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两种心肌损伤蛋白标志物准确定量方法研究
 
     论文目录
 
摘要第4-7页
ABSTRACT第7-10页
第一章 绪论第19-29页
    1.1 研究背景第19页
    1.2 心肌损伤标志物第19-20页
    1.3 hALB和hTRF检测方法现状第20-21页
        1.3.1 人血清白蛋白(hALB)第20页
        1.3.2 人转铁蛋白(hTRF)第20-21页
    1.4 高准确度蛋白质检测方法现状第21-27页
        1.4.1 非免疫学检测方法第21-25页
            1.4.1.1 液相色谱法第21页
            1.4.1.2 毛细管电泳法第21-22页
            1.4.1.3 液相色谱质谱法第22页
            1.4.1.4 同位素稀释质谱法(IDMS)第22-25页
        1.4.2 免疫学检测方法第25-27页
            1.4.2.1 酶联免疫检测技术(ELISA)第25页
            1.4.2.2 免疫荧光法(FBIA)第25页
            1.4.2.3 免疫胶体金法第25-26页
            1.4.2.4 Western blot法第26-27页
    1.5 课题提出第27-29页
第二章 人血清白蛋白和人转铁蛋白纯品含量的同位素稀释质谱方法究第29-43页
    2.1 仪器与试剂第29-31页
        2.1.1 仪器第29-30页
        2.1.2 试剂第30-31页
    2.2 实验内容第31-34页
        2.2.1 hALB和hTRF基本性质表征第31-32页
            2.2.1.1 SDS-PAGE纯度测定第31页
            2.2.1.2 MALDI-TOF分子量测定第31页
            2.2.1.3 蛋白质鉴定第31-32页
        2.2.2 HPLC-IDMS法测定hALB和hTRF蛋白质含量第32-33页
            2.2.2.1 hALB和hTRF样品的水解第32页
            2.2.2.2 HPLC-IDMS分析第32-33页
        2.2.3 质量平衡法测定hALB和hTRF蛋白含量第33-34页
            2.2.3.1 水分测定第33页
            2.2.3.2 灰分测定第33页
            2.2.3.3 凝胶排阻色谱测定hALB纯度第33页
            2.2.3.4 反相高效色谱法测定hTRF纯度第33-34页
    2.3 结果与讨论第34-41页
        2.3.1 hALB和hTRF基本性质的表征第34-36页
            2.3.1.1 SDS-PAGE纯度测定结果第34页
            2.3.1.2 MALDI-TOF分子量测定结果第34-35页
            2.3.1.3 蛋白质鉴定结果第35-36页
        2.3.2 纯品hALB和hTRF含量质量平衡法测定结果第36-38页
            2.3.2.1 水分测定第36页
            2.3.2.2 灰分测定第36页
            2.3.2.3 凝胶排阻色谱纯度测定第36-37页
            2.3.2.4 反相高效液相色谱纯度测定第37-38页
        2.3.3 纯品hALB和hTRF含量HPLC-IDMS测定水解时间优化结果第38页
        2.3.4 HPLC-IDMS方法的方法准确性、重复性和再现性评价第38-41页
            2.3.4.1 方法重复性第38页
            2.3.4.2 方法再现性第38-39页
            2.3.4.3 方法准确性第39页
            2.3.4.4 方法的不确定度评定第39-41页
            2.3.4.5 HPLC-IDMS方法的检出限与定量限评价第41页
    2.4 结论第41-43页
第三章 人血清中转铁蛋白含量的同位素稀释质谱方法研究第43-55页
    3.1 仪器与试剂第43-44页
        3.1.1 仪器第43页
        3.1.2 试剂第43-44页
    3.2 实验部分第44-46页
        3.2.1 hTRF的TMT标记和酶切第44页
        3.2.2 标记效率的评价第44-45页
        3.2.3 肽段的nLC-MS/MS分析第45-46页
        3.2.4 hTRF的特异性肽段的选择第46页
        3.2.5 血清中hTRF的酶联免疫吸附分析第46页
    3.3 结果与讨论第46-53页
        3.3.1 纯品hTRF的质量分数的测定第46页
        3.3.2 hTRF的特异性肽段的选择第46-47页
        3.3.3 标记效率的评价第47-49页
        3.3.4 报告离子纯度校正第49-50页
        3.3.5 TMT-IDMS方法定量血清中hTRF第50-51页
        3.3.6 加标回收率第51-52页
        3.3.7 IDMS方法的LOD和LOQ第52页
        3.3.8 ELISA定量血清中的hTRF第52页
        3.3.9 TMT-IDMS法的测定结果的量值溯源图第52-53页
    3.4 结论第53-55页
第四章 人血清中hTRF的化学发光免疫印迹测定方法研究第55-67页
    4.1 仪器与试剂第55-56页
        4.1.1 仪器第55页
        4.1.2 试剂第55-56页
    4.2 实验部分第56-57页
        4.2.1 Ladder的配制第56页
        4.2.2 样品的配制第56页
        4.2.3 加样第56-57页
        4.2.4 上机第57页
    4.3 结果与讨论第57-65页
        4.3.1 一抗的选择第58-59页
        4.3.2 样品前处理方法的选择第59-60页
        4.3.3 血清样品的测定第60页
        4.3.4 标准品的测定第60-61页
        4.3.5 方法学参数的考察第61-65页
            4.3.5.1 重复性第62页
            4.3.5.2 再现性第62-63页
            4.3.5.3 准确性第63页
            4.3.5.4 加标回收率第63-64页
            4.3.5.5 检出限及定量限第64页
            4.3.5.6 定量方法的选择第64-65页
    4.4 结论第65-67页
第五章 结论第67-69页
参考文献第69-73页
致谢第73-75页
研究成果及发表的学术论文第75-77页
作者和导师简介第77-78页
附件第78-79页

 
论文编号BS2619787,这篇论文共79
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