| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 目录 | 第9-16页 |
| 第一部分 第1章 绪论 | 第16-37页 |
| ·纳米材料概述 | 第16-18页 |
| ·纳米材料定义 | 第16页 |
| ·纳米材料的理化性质 | 第16页 |
| ·富勒烯纳米材料 | 第16-17页 |
| ·量子点纳米材料 | 第17-18页 |
| ·纳米材料在生物医药领域的应用 | 第18-22页 |
| ·概述 | 第18页 |
| ·纳米医药 | 第18-20页 |
| ·纳米材料在生物医学诊断中的应用 | 第20-21页 |
| ·纳米材料在组织工程中的应用 | 第21-22页 |
| ·纳米材料生物学效应 | 第22-30页 |
| ·概述 | 第22页 |
| ·纳米材料与自噬 | 第22-26页 |
| ·自噬的定义与发展 | 第22-23页 |
| ·自噬分类 | 第23-24页 |
| ·自噬的发生与检测 | 第24-25页 |
| ·纳米材料引发细胞自噬 | 第25-26页 |
| ·纳米材料与学习记忆 | 第26-29页 |
| ·学习记忆概述 | 第26-27页 |
| ·CaMKⅡ激酶 | 第27-28页 |
| ·学习记忆的行为学研究方法 | 第28-29页 |
| ·纳米材料对学习记忆的影响 | 第29页 |
| ·纳米材料其他生物学效应 | 第29-30页 |
| ·纳米材料与蛋白质相互作用 | 第30-35页 |
| ·概述 | 第30-31页 |
| ·纳米材料对相互作用蛋白质的影响 | 第31-34页 |
| ·蛋白质构象变化 | 第31-32页 |
| ·蛋白质活性变化 | 第32页 |
| ·蛋白质新抗原表位的产生 | 第32-33页 |
| ·蛋白质聚集 | 第33-34页 |
| ·纳米材料与蛋白质相似性比较 | 第34-35页 |
| ·纳米材料生物学效应发生机制 | 第35-37页 |
| 第二部分 第2章 富勒烯纳米晶体与CaMKⅡα特异性相互作用的发现与研究 | 第37-68页 |
| ·引言 | 第37页 |
| ·实验材料与设备 | 第37-40页 |
| ·试剂与质粒 | 第37-39页 |
| ·细胞与动物 | 第39页 |
| ·实验仪器与装置 | 第39-40页 |
| ·实验方法 | 第40-50页 |
| ·富勒烯纳米晶体溶液的制备 | 第40页 |
| ·富勒烯纳米晶体的浓度检测 | 第40-41页 |
| ·富勒烯纳米晶体理化性质鉴定方法 | 第41页 |
| ·质粒构建与准备 | 第41-45页 |
| ·质粒的构建 | 第41-44页 |
| ·质粒的转化与抽提 | 第44页 |
| ·CaMKⅡα定点突变真核表达质粒构建 | 第44-45页 |
| ·细胞培养 | 第45页 |
| ·细胞转染 | 第45页 |
| ·组织与细胞裂解液的制备 | 第45-46页 |
| ·大脑组织CaMKⅡ蛋白纯化 | 第46页 |
| ·原核CaMKⅡ诱导表达与纯化 | 第46-47页 |
| ·富勒烯纳米晶体与蛋白质结合实验 | 第47-48页 |
| ·富勒烯纳米晶体结合的蛋白质筛选 | 第48页 |
| ·多种纳米材料与CaMKⅡα及其突变体的结合能力检测 | 第48页 |
| ·富勒烯纳米晶体与CaMKⅡα结合的剂量效应检测 | 第48-49页 |
| ·富勒烯纳米晶体悬浮能力、粒径与表面电势检测 | 第49页 |
| ·TEM观察CaMKⅡα纯化蛋白与富勒烯纳米晶体的相互作用 | 第49页 |
| ·光照对富勒烯纳米晶体和CaMKⅡα相互作用的影响检测 | 第49页 |
| ·其他蛋白质与CaMKⅡα竞争结合富勒烯纳米晶体实验 | 第49页 |
| ·CaMKⅡα解离实验 | 第49-50页 |
| ·Western Blot实验 | 第50页 |
| ·数据分析 | 第50页 |
| ·实验结果与讨论 | 第50-66页 |
| ·水溶性富勒烯纳米晶体的合成与鉴定 | 第50-51页 |
| ·富勒烯纳米晶体与大脑CaMKⅡ蛋白特异相互作用的初步发现 | 第51-54页 |
| ·富勒烯纳米晶体与CaMKⅡα蛋白特异相互作用 | 第54-55页 |
| ·富勒烯纳米晶体特异性结合CaMKⅡα的催化区域 | 第55-57页 |
| ·CaMKⅡα与CaMKⅡβ催化区域氨基酸序列比对与分析 | 第57页 |
| ·CaMKⅡ与富勒烯纳米晶体可能结合氨基酸位点预测 | 第57-58页 |
