附录2 盐胁迫下的植株生长情况 | 第99-100页 |
附录3 常用缓冲液及培养基的配制 | 第100-102页 |
致谢 | 第102-103页 |
攻读学位期间已发表和待发表的论文 | 第103页 |