摘要 | 第6-8页 |
abstract | 第8-9页 |
第一章 引言 | 第17-23页 |
1.1 三叶斑潜蝇 | 第17-18页 |
1.1.1 三叶斑潜蝇的起源及分布 | 第17页 |
1.1.2 三叶斑潜蝇的寄主及危害 | 第17页 |
1.1.3 三叶斑潜蝇的生活习性 | 第17-18页 |
1.2 昆虫气味结合蛋白研究进展 | 第18-21页 |
1.2.1 昆虫气味结合蛋白的类型及结构 | 第18页 |
1.2.2 昆虫气味结合蛋白的表达与分布 | 第18-19页 |
1.2.3 昆虫气味结合蛋白的作用机制及合成降解 | 第19-20页 |
1.2.4 昆虫气味结合蛋白的生理功能 | 第20-21页 |
1.3 论文研究思路 | 第21-23页 |
1.3.1 研究目的及意义 | 第21页 |
1.3.2 研究内容 | 第21页 |
1.3.3 技术路线 | 第21-23页 |
第二章 三叶斑潜蝇OBPS基因的克隆及生物信息学分析 | 第23-32页 |
2.1 材料与方法 | 第23-26页 |
2.1.1 供试昆虫 | 第23页 |
2.1.2 主要试剂及仪器设备 | 第23-24页 |
2.1.3 三叶斑潜蝇转录组测序及OBPs基因的筛选 | 第24页 |
2.1.4 三叶斑潜蝇OBPs基因的克隆及验证 | 第24-26页 |
2.1.5 三叶斑潜蝇OBPs基因的生物信息学分析 | 第26页 |
2.2 结果与分析 | 第26-31页 |
2.2.1 三叶斑潜蝇转录组数据中OBPs基因的克隆验证 | 第26-28页 |
2.2.2 三叶斑潜蝇OBPs基因的序列分析 | 第28-29页 |
2.2.3 三叶斑潜蝇OBPs基因的系统发育分析 | 第29-31页 |
2.3 讨论 | 第31-32页 |
第三章 三叶斑潜蝇OBPS基因的表达谱分析 | 第32-41页 |
3.1 材料与方法 | 第32-34页 |
3.1.1 三叶斑潜蝇不同发育阶段及组织样品的收集 | 第32页 |
3.1.2 主要试剂及仪器设备 | 第32页 |
3.1.3 RNA提取及反转录 | 第32-33页 |
3.1.4 qPCR引物设计及反应体系 | 第33-34页 |
3.2 结果与分析 | 第34-39页 |
3.2.1 荧光定量各个样品的RNA提取 | 第34页 |
3.2.2 qPCR引物扩增效率及特异性检测 | 第34-35页 |
3.2.3 不同发育阶段的表达情况 | 第35-36页 |
3.2.4 不同组织部位的表达情况 | 第36-39页 |
3.3 讨论 | 第39-41页 |
第四章 三叶斑潜蝇气味结合蛋白的原核表达及纯化 | 第41-53页 |
4.1 材料与方法 | 第41-45页 |
4.1.1 供试虫源 | 第41页 |
4.1.2 主要试剂及仪器设备 | 第41页 |
4.1.3 溶液配制 | 第41-43页 |
4.1.4 试验方法 | 第43-45页 |
4.2 结果与分析 | 第45-52页 |
4.2.1 开放阅读框特异性扩增 | 第45-46页 |
4.2.2 重组表达质粒的构建 | 第46-48页 |
4.2.3 重组蛋白的诱导表达 | 第48页 |
4.2.4 重组蛋白的纯化 | 第48-52页 |
4.3 讨论 | 第52-53页 |
第五章 三叶斑潜蝇气味结合蛋白的气味结合特性研究 | 第53-65页 |
5.1 材料与方法 | 第53-56页 |
5.1.1 供试材料 | 第53页 |
5.1.2 主要试剂及仪器设备 | 第53页 |
5.1.3 试验方法 | 第53-56页 |
5.2 结果与分析 | 第56-64页 |
5.2.1 LtriOBP1-7与1-NPN的结合常数及方程验证 | 第56-58页 |
5.2.2 LtriOBP1-7与25种气味配基的竞争性结合 | 第58-64页 |
5.3 讨论 | 第64-65页 |
第六章 三叶斑潜蝇气味结合蛋白的免疫荧光定位 | 第65-77页 |
6.1 材料与方法 | 第65-66页 |
6.1.1 供试昆虫 | 第65页 |
6.1.2 主要试剂及仪器设备 | 第65页 |
6.1.3 三叶斑潜蝇气味结合蛋白抗体的制备 | 第65页 |
6.1.4 三叶斑潜蝇组织的冷冻切片 | 第65-66页 |
6.1.5 三叶斑潜蝇组织的免疫染色 | 第66页 |
6.2 结果与分析 | 第66-75页 |
6.2.1 三叶斑潜蝇LtriOBP1-7在触角中的定位情况 | 第66-71页 |
6.2.2 三叶斑潜蝇LtriOBP1-7在口器中的定位情况 | 第71-72页 |
6.2.3 三叶斑潜蝇LtriOBP1-7在头部中的定位情况 | 第72-73页 |
6.2.4 三叶斑潜蝇LtriOBP1-7在前足附节中的定位情况 | 第73-74页 |
6.2.5 三叶斑潜蝇LtriOBP1-7在幼虫及蛹中的定位情况 | 第74-75页 |
6.3 讨论 | 第75-77页 |
第七章 全文结论 | 第77-79页 |
参考文献 | 第79-88页 |
致谢 | 第88-89页 |
作者简历 | 第89页 |