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马铃薯晚疫病水平抗性相关的小G蛋白基因克隆与功能分析
 
     论文目录
 
目录第1-7页
摘要第7-9页
ABSTRACT第9-11页
缩略词表第11-12页
第1章 文献综述第12-31页
   ·马铃薯及晚疫病抗性概述第12-14页
   ·抗病信息传递第14-17页
   ·GTP结合蛋白第17页
   ·小G蛋白第17-18页
   ·Rab蛋白家族第18-29页
     ·Rab蛋白结构第18-22页
     ·Rab蛋白调节机制第22-23页
     ·Rab蛋白功能第23-29页
   ·本研究的内容、目的及意义第29-31页
第2章 马铃薯小G蛋白StRab基因克隆及其序列分析第31-49页
   ·前言第31-32页
   ·材料与方法第32-40页
     ·试验材料第32页
     ·病原菌扩繁与活化第32-34页
     ·离体叶片接种方法第34页
     ·RNA抽提第34-35页
     ·总RNA处理及cDNA第一链合成第35-36页
     ·cDNA全长克隆第36-40页
     ·基因序列分析第40页
     ·生物信息学分析第40页
   ·结果与分析第40-47页
     ·马铃薯StRab基因的cDNA克隆与测序第40-42页
     ·StRab系统进化分析第42-43页
     ·StRab序列比较分析第43-45页
     ·其它生物信息学分析第45-47页
   ·讨论第47-49页
第3章 马铃薯小G蛋白StRab在晚疫病抗性中的功能研究第49-68页
   ·前言第49页
   ·材料与方法第49-60页
     ·感受态细胞制备第50页
     ·超量表达载体的构建及转化第50-52页
     ·干涉表达载体的构建及转化第52-53页
     ·马铃薯遗传转化、再生和筛选第53-54页
     ·转基因植株的PCR检测第54页
     ·转基因株系基因组DNA大量抽提第54-55页
     ·转基因株系的southern检测第55-58页
     ·转基因株系的表达分析(qPCR)第58-59页
     ·转基因株系的抗性鉴定第59-60页
   ·结果与分析第60-67页
     ·遗传转化载体构建分析第60-61页
     ·转基因抗性株系的筛选与分子检测第61-66页
     ·转基因株系的接种鉴定第66-67页
   ·讨论第67-68页
第4章 马铃薯小G蛋白StRab的亚细胞定位研究第68-78页
   ·前言第68-70页
   ·材料与方法第70-73页
     ·StRab基因与gfp基因融合表达载体构建第70-72页
     ·软件预测StRab蛋白的亚细胞定位第72页
     ·洋葱表皮瞬时表达系统第72页
     ·荧光观察第72-73页
   ·结果与分析第73-76页
     ·融合表达载体检测第73-74页
     ·软件分析StRab的亚细胞定位第74页
     ·StRab的亚细胞定位第74-76页
   ·讨论第76-78页
第5章 马铃薯小G蛋白StRab的互作蛋白研究第78-97页
   ·前言第78页
   ·材料与方法第78-87页
     ·植物材料及处理第78-79页
     ·叶片总RNA提取第79-80页
     ·RNA质量检测第80页
     ·RNA浓度检测第80页
     ·mRNA分离方法第80-81页
     ·mRNA质量及浓度检测第81页
     ·cDNA第一链合成(反转录)第81页
     ·cDNA第二链合成第81-82页
     ·ds cDNA纯化第82-83页
     ·构建和筛选双杂交文库第83页
     ·酵母感受态的制备第83-84页
     ·转化酵母第84-85页
     ·在SD/-Leu固体板上筛选转化子第85页
     ·收转化子第85页
     ·文库菌株与诱饵菌株的杂交第85页
     ·表达互作蛋白的筛选(Ade~+和His~+的筛选)第85-86页
     ·对389个阳性斑的alpha-gal蓝白斑筛选(MEL1的筛选)第86页
     ·对74个阳性斑的进一步鉴定——beta-gal蓝白斑筛选(lacZ的筛选)第86-87页
     ·阳性斑的PCR检测,分析第87页
   ·结果与分析第87-95页
     ·材料处理第87-88页
     ·总RNA完整性及浓度检测第88页
     ·mRNA质量及浓度检测第88-89页
     ·由第一链合成第二链时的循环数确定第89-90页
     ·按确定的循环数合成的第二链检测第90页
     ·第二链过柱后的检测第90-91页
     ·文库检测第91-92页
     ·阳性斑的筛选第92-93页
     ·对389个阳性斑的alpha-gal蓝白斑筛选(MEL1的筛选)结果第93页
     ·对74个阳性斑的进一步鉴定——beta-gal蓝白斑筛选(lacZ的筛选)第93-94页
     ·对阳性斑的PCR检测、测序分析第94-95页
   ·讨论第95-97页
第6章 讨论第97-102页
参考文献第102-115页
致谢第115-116页
附录1:StRab基因Genbank登录信息第116-117页
附录2:超量表达载体构建流程第117-118页
附录3:干涉表达载体构建流程第118-119页
附录4:StRab与gfp融合表达载体构建流程第119-120页
附录5:博士在读期间已发表的文章第120页

 
 
论文编号BS12339,这篇论文共120
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