| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 英文缩写略表 | 第13-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-23页 |
| 1 脂多糖的结构 | 第14-15页 |
| 2 脂多糖中多糖结构研究方法的进展 | 第15页 |
| 3 细菌脂多糖和全疫苗对水产动物免疫保护的研究进展 | 第15-17页 |
| 3.1 细菌脂多糖对水产动物免疫保护的研究进展 | 第15-16页 |
| 3.2 全疫苗对水产动物免疫保护的研究进展 | 第16-17页 |
| 3.2.1 灭活疫苗 | 第16页 |
| 3.2.2 活疫苗 | 第16-17页 |
| 4 免疫增强剂提高蟹类抗病力的机制 | 第17-20页 |
| 4.1 三疣梭子蟹简介 | 第17页 |
| 4.2 蟹类的免疫特点 | 第17-18页 |
| 4.3 免疫增强剂的作用机制 | 第18-19页 |
| 4.3.1 增强氧化性杀菌机制 | 第18页 |
| 4.3.2 酚氧化酶原激活机制 | 第18-19页 |
| 4.3.3 增强血细胞吞噬作用机制 | 第19页 |
| 4.4 免疫增强剂在海洋经济蟹类养殖应用中存在的问题 | 第19-20页 |
| 4.4.1 免疫增强剂的局限性 | 第19页 |
| 4.4.2 免疫增强剂的使用方法 | 第19-20页 |
| 4.4.3 免疫增强剂的使用时间和剂量 | 第20页 |
| 5 研究的目的与意义 | 第20-21页 |
| 5.1 问题的提出 | 第20页 |
| 5.2 研究意义 | 第20-21页 |
| 6 主要研究内容与技术路线图 | 第21-23页 |
| 6.1 主要研究内容 | 第21-22页 |
| 6.2 技术路线图 | 第22-23页 |
| 第二章 南极细菌AT82的液体培养与脂多糖的制备 | 第23-30页 |
| 1 前言 | 第23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-26页 |
| 2.1 材料与仪器 | 第23-24页 |
| 2.1.1 菌株 | 第23页 |
| 2.1.2 基础培养基 | 第23页 |
| 2.1.3 试剂和仪器 | 第23-24页 |
| 2.2 试验方法 | 第24-26页 |
| 2.2.1 脂多糖的提取 | 第24页 |
| 2.2.2 脂多糖中多糖含量和蛋白质含量的测定 | 第24页 |
| 2.2.3 南极细菌AT82液体培养条件的优化 | 第24-25页 |
| 2.2.4 改良酚水法制备的粗脂多糖得率及蛋白质和糖含量的计算 | 第25-26页 |
| 3 结果与分析 | 第26-29页 |
| 3.1 测定蛋白质含量和多糖含量的回归方程 | 第26页 |
| 3.2 不同培养条件对AT82菌株生长量和脂多糖提取液中多糖含量的影响 | 第26-27页 |
| 3.3 正交试验 | 第27-29页 |
| 3.4 改良酚水法制备的粗脂多糖得率及其蛋白质和糖含量的测定 | 第29页 |
| 4 讨论 | 第29页 |
| 5 小结 | 第29-30页 |
| 第三章 南极细菌AT82灭活疫苗及其粗脂多糖对三疣梭子蟹非特异性免疫的影响 | 第30-44页 |
| 1 前言 | 第30-31页 |
| 2 材料与方法 | 第31-34页 |
| 2.1 试验材料 | 第31-32页 |
| 2.1.1 样品与试剂 | 第31页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第31页 |
| 2.1.3 试验蟹分组与管理 | 第31-32页 |
| 2.1.4 免疫及血清样本的制备 | 第32页 |
| 2.2 梭子蟹血清中非特异性免疫指标的测定方法 | 第32-34页 |
| 2.2.1 抗菌活力的测定 | 第32页 |
| 2.2.2 溶菌酶活力的测定 | 第32页 |
| 2.2.3 酚氧化酶活力的测定 | 第32页 |
| 2.2.4 过氧化物酶相对活力的测定 | 第32-33页 |
| 2.2.5 超氧化物歧化酶活力的测定 | 第33页 |
| 2.2.6 酸性磷酸酶活力的测定 | 第33页 |
| 2.2.7 碱性磷酸酶活力的测定 | 第33页 |
| 2.2.8 血细胞吞噬活力的测定 | 第33-34页 |
| 2.3 数据处理 | 第34页 |
| 3 结果与分析 | 第34-41页 |
| 3.1 脂多糖和灭活疫苗对梭子蟹血清抗菌活力的影响 | 第34-35页 |
| 3.2 脂多糖和灭活疫苗对梭子蟹血清溶菌酶活力的影响 | 第35-36页 |
| 3.3 脂多糖和灭活疫苗对梭子蟹血清酚氧化酶活力的影响 | 第36-37页 |
