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长野芽孢杆菌普鲁兰酶基因在枯草芽孢杆菌中的整合表达 |
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论文目录 |
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摘要 | 第3-4页 | Abstract | 第4页 | 第一章 绪论 | 第7-14页 | 1.1 普鲁兰酶概述 | 第7-8页 | 1.2 普鲁兰酶的研究进展 | 第8-9页 | 1.2.1 普鲁兰酶的产酶微生物及其酶学性质 | 第8-9页 | 1.2.2 普鲁兰酶异源表达的研究进展 | 第9页 | 1.3 枯草芽孢杆菌表达系统 | 第9-11页 | 1.3.1 概述 | 第9-10页 | 1.3.2 枯草芽孢杆菌宿主菌株 | 第10页 | 1.3.3 枯草芽孢杆菌的启动子 | 第10-11页 | 1.4 枯草芽孢杆菌整合载体 | 第11-12页 | 1.4.1 枯草芽孢杆菌整合载体的整合机理 | 第11页 | 1.4.2 枯草芽孢杆菌整合载体的整合方式 | 第11-12页 | 1.5 本课题的立题意义与研究内容 | 第12-14页 | 第二章 材料与方法 | 第14-25页 | 2.1 实验材料 | 第14-16页 | 2.1.1 供试菌株,质粒与引物 | 第14-15页 | 2.1.2 主要试剂 | 第15页 | 2.1.3 培养基与溶液 | 第15-16页 | 2.1.4 主要仪器 | 第16页 | 2.2 实验方法 | 第16-25页 | 2.2.1 枯草芽孢杆菌整合质粒的构建 | 第16-18页 | 2.2.2 枯草芽孢杆菌感受态的制备与转化 | 第18-19页 | 2.2.3 重组菌株的筛选与鉴定 | 第19-20页 | 2.2.4 重组菌株生长曲线和发酵曲线的测定 | 第20-21页 | 2.2.5 诱导型重组菌株的表达与诱导条件的优化 | 第21-22页 | 2.2.6 普鲁兰酶表达的SDS-PAGE分析 | 第22页 | 2.2.7 普鲁兰酶酶活的测定 | 第22-25页 | 第三章 结果与讨论 | 第25-38页 | 3.1 整合质粒pDL-P_(HpaⅡ-pul)和pDL-P_(sacB-pul)的构建 | 第25-27页 | 3.1.1 普鲁兰酶基因表达框的扩增 | 第25页 | 3.1.2 整合质粒pDL-P_(HpaⅡ-pul)的构建 | 第25-26页 | 3.1.3 整合质粒pDL-P_(sacB-pul)的构建 | 第26-27页 | 3.2 枯草芽孢杆菌整合菌株的筛选与鉴定 | 第27-29页 | 3.2.1 氯霉素筛选枯草芽孢杆菌转化菌株浓度的确定 | 第27-28页 | 3.2.2 枯草芽孢杆菌整合菌株基因组的鉴定 | 第28-29页 | 3.3 组成型重组菌株的表达与发酵优化 | 第29-33页 | 3.3.1 重组菌普鲁兰酶的表达分析 | 第29-30页 | 3.3.2 重组菌8H发酵条件的优化 | 第30-33页 | 3.3.3 最佳发酵条件下的发酵过程曲线 | 第33页 | 3.4 诱导型重组菌株的表达与诱导条件的优化 | 第33-38页 | 3.4.1 蔗糖诱导型重组菌株的表达 | 第33-34页 | 3.4.2 蔗糖诱导表达条件的优化 | 第34-37页 | 3.4.3 最佳诱导条件下的发酵过程曲线 | 第37-38页 | 主要结论与展望 | 第38-39页 | 致谢 | 第39-40页 | 参考文献 | 第40-44页 | 附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第44页 |
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