| ·富勒烯纳米晶体与CaMKⅡα结合氨基酸位点的发现 | 第58-59页 |
| ·富勒烯纳米晶体与CaMKⅡα的结合具有材料特异性 | 第59-60页 |
| ·富勒烯纳米晶体与CaMKⅡα结合的时间效应 | 第60-61页 |
| ·富勒烯纳米晶体与CaMKⅡα结合的剂量效应 | 第61-62页 |
| ·结合在富勒烯纳米晶体表面的蛋白质分子数的确定 | 第62-63页 |
| ·结合CaMKⅡα的富勒烯纳米晶体悬浮能力增加 | 第63页 |
| ·结合CaMKⅡα的富勒烯纳米晶体粒径与zeta电势分析 | 第63-64页 |
| ·光照不影响富勒烯纳米晶体与CaMKⅡα的结合 | 第64-65页 |
| ·BSA竞争结合实验证明富勒烯与CaMKⅡα的特异性结合 | 第65页 |
| ·不同构象状态CaMKⅡα与富勒烯纳米晶体的相互作用 | 第65-66页 |
| ·CaMKⅡα解离实验证明富勒烯与CaMKⅡα结合的稳定性 | 第66页 |
| ·本章小结 | 第66-68页 |
| 第二部分 第3章 富勒烯纳米晶体通过特异性相互作用将CaMKⅡα锁定在活性状态 | 第68-92页 |
| ·引言 | 第68页 |
| ·实验材料与设备 | 第68-69页 |
| ·试剂与质粒 | 第68-69页 |
| ·细胞与动物 | 第69页 |
| ·仪器 | 第69页 |
| ·实验方法 | 第69-76页 |
| ·富勒烯纳米晶体的光谱分析 | 第69-70页 |
| ·细胞培养 | 第70页 |
| ·细胞转染 | 第70页 |
| ·富勒烯纳米晶体的进细胞激光共聚焦观察 | 第70-71页 |
| ·富勒烯纳米晶体的进细胞透射电子显微镜观察 | 第71页 |
| ·组织与细胞裂解液的制备 | 第71-72页 |
| ·质粒的构建与准备 | 第72页 |
| ·大脑CaMKⅡ蛋白纯化 | 第72页 |
| ·CaMKⅡ酶活检测方法 | 第72-73页 |
| ·CaMKⅡ自我磷酸化实验方法 | 第73-74页 |
| ·Western Blot实验 | 第74页 |
| ·免疫荧光实验 | 第74页 |
| ·CaMKⅡα构象变化体外FRET方法检测 | 第74-75页 |
| ·激光共聚焦观察细胞内FRET变化 | 第75-76页 |
| ·FRET效率的检测 | 第76页 |
| ·数据分析 | 第76页 |
| ·实验结果与讨论 | 第76-90页 |
| ·富勒烯纳米晶体光谱分析 | 第76-77页 |
| ·富勒烯纳米晶体具有进入原代神经细胞的能力 | 第77-78页 |
| ·体外实验证明富勒烯纳米晶体引起CaMKⅡ产生自主活性 | 第78-80页 |
| ·底物磷酸化实验 | 第78-79页 |
| ·CaMKⅡ自我磷酸化实验 | 第79-80页 |
| ·富勒烯纳米晶体引起海马组织内CaMKⅡ产生自主活性 | 第80-82页 |
| ·底物磷酸化实验 | 第80页 |
| ·CaMKⅡ自我磷酸化实验 | 第80-82页 |
| ·CaMKⅡα自主活性的产生依赖于特异性相互作用 | 第82-84页 |
| ·底物磷酸化实验 | 第82-83页 |
| ·CaMKⅡ自我磷酸化实验 | 第83-84页 |
| ·富勒烯纳米晶体引发CaMKⅡα自主活性具有材料特异性 | 第84-85页 |
| ·结合在富勒烯纳米晶体表面的CaMKⅡα构象变化过程 | 第85-86页 |
| ·富勒烯纳米晶体引起基础状态CaMKⅡα构象变化 | 第86-87页 |
| ·富勒烯纳米晶体引起激活状态的CaMKⅡα构象变化 | 第87页 |
| ·细胞内FRET效率检测 | 第87-88页 |
| ·富勒烯纳米晶体通过相互作用引起神经细胞内CaMKⅡα构象变化 | 第88-90页 |
| ·本章小结 | 第90-92页 |
| 第二部分 第4章 富勒烯纳米晶体通过与CaMKⅡα相互作用增强学习与记忆 | 第92-107页 |
| ·引言 | 第92页 |
| ·实验材料与设备 | 第92页 |
| ·实验方法 | 第92-96页 |
| ·质粒构建与准备 | 第92-93页 |
| ·细胞培养与转染 | 第93页 |
| ·CaM亲和力实验 | 第93页 |
| ·CaMKⅡα突触后膜转移激光共聚焦观察 | 第93-94页 |
| ·富勒烯纳米晶体海马在位注射与腹腔注射方法 | 第94页 |
| ·电刺激与记录 | 第94-95页 |
| ·水迷宫实验方法 | 第95-96页 |
