摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6页 |
第一章 绪论 | 第10-31页 |
1.1 半滑舌鳎 | 第10页 |
1.2 中性粒细胞 | 第10-11页 |
1.3 中性粒细胞胞外陷阱(NETs) | 第11-27页 |
1.3.1 NETs的发现和其形态结构 | 第11-13页 |
1.3.2 诱导NETs形成的刺激物 | 第13-16页 |
1.3.3 NETs形成的分子基础 | 第16-18页 |
1.3.4 NETosis-新的细胞死亡程序 | 第18-20页 |
1.3.5 NETs的抗菌功能 | 第20-25页 |
1.3.6 微生物逃避NETs捕获的机制 | 第25-27页 |
1.4 NETs与自身免疫 | 第27-28页 |
1.5 鱼类中NETs的研究现状 | 第28-29页 |
1.6 本研究的目的以及意义 | 第29-31页 |
第二章 实验材料 | 第31-35页 |
2.1 实验动物与菌株 | 第31页 |
2.1.1 实验动物半滑舌鳎 | 第31页 |
2.1.2 实验菌株 | 第31页 |
2.2 实验试剂 | 第31-32页 |
2.3 实验仪器和设备 | 第32-33页 |
2.4 常用溶液配置方法 | 第33-34页 |
2.5 分析软件 | 第34-35页 |
第三章 实验方法 | 第35-43页 |
3.1 半滑舌鳎头肾中性粒细胞的分离与纯化 | 第35-36页 |
3.2 碘化钾-吡啰红G(KI-PyG)法染色中性粒细胞 | 第36-37页 |
3.3 NETs的DAPI染色观察不同刺激物刺激下中性粒细胞产生NETs的情况 | 第37页 |
3.4 NETs的DPAI/Sytox Green复染证明NETs由活的中性粒细胞产生 | 第37-38页 |
3.5 DNase消化NETs实验证明DNA是NETs的主要组成结构 | 第38页 |
3.6 电镜下观察NETs的产生及捕获细菌实验 | 第38-39页 |
3.7 体外抑菌试验检测NETs对不同细菌的作用 | 第39页 |
3.8 检测NETs产生量 | 第39-40页 |
3.8.1 不同刺激物刺激后NETs产生量随时间变化情况 | 第39-40页 |
3.8.2 不同抑制剂对NETs产生的抑制作用 | 第40页 |
3.9 影响NETs产生的相关因子的检测:ROS、NO、MPO | 第40-43页 |
3.9.1 ROS检测 | 第40-41页 |
3.9.2 NO检测 | 第41-42页 |
3.9.3 MPO检测 | 第42-43页 |
第四章 实验结果与讨论 | 第43-57页 |
4.1 中性粒细胞的KI-PyG染色 | 第43-44页 |
4.2 荧光显微镜观察 | 第44-46页 |
4.2.1 不同刺激物刺激中性粒细胞产生NETs的DAPI染色 | 第44-45页 |
4.2.2 Sytox Green染色NETs证明NETs由活的中性粒细胞产生 | 第45页 |
4.2.3 DNase I消化NETs实验证明DNA是NETs的主要组成结构 | 第45-46页 |
4.3 电子显微镜观察 | 第46-48页 |
4.3.1 电子显微镜下观察NETs的显微结构 | 第46-47页 |
4.3.2 NETs捕获细菌 | 第47-48页 |
4.4 不同刺激物刺激后NETs产生量随时间变化过程 | 第48-49页 |
4.5 体外实验检测NETs的抑菌作用 | 第49-51页 |
4.6 NETs产生相关因子的检测 | 第51-52页 |
4.7 不同抑制剂对NETs产生的抑制作用 | 第52-54页 |
4.8 讨论 | 第54-57页 |
结论和展望 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-66页 |
致谢 | 第66-67页 |
作者简历及攻读学位期间发表的学术论文与研究成果 | 第67页 |