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当前位置:教育论文中心首页--硕士论文--猪细小病毒荧光定量PCR检测方法的建立及其感染PK-15细胞后的蛋白质组学研究
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猪细小病毒荧光定量PCR检测方法的建立及其感染PK-15细胞后的蛋白质组学研究
 
     论文目录
 
致谢第5-10页
摘要第10-12页
文献综述第12-21页
    1 猪细小病毒(porcine parvovirus)概述第12-17页
        1.1 病原第12-13页
        1.2 猪细小病毒的分型第13页
        1.3 猪细小病毒基因组第13-14页
        1.4 猪细小病毒编码的病毒蛋白第14-15页
        1.5 猪细小病毒流行特点和现状第15-16页
        1.6 猪细小病毒检测方法第16页
        1.7 猪细小病毒感染机制第16-17页
    2 猪细小病毒参与的细胞过程第17-18页
        2.1 细胞凋亡第17-18页
            2.1.1 外源性细胞凋亡第17页
            2.1.2 内源性细胞凋亡第17-18页
            2.1.3 猪细小病毒和非结构蛋白NS1引起的细胞凋亡第18页
        2.2 猪细小病毒诱导的免疫应答第18页
    3 蛋白组学概述第18-21页
        3.1 TMT概述第19页
        3.2 蛋白组学在研究病毒感染中的应用第19-21页
引言第21-22页
试验一 PPV荧光定量方法的建立及应用第22-28页
    1 材料与方法第22-25页
        1.1 材料第22-23页
            1.1.1 病毒及临床样品第22页
            1.1.2 主要仪器第22页
            1.1.3 主要试剂第22页
            1.1.4 主要试剂的配制第22-23页
        1.2 方法第23-25页
            1.2.1 PPV荧光定量检测引物的设计与合成第23页
            1.2.2 病料的研磨与基因组DNA的提取第23页
            1.2.3 目的基因的PCR扩增第23页
            1.2.4 纯化回收PCR产物第23页
            1.2.5 目的片段与T载体的连接第23-24页
            1.2.6 连接产物的转化第24页
            1.2.7 重组质粒的鉴定第24页
            1.2.8 质粒提取与浓度测定第24页
            1.2.9 PPV荧光定量检测标准曲线的建立第24-25页
            1.2.10 PPV荧光定量重复性检测第25页
            1.2.11 PPV荧光定量特异性和敏感性检测第25页
            1.2.12 临床样品PPV的检测第25页
    2 结果与分析第25-27页
        2.1 目的基因的PCR扩增结果第25-26页
        2.2 PPV荧光定量检测方法标准曲线的建立和重复性检测结果第26页
        2.3 PPV荧光定量检测方法特异性和敏感性检测结果第26-27页
        2.4 临床样品PPV的检测第27页
    3 结论与讨论第27-28页
试验二 基于TMT技术分析PPV感染PK-15细胞蛋白组学变化第28-39页
    1 材料与方法第28-32页
        1.1 材料第28-29页
            1.1.1 细胞与病毒第28页
            1.1.2 主要试验试剂第28页
            1.1.3 主要试验仪器第28页
            1.1.4 主要试剂的配制第28-29页
            1.1.5 分析软件第29页
        1.2 试验方法第29-32页
            1.2.1 PK-15细胞的培养第29页
            1.2.2 细胞计数第29页
            1.2.3 病毒的增殖第29页
            1.2.4 病毒滴度测定第29页
            1.2.5 PPV感染PK-15细胞生长曲线的测定第29-30页
            1.2.6 病毒感染细胞的准备第30页
            1.2.7 病毒感染细胞蛋白样本的制备第30页
            1.2.8 SDS-PAGE电泳第30页
            1.2.9 酶解和肽段定量第30-31页
            1.2.10 SCX分级第31页
            1.2.11 毛细管高效液相色谱第31页
            1.2.12 质谱鉴定第31-32页
        1.3 数据分析第32页
            1.3.1 原始质谱数据第32页
            1.3.2 数据库第32页
            1.3.3 数据库检索第32页
            1.3.4 生物信息学分析第32页
    2 结果与分析第32-37页
        2.1 PPV感染PK-15细胞生长曲线的测定第32-33页
        2.2 PPV感染PK-15细胞第33-34页
        2.3 PPV感染PK-15细胞蛋白组学结果第34页
        2.4 肽段长度分布第34-35页
        2.5 肽段覆盖度分布第35页
        2.6 蛋白质分子量分布第35-36页
        2.7 鉴定蛋白火山图分布第36-37页
    3 结论与讨论第37-39页
试验三 PPV感染PK-15细胞差异蛋白生物信息学分析第39-47页
    1 材料第39页
        1.1 分析软件第39页
        1.2 分析网站第39页
        1.3 数据库第39页
    2 结果与分析第39-45页
        2.1 差异表达蛋白质聚类分析第39-41页
        2.2 GO功能富集分析第41-44页
        2.3 KEGG分析第44-45页
    3 结论与讨论第45-47页
试验四 PPV感染PK-15细胞不同时间蛋白组学分析第47-52页
    1 材料第47页
    2 结果与分析第47-50页
        2.1 鉴定蛋白火山图分布第47页
        2.2 差异表达蛋白质聚类分析第47-48页
        2.3 GO功能富集分析第48-49页
        2.4 KEGG分析第49-50页
    3 结论与讨论第50-52页
全文总结第52-53页
参考文献第53-61页
ABSTRACT第61-63页

 
 
论文编号BS4734438,这篇论文共63
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