| ·α1与大脑组织蛋白竞争结合富勒烯纳米晶体实验 | 第96页 |
| ·Western Blot实验 | 第96页 |
| ·数据分析 | 第96页 |
| ·实验结果与讨论 | 第96-106页 |
| ·富勒烯纳米晶体极大提高CaMKⅡα对CaM的亲和力 | 第96-98页 |
| ·富勒烯纳米晶体引起CaMKⅡα突触后膜转移 | 第98-99页 |
| ·动物实验示意图与电极定位示意图 | 第99-100页 |
| ·腹腔注射富勒烯纳米晶体增加长时程增强 | 第100-102页 |
| ·在位注射C60纳米晶体促进长时程增强且依赖于相互作用 | 第102-105页 |
| ·富勒烯纳米晶体提高大鼠空间记忆能力 | 第105-106页 |
| ·本章小结 | 第106-107页 |
| 第二部分 第5章 总结与讨论 | 第107-109页 |
| ·富勒烯纳米晶体促学习记忆机制总结 | 第107-108页 |
| ·C60纳米晶体应用展望 | 第108-109页 |
| 第三部分 第6章 富勒烯纳米晶体通过氧化甲硫氨酸位点激活大脑CaMKⅡ | 第109-125页 |
| ·引言 | 第109页 |
| ·实验材料与设备 | 第109-110页 |
| ·实验方法 | 第110-112页 |
| ·富勒烯纳米晶体产生氧自由基能力检测 | 第110页 |
| ·大脑CaMKⅡ蛋白纯化 | 第110页 |
| ·CaMKⅡ突变体构建(M-V) | 第110页 |
| ·细胞培养与转染 | 第110页 |
| ·富勒烯纳米晶体氧化CaMKⅡ实验 | 第110-111页 |
| ·Western Blot实验 | 第111页 |
| ·海马组织免疫荧光实验 | 第111页 |
| ·线性离子阱质谱实验 | 第111页 |
| ·LC-MS-MS实验 | 第111-112页 |
| ·CaMKⅡ酶活实验 | 第112页 |
| ·CaMKⅡ自我磷酸化实验 | 第112页 |
| ·数据分析 | 第112页 |
| ·实验结果与讨论 | 第112-123页 |
| ·富勒烯纳米晶体具有产生氧自由基的能力 | 第112-113页 |
| ·富勒烯纳米晶体引起体外CaMKⅡ发生氧化 | 第113-115页 |
| ·富勒烯纳米晶体氧化CaMKⅡ剂量效应分析 | 第115页 |
| ·富勒烯纳米晶体引起海马组织内CaMKⅡ发生氧化 | 第115-117页 |
| ·CaMKⅡ氧化氨基酸位点分析 | 第117-120页 |
| ·富勒烯纳米晶体通过氧化CaMKⅡβ将其锁定在活化状态 | 第120-123页 |
| ·本章小结 | 第123-125页 |
| 第四部分 第7章 自噬参与量子点损伤突触传递与突触可塑性过程 | 第125-139页 |
| ·引言 | 第125页 |
| ·实验用物品 | 第125-126页 |
| ·材料与抗体 | 第125-126页 |
| ·实验细胞与动物 | 第126页 |
| ·实验方法 | 第126-129页 |
| ·量子点性质分析 | 第126页 |
| ·细胞培养 | 第126页 |
| ·稳定转染GFP-LC3的HeLa细胞系建立 | 第126-127页 |
| ·GFP-LC3点状聚集荧光显微镜观察与统计 | 第127页 |
| ·细胞自噬TEM观察 | 第127页 |
| ·原代神经细胞内源性LC3免疫荧光检测方法 | 第127页 |
| ·Western Blot实验 | 第127-128页 |
| ·海马CA1区在位注射方法 | 第128页 |
| ·电刺激与记录 | 第128-129页 |
| ·数据分析 | 第129页 |
| ·实验结果与讨论 | 第129-137页 |
| ·量子点粒径与荧光光谱分析 | 第129-130页 |
| ·量子点诱导神经细胞发生自噬 | 第130-133页 |
| ·自噬参与量子点引发的突触传递与突触可塑性的损伤过程 | 第133-135页 |
| ·自噬参与量子点降低突触前蛋白synapsin-Ⅰ水平过程 | 第135-136页 |
| ·自噬参与量子点损伤突触形成过程 | 第136-137页 |
| ·本章总结与讨论 | 第137-139页 |
| 参考文献 | 第139-153页 |
| 致谢 | 第153-155页 |
| 缩略语 | 第155-157页 |
| 附录 | 第157-158页 |
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