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3,5,6-三氯-2-吡啶醇降解菌Ralstonia sp.strain T6的分离与鉴定及降解特性和降解机制研究
 
     论文目录
 
摘要第1-10页
ABSTRACT第10-13页
符号和縮略语说明第13-14页
前言第14-15页
第一章 文献综述第15-33页
 一 3,5,6-三氯-2-吡啶醇(TCP)环境污染及微生物降解TCP研究进展第15-23页
  1 TCP污染来源及环境危害第15-18页
   ·TCP污染来源第15-17页
   ·TCP环境危害第17-18页
  2 TCP微生物降解第18-23页
   ·TCP微生物降解资源第18-19页
   ·微生物降解有机污染物机理第19-20页
   ·微生物降解影响因子第20-21页
   ·微生物降解TCP基因及代谢途径研究概况第21-23页
 二 氯代有机污染物微生物脱氯机制研究进展第23-28页
  1 水解脱氯第23-24页
  2 氧化脱氯第24-25页
  3 还原脱氯(严格厌氧)第25-26页
  4 巯基取代还原脱氯(有氧条件)第26-28页
 参考文献第28-33页
第二章 3,5,6-三氯-2-吡啶醇降解菌Ralstonia sp.strain T6的分离与鉴定、降解特性研究及降解中间体鉴定第33-63页
 第一节 3,5,6-三氯-2-吡啶醇(TCP)降解菌Ralstonia sp.strain T6的分离和鉴定第34-42页
  1 材料与方法第34-38页
   ·培养基和试剂第34-35页
   ·菌株和质粒第35页
   ·抗生素及使用浓度第35页
   ·TCP降解菌株的富集培养和筛选第35-36页
   ·降解菌株的菌落特征和生理生化鉴定第36页
   ·降解菌株16S rRNA基因序列分析第36-37页
   ·TCP检测方法——紫外扫描法第37-38页
  2 结果与分析第38-42页
   ·TCP降解菌的分离和菌落形态观察第38-39页
   ·生理生化特性第39-40页
   ·降解菌株16S rRNA基因序列分析第40-42页
 第二节 3,5,6-三氯-2-吡啶醇(TCP)降解菌Ralstonia sp.strain T6降解特性的研究及降解中间体鉴定第42-56页
  1 材料与方法第42-45页
   ·培养基和试剂第42页
   ·菌株第42页
   ·TCP浓度标准曲线的绘制第42-43页
   ·降解实验所用种子液的准备第43页
   ·Ralstonia sp.strain T6对TCP降解特性研究第43-44页
   ·TCP降解过程中绿色中间体的变化曲线第44页
   ·绿色中间体的鉴定第44-45页
  2 结果与分析第45-56页
   ·TCP浓度标准曲线的绘制第45-46页
   ·TCP降解曲线和降解过程中的生长曲线第46页
   ·接种量对TCP降解的影响第46-48页
   ·TCP初始浓度对降解的影响第48-49页
   ·温度和pH对TCP降解的影响第49-50页
   ·金属离子对TCP降解的影响第50-51页
   ·TCP降解过程中绿色中间体的变化曲线第51-53页
   ·绿色中间体的鉴定第53-56页
 讨论第56-58页
 本章小结第58-59页
 参考文献第59-63页
第三章 Ralstonia sp.strain T6中3,5,6-三氯-2-吡啶醇降解基因簇的克隆及序列分析第63-87页
 1 材料与方法第63-76页
   ·菌株与质粒第63页
   ·培养基与试剂第63-64页
   ·抗生素及使用浓度第64页
   ·质粒DNA的提取第64-65页
   ·基因组DNA提取第65-66页
   ·Ralstonia sp.strain T6中单加氧酶基因tcpA的扩增和同源重组单交换插入失活第66-68页
   ·针对Ralstonia sp.strain T6进行的随机插入突变子文库构建第68-69页
   ·侧翼序列的克隆第69-74页
   ·PCR产物回收及T-A克隆第74-75页
   ·普通感受态细胞的制备第75页
   ·高效感受态细胞的制备第75-76页
   ·酶连产物的转化第76页
   ·序列分析软件、在线分析网址第76页
 2 结果与分析第76-82页
   ·Ralstonia sp.strain T6中单加氧酶基因tcpA的同源重组单交换插入失活第76-77页
   ·Ralstonia sp.strain T6的随机插入突变子文库构建第77-78页
   ·侧翼序列克隆第78-80页
   ·侧翼序列分析第80-82页
 3 讨论第82-83页
 4 本章小结第83-84页
 参考文献第84-87页
第四章 Ralstonia sp.strain T6中TCP降解基因簇关键基因的功能验证第87-107页
 1 材料与方法第87-95页
   ·菌株、质粒和引物第87-88页
   ·培养基与试剂第88页
   ·抗生素及使用浓度第88-89页
   ·tcpA功能互补载体构建第89-90页
   ·tcpA功能互补实验第90-91页
   ·thpI和thpJ基因表达载体及菌株的构建第91-92页
   ·ThpI和ThpJ的诱导表达及功能检测第92-93页
   ·SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)第93-94页
   ·蛋白含量检测第94页
   ·PCR产物加A尾第94页
   ·PCR产物回收及T-A克隆第94页
   ·感受态细胞的制备第94-95页
   ·酶连产物的转化第95页
   ·质粒DNA的提取第95页
   ·降解中间体Met_(332)的鉴定第95页
 2 结果和分析第95-104页
   ·tcpA功能互补第95-97页
   ·ThpI和ThpJ的诱导表达及功能检测第97-103页
   ·菌株T6降解TCP的代谢途径推测第103-104页
 3 讨论第104-105页
 4 本章小结第105-106页
 参考文献第106-107页
全文总结第107-109页
本文主要创新之处第109-111页
附录一 文中所用的试剂、培养基及相关缓冲体系配方第111-113页
附录二 相关基因序列第113-121页
博士在读期间发表论文第121-123页
致谢第123页

 
 
论文编号BS2010887,这篇论文共123
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