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突变的组蛋白去乙酰化酶4抑制软骨细胞肥大促进软骨细胞增殖的作用及机制研究
 
     论文目录
 
中文摘要第7-11页
英文摘要第11-16页
常用缩写词中英文对照表第16-17页
前言第17-18页
第一部分 突变HDAC4Caspase-3降解位点及14-3-3结合位点可有效增加软骨细胞核内HDAC4含量第18-31页
    1 材料与方法第20-27页
        1.1 主要实验仪器设备第20页
        1.2 实验试剂第20-21页
        1.3 主要实验操作流程第21-27页
    2 结果第27-31页
        2.1 软骨细胞表型鉴定结果显示:离体培养的软骨细胞状态良好,未发生失分化现象第27页
        2.2 腺病毒转染离体培养的人软骨细胞所需浓度选择及转染效率检测第27-28页
        2.3 突变Caspase-3降解位点可有效减少HDAC4降解第28-29页
        2.4 突变14-3-3结合位点可有效减少HDAC4与14-3-3蛋白之间的结合第29-30页
        2.5 与野生型HDAC4组(WT-HDAC4)相比,突变组(M-HDAC4)细胞核内HDAC4含量显著增高第30-31页
第二部分 突变的HDAC4可有效抑制软骨细胞肥大促进软骨细胞增殖第31-41页
    1 材料与方法第32-37页
        1.1 主要实验仪器设备第32页
        1.2 实验试剂第32-33页
        1.3 主要实验操作流程第33-37页
    2 结果第37-41页
        2.1 Real time-PCR结果显示:与WT-HDAC4组相比,M-HDAC4组软骨细胞肥大指标Runx-2,Type-Ⅹcollagen及MMP-13表达量均显著降低第37页
        2.2 Western blot结果显示:与WT-HDAC4组相比,M-HDAC4组软骨细胞肥大指标Runx-2,TypeⅩcollagen及MMP-13蛋白水平显著降低第37-38页
        2.3 Real time-PCR结果显示:与WT-HDAC4组相比,M-HDAC4组软骨细胞增殖指标TypeⅡ collagen,Aggrecan及 Sox-9 表达量均显著增高第38页
        2.4 Western blot结果显示:与WT-HDAC4组相比,M-HDAC4组软骨细胞增殖指标TypeⅡ collagen,Aggrecan及 Sox-9 蛋白水平显著增高第38-39页
        2.5 CCK-8 细胞增殖检测结果显示:与WT-HDAC4组相比,M-HDAC4组软骨细胞增殖能力显著增高第39-40页
        2.6 与Control组比,WT-HDAC4及M-HDAC4组软骨细胞中PCNA蛋白含量均显著增高,且M-HDAC4组PCNA含量增高更为明显高第40-41页
第三部分 HDAC4可能通过与增殖细胞核抗原(PCNA)结合促进软骨细胞增殖第41-50页
    1 材料与方法第41-44页
        1.1 主要实验仪器设备第41-42页
        1.2 实验试剂第42页
        1.3 主要实验操作流程第42-44页
    2 结果第44-46页
        2.1 HDAC4可与PCNA直接结合,且M-HDAC4结合能力较WT-HDAC4更强第44页
        2.2 HDAC4与PCNA结合位点检测第44-46页
    3 讨论第46-49页
        3.1 HDAC4进入细胞核是其对靶蛋白发挥去乙酰化作用的必要前提第46-47页
        3.2 HDAC4在软骨细胞肥大及软骨细胞增殖中的作用第47-48页
        3.3 HDAC4促进软骨细胞增殖的机制研究第48-49页
    4 结论第49-50页
        4.1 突变HDAC4Caspase-3裂解位点289及14-3-3蛋白结合位点246/467/632,不仅可抑制HDAC4降解,而且可减少HDAC4与14-3-3蛋白在胞浆中的结合,促进HDAC4向软骨细胞核内穿梭,增加细胞核内HDAC4含量第49页
        4.2 与未突变的HDAC4相比,突变的HDAC4抑制软骨细胞肥大促进软骨细胞增殖的能力更强,达到优化软骨组织工程种子细胞(软骨细胞)的作用第49页
        4.3 HDAC4的促增殖作用可能与HDAC4与PCNA的结合有关,且HDAC4与PCNA的结合位点可能在326-669之间第49-50页
参考文献第50-52页
综述第52-69页
    References第62-69页
致谢第69-70页
个人简介第70-72页

 
 
论文编号BS4585288,这篇论文共72
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