| 3.4 脂多糖和灭活疫苗对梭子蟹血清过氧化物酶相对活力的影响 | 第37页 |
| 3.5 脂多糖和灭活疫苗对梭子蟹血清超氧化物歧化酶活力的影响 | 第37-38页 |
| 3.6 脂多糖和灭活疫苗对梭子蟹血清酸性磷酸酶活力的影响 | 第38-39页 |
| 3.7 脂多糖和灭活疫苗对梭子蟹血清碱性磷酸酶活力的影响 | 第39页 |
| 3.8 脂多糖和灭活疫苗对血细胞吞噬活力的影响 | 第39-41页 |
| 4 讨论 | 第41-43页 |
| 5 小结 | 第43-44页 |
| 第四章 南极细菌AT82脂多糖的结构初探 | 第44-59页 |
| 1 前言 | 第44页 |
| 2 材料和方法 | 第44-49页 |
| 2.1 试剂和仪器 | 第44-45页 |
| 2.1.1 材料及试剂 | 第44-45页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第45页 |
| 2.2 试验方法 | 第45-49页 |
| 2.2.1 Cellulose DEAE-52离子交换柱层析分离AT82粗脂多糖 | 第45-46页 |
| 2.2.2 Sephadex G-100凝胶柱层析的进一步纯化 | 第46-47页 |
| 2.2.3 脂多糖纯化组分的理化特性 | 第47页 |
| 2.2.4 脂多糖纯化组分的凝胶渗透色谱分析 | 第47页 |
| 2.2.5 脂多糖纯化组分的紫外光谱分析 | 第47页 |
| 2.2.6 脂多糖纯化组分的红外光谱分析 | 第47-48页 |
| 2.2.7 糖肽键连接方式分析 | 第48页 |
| 2.2.8 刚果红试验 | 第48页 |
| 2.2.9 脂多糖纯化组分的单糖组成分析 | 第48-49页 |
| 3 结果与分析 | 第49-56页 |
| 3.1 Cellulose DEAE-52离子交换层析洗脱曲线 | 第49页 |
| 3.2 Sephadex G-100葡聚糖凝胶柱层析进一步纯化 | 第49-50页 |
| 3.3 脂多糖纯化组分的理化特性分析 | 第50-51页 |
| 3.4 脂多糖纯化组分的凝胶渗透色谱分析 | 第51-52页 |
| 3.4.1 标准曲线的建立 | 第51页 |
| 3.4.2 LPS1a和LPS2a的凝胶渗透色谱分析 | 第51-52页 |
| 3.5 脂多糖纯化组分的紫外光谱分析 | 第52页 |
| 3.6 脂多糖纯化组分的红外光谱分析 | 第52-53页 |
| 3.7 糖肽键连接方式分析 | 第53页 |
| 3.8 刚果红试验 | 第53-54页 |
| 3.9 脂多糖纯化组分的单糖组成分析 | 第54-56页 |
| 4 讨论 | 第56-57页 |
| 5 小结 | 第57-59页 |
| 第五章 南极细菌AT82粗脂多糖及其纯化组分的抗氧化活性研究 | 第59-70页 |
| 1 前言 | 第59页 |
| 2 材料和方法 | 第59-63页 |
| 2.1 试剂和仪器 | 第59-60页 |
| 2.1.1 试验样品 | 第59页 |
| 2.1.2 试验动物 | 第59页 |
| 2.1.3 主要试剂和仪器 | 第59-60页 |
| 2.2 试验方法 | 第60-63页 |
| 2.2.1 粗脂多糖及其纯化组分体外抗氧化活性的测定 | 第60-61页 |
| 2.2.2 粗脂多糖及其纯化组分对小鼠肝组织匀浆丙二醛生成的影响 | 第61-62页 |
| 2.2.3 粗脂多糖及其纯化组分对小鼠肝线粒体脂质过氧化的抑制作用 | 第62页 |
| 2.2.4 粗脂多糖及其纯化组分对小鼠体外脾淋巴细胞增殖的影响 | 第62-63页 |
| 3 结果与分析 | 第63-68页 |
| 3.1 粗脂多糖及其纯化组分清除DPPH自由基的测定 | 第63-64页 |
| 3.2 粗脂多糖及其纯化组分清除羟自由基的测定 | 第64页 |
| 3.3 粗脂多糖及其纯化组分清除超氧阴离子自由基的测定 | 第64-65页 |
| 3.4 粗脂多糖及其纯化组分对小鼠肝组织匀浆丙二醛生成的影响 | 第65-66页 |
| 3.5 粗脂多糖及其纯化组分对小鼠肝线粒体脂质过氧化的抑制作用 | 第66-67页 |
| 3.6 粗脂多糖及其纯化组分对小鼠体外脾淋巴细胞增殖的影响 | 第67-68页 |
| 4 讨论 | 第68-69页 |
| 5 小结 | 第69-70页 |
| 第六章 结论与展望 | 第70-72页 |
| 1 结论 | 第70-71页 |
| 2 展望 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-79页 |
| 致谢 | 第79页 |
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