| 中文摘要 | 第10-18页 |
| 英文摘要 | 第18-26页 |
| 前言 | 第27-29页 |
| 第一部分 HO-1 和CORM-2 对LPS导致的Caco-2 细胞损伤的修复作用 | 第29-56页 |
| 引言 | 第29-30页 |
| 材料和方法 | 第30-42页 |
| 1. 材料 | 第30-33页 |
| 1.1 主要药品与试剂 | 第30-31页 |
| 1.2 试剂配制 | 第31-33页 |
| 2. 方法 | 第33-42页 |
| 2.1 Caco-2 细胞的复苏 | 第33页 |
| 2.2 Caco-2 细胞培养及传代 | 第33-34页 |
| 2.3 Caco-2 细胞冻存 | 第34页 |
| 2.4 Caco-2 细胞单层模型的建立及其评估 | 第34-35页 |
| 2.5 CCK8 检测不同浓度的LPS、CoPP及CORM-2 对肠上皮细胞Caco-2 生长的影响，评价LPS、Co PP及CORM-2 的细胞毒性 | 第35页 |
| 2.6 细胞不同分组 | 第35-36页 |
| 2.7 Trizol法提取细胞中总RNA | 第36页 |
| 2.8 实时定量RT-PCR | 第36-38页 |
| 2.9 Caco-2 细胞中目的蛋白的检测 | 第38-40页 |
| 2.10 流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第40-41页 |
| 2.11 酶联免疫吸附实验检测Caco-2细胞上清液中TNF-α和白介素6（interleukin 6,IL-6）的水平。 | 第41-42页 |
| 3. 统计学处理 | 第42页 |
| 结果 | 第42-50页 |
| 1. Caco-2 细胞单层模型的建立及其评估 | 第42页 |
| 2. LPS对Caco-2单层细胞TEER及紧密连接蛋白的影响 | 第42-43页 |
| 3. 不同浓度CoPP及CORM-2对Caco-2 细胞生长的影响 | 第43-44页 |
| 4. CoPP上调HO-1及对occludin mRNA表达的影响 | 第44-45页 |
| 5. CoPP和CORM-2 缓解LPS刺激导致Caco-2 细胞单层肠屏障的损伤 | 第45-46页 |
| 6 CoPP通过上调HO-1表达及外源性补充CO缓解LPS刺激导致的肠紧密连接蛋白ZO-1及occludin蛋白的破坏 | 第46-47页 |
| 7 CoPP内源性增加HO-1及外源性补充CORM-2对细胞凋亡的影响 | 第47-49页 |
| 8. CoPP和CORM-2 对炎症因子的影响 | 第49-50页 |
| 讨论 | 第50-53页 |
| 小结 | 第53页 |
| 参考文献 | 第53-56页 |
| 第二部分 调控HO-1 基因表达对肠上皮细胞的影响及机制研究 | 第56-83页 |
| 引言 | 第56-57页 |
| 材料与方法 | 第57-65页 |
| 1. 材料 | 第57-58页 |
| 2. 方法 | 第58-65页 |
| 2.1 HO-1 过表达Caco-2细胞株的构建 | 第58-62页 |
| 2.2 HO-1敲低Caco-2细胞株的构建 | 第62-64页 |
| 2.3 HO-1 表达的RT-qPCR检测 | 第64-65页 |
| 2.4 免疫荧光染色 | 第65页 |
| 2.5 Western blot检测HO-1 及相关蛋白的表达 | 第65页 |
| 2.6 统计学处理 | 第65页 |
| 结果 | 第65-76页 |
| 1. 转染HO-1 基因的Caco-2 细胞株中HO-1 的表达水平 | 第65-66页 |
| 2. HO-1表达与Caco-2细胞紧密连接蛋白的分布 | 第66-68页 |
| 3. Western blot检测HO-1 过表达组紧密连接蛋白的表达 | 第68页 |
| 4. HO-1 敲低细胞株中HO-1 及肠紧密连接蛋白的表达 | 第68-69页 |
| 5. HO-1敲低细胞株中紧密连接蛋白ZO-1的分布 | 第69-70页 |
| 6. 上调HO-1可抑制NF-κB p65的表达 | 第70-71页 |
| 7 外源性补充促一氧化碳释放分子-2（CO-releasing molecule-2，CORM-2）及内源性CoPP激活HO-1可以减弱LPS刺激导致的TLR4/NF-κBp65表达 | 第71-72页 |
| 8. HO-1高表达减少LPS引起的Caco-2细胞凋亡 | 第72-74页 |
| 9. HO-1 抑制LPS引起的NF-κB活化 | 第74页 |
| 10. JSH-23 对肠粘膜紧密连接蛋白occludin及NF-κB p65的影响 | 第74-75页 |
| 11. HO-1 高表达抑制磷酸化NF-κB p65的表达 | 第75-76页 |
| 讨论 | 第76-79页 |
| 小结 | 第79页 |
| 参考文献 | 第79-83页 |
| 第三部分 HO-1 和CORM-2 对胆汁淤积肝损伤大鼠肠屏障的保护作用 | 第83-107页 |
| 引言 | 第83-84页 |
| 材料和方法 | 第84-92页 |
| 1. 材料 | 第84-85页 |
| 2. 方法 | 第85-91页 |
| 2.1 实验动物 | 第85页 |
| 2.2 模型制备及给药 | 第85-86页 |
| 2.3 标本采集 | 第86页 |
| 2.4 组织形态学检测 | 第86-87页 |
| 2.5 血液生化检测 | 第87-89页 |
| 2.6 ELISA方法检测不同组别大鼠血清内毒素、D-乳酸及DAO水平 | 第89-90页 |
| 2.7 透射电镜观察肠上皮紧密连接超微结构 | 第90页 |
| 2.8 大鼠肠组织中TNF-α和IL-6 检测 | 第90页 |
| 2.9 Western blot检测肠组织中ZO-1 和occludin蛋白表达 | 第90-91页 |
| 2.10 免疫组织化学染色 | 第91页 |
| 3. 统计学处理 | 第91-92页 |
| 结果 | 第92-100页 |
| 1. 血清生化学指标测定 | 第92页 |
| 2. 肝脏HE染色及结果评定 | 第92-93页 |
| 3. 小肠病理改变 | 第93-95页 |
| 4. 大鼠血清内毒素、D-乳酸及DAO含量 | 第95-96页 |
| 5. 肠上皮紧密连接蛋白表达 | 第96-98页 |
| 6. 肠上皮组织中caspase 3、PCNA、TLR4及NF-κB p65的表达 | 第98-100页 |
| 7 ELISA 方法检测大鼠肠组织中 TNF-α 和 IL-6 的表达 | 第100页 |
| 讨论 | 第100-103页 |
| 小结 | 第103页 |
| 参考文献 | 第103-107页 |
| 结论 | 第107-108页 |
| 综述 | 第108-126页 |
| 参考文献 | 第115-126页 |
| 附件7：攻读学位期间发表论文情况 | 第126-127页 |
| 致谢 | 第127-128页 |
广告服务 
