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灰葡萄孢蛋白激发子BcSpl1诱导番茄抗病机制研究
 
     论文目录
 
摘要第6-7页
Abstract第7-8页
第一章 引言第13-22页
    1.1 植物诱导抗病性第13-17页
        1.1.1 植物诱导抗病性的概念第13-14页
        1.1.2 植物诱导抗病性的特点第14-15页
        1.1.3 植物诱导抗病性的应用第15页
        1.1.4 诱导植物抗病性的作用机制第15-17页
    1.2 磷酸化蛋白修饰在植物免疫调控机制中的作用第17-19页
        1.2.1 磷酸化蛋白质组学概述第17页
        1.2.2 磷酸化肽段的富集方法第17-18页
        1.2.3 蛋白质组学的分析方法第18-19页
    1.3 蛋白激发子的研究现状第19页
    1.4 CP家族蛋白第19-21页
        1.4.1 CPPs的概述第19-20页
        1.4.2 CPPs在真菌与植物互作时所表现的生物学功能第20页
        1.4.3 BcSpl1的研究背景第20-21页
    1.5 本研究目的和意义第21页
    1.6 研究技术路线第21-22页
第二章 BcSpl1的真核表达与原核表达纯化第22-38页
    2.1 试验材料第22-24页
        2.1.1 菌株与质粒第22页
        2.1.2 试剂与仪器第22-23页
        2.1.3 培养基与试剂配方第23-24页
    2.2 试验方法第24-32页
        2.2.1 BcSpl1蛋白序列的分析第24页
        2.2.2 灰霉菌总RNA提取第24-25页
        2.2.3 第一链cDNA的合成第25页
        2.2.4 特异引物设计第25页
        2.2.5 目的基因的扩增第25-26页
        2.2.6 PCR产物与pMD18-T的连接、转化及验证第26-27页
        2.2.7 BcSpl1真核表达载体的构建与表达第27-29页
        2.2.8 BcSpl1真核表达产物的纯化与检测第29页
        2.2.9 BcSpl1原核表达载体的构建与蛋白表达第29-31页
        2.2.10 BcSpl1原核表达产物的纯化第31-32页
        2.2.11真核表达与原核表达重组蛋白的质谱鉴定第32页
    2.3 结果与分析第32-37页
        2.3.1 毕赤酵母重组表达载体pPIC9K-bcspl1的构建与鉴定第32-33页
        2.3.2 重组蛋白的表达与纯化第33-34页
        2.3.3 大肠杆菌重组表达载体pET-30His-bcspl1的构建与鉴定第34-35页
        2.3.4 重组蛋白的表达与纯化第35页
        2.3.5 重组蛋白的质谱鉴定第35-37页
    2.4 小结与讨论第37-38页
第三章 BcSpl1诱导植物抗病性的功能鉴定第38-42页
    3.1 实验材料第38页
        3.1.1 供试植物第38页
        3.1.2 试剂与仪器第38页
        3.1.3 数据采集和数据统计方法第38页
    3.2 实验方法第38-39页
        3.2.1 蛋白浓度的测定第38-39页
        3.2.2 表达蛋白的生物活性检测第39页
        3.2.3 重组蛋白诱导番茄抗病性第39页
    3.3 结果与分析第39-41页
        3.3.1 真核表达的重组蛋白的生物活性检测第39-40页
        3.3.2 真核表达的重组蛋白诱导番茄的抗病性第40页
        3.3.3 原核表达的重组蛋白的生物活性检测第40页
        3.3.4 原核表达的重组蛋白诱导番茄的抗病性第40-41页
    3.4 小结与讨论第41-42页
第四章 BcSpl1诱导番茄抗性相关基因的转录表达第42-48页
    4.1 实验材料第42页
        4.1.1 供试植物第42页
        4.1.2 试剂和仪器第42页
        4.1.3 分析软件第42页
    4.2 实验方法第42-44页
        4.2.1 BcSpl1处理番茄叶片第42-43页
        4.2.2 番茄样品总RNA的提取第43页
        4.2.3 cDNA第一链的合成第43页
        4.2.4 特异引物的设计第43-44页
        4.2.5 qPCR目的基因的扩增第44页
        4.2.6 荧光定量PCR的数据分析第44页
    4.3 结果与分析第44-47页
        4.3.1 PR-1a的转录水平变化第44-45页
        4.3.2 Prosystemin的转录水平变化第45页
        4.3.3 PI I和PI II的转录水平变化第45-46页
        4.3.4 蛋白激酶基因SIPK与WIPK的转录水平变化第46页
        4.3.5 蛋白激酶基因TPK1b的转录水平变化第46-47页
    4.4 小结与讨论第47-48页
第五章 BcSpl1处理番茄叶片的磷酸化蛋白组学分析第48-60页
    5.1 试验材料第48-49页
        5.1.1 植物材料第48页
        5.1.2 试剂与仪器第48页
        5.1.3 分析工具与数据库第48-49页
    5.2 实验方法第49-50页
        5.2.1 实验流程图第49页
        5.2.2 粗蛋白的提取第49页
        5.2.3 胰蛋白酶消化第49-50页
        5.2.4 TMT标记第50页
        5.2.5 磷酸化肽段的富集第50页
        5.2.6 LC-MS/MS分析第50页
        5.2.7 数据搜索第50页
    5.3 结果与分析第50-57页
        5.3.1 MS的数据质量分析第50-51页
        5.3.2 磷酸化肽段的综合分析第51页
        5.3.3 磷酸化位点motifs分析第51-52页
        5.3.4 motifs与功能的关系第52-53页
        5.3.5 锌指结构蛋白第53-54页
        5.3.6 蛋白激酶第54-55页
        5.3.7 磷酸化蛋白的GO功能分析第55-56页
        5.3.8 磷酸化蛋白的功能富集分析第56-57页
    5.4 小结与讨论第57-60页
第六章 全文结论第60-61页
参考文献第61-69页
致谢第69-70页
作者简历第70页

 
 
论文编号BS2786138,这篇论文共70
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