摘要 | 第4-6页 |
abstract | 第6-7页 |
第一章 引言 | 第11-20页 |
1.1 植物转录因子的概述 | 第11-12页 |
1.1.1 植物转录因子的结构与分类 | 第11-12页 |
1.2 拟南芥bHLH转录因子的研究进展 | 第12-16页 |
1.2.1 bHLH转录因子的结构 | 第12-13页 |
1.2.2 bHLH转录因子的分类 | 第13页 |
1.2.3 拟南芥bHLH转录因子的生理功能 | 第13-16页 |
1.3 基因编辑技术 | 第16页 |
1.4 CRISPR-Cas9技术 | 第16-17页 |
1.4.1 CRISPR-Cas9系统的分类和构成 | 第17页 |
1.4.2 CRISPR-Cas9系统的作用方式 | 第17页 |
1.5 本研究的目的意义和主要研究内容 | 第17-20页 |
1.5.1 研究意义 | 第17-18页 |
1.5.2 主要研究内容 | 第18-19页 |
1.5.3 研究技术路线 | 第19-20页 |
第二章 QQ1和QQ2的生物信息学分析 | 第20-27页 |
2.1 实验方法 | 第20页 |
2.2 实验内容 | 第20-21页 |
2.2.1 生物信息学分析 | 第20页 |
2.2.2 QQ1和QQ2与AtbHLH转录因子的多重序列比对与系统进化树分析 | 第20-21页 |
2.3 结果与分析 | 第21-26页 |
2.3.1 QQ1和QQ2基因的结构 | 第21页 |
2.3.2 QQ1与QQ2的氨基酸序列比对 | 第21-22页 |
2.3.3 QQ1和QQ2蛋白的理化性质 | 第22页 |
2.3.4 QQ1和QQ2蛋白的亚细胞定位预测 | 第22页 |
2.3.5 QQ1和QQ2蛋白的三级结构预测 | 第22-23页 |
2.3.6 QQ1和QQ2在不同的组织的表达模式 | 第23-24页 |
2.3.7 QQ1和QQ2与AtbHLH转录因子的多重序列比对与系统进化树分析 | 第24-26页 |
本章小结 | 第26-27页 |
第三章 QQ1和QQ2过表达和突变体转基因植株的获得与分析 | 第27-57页 |
3.1 实验材料 | 第27-28页 |
3.1.1 植物材料及种植方法 | 第27页 |
3.1.2 菌株和质粒 | 第27-28页 |
3.1.3 抗体、酶及主要的生化试剂 | 第28页 |
3.2 实验方法 | 第28-35页 |
3.2.1 基因组总DNA的提取 | 第28页 |
3.2.2 植物总RNA的提取 | 第28-29页 |
3.2.3 PCR和RT-PCR | 第29-31页 |
3.2.4 载体的构建 | 第31-34页 |
3.2.5 拟南芥的遗传转化 | 第34-35页 |
3.2.6 Western杂交技术 | 第35页 |
3.3 实验内容 | 第35-44页 |
3.3.1 QQ1和QQ2过表达株系的获得及筛选分析 | 第35-39页 |
3.3.2 qq1和qq2突变体系的获得及分析 | 第39-44页 |
3.4 结果与分析 | 第44-56页 |
3.4.1 QQ1和QQ2过表达株系的获得及分析 | 第44-47页 |
3.4.2 qq1和qq2突变体株系的获得及分析 | 第47-56页 |
本章小结 | 第56-57页 |
第四章 QQ1和QQ2的表达特性和功能的研究 | 第57-72页 |
4.1 实验材料 | 第57页 |
4.1.1 植物材料 | 第57页 |
4.2 实验方法 | 第57-58页 |
4.2.1 含有GUS的转基因植物的组织化学染色 | 第57页 |
4.2.2 烟草的瞬时转化 | 第57-58页 |
4.2.3 酵母双杂交实验 | 第58页 |
4.3 实验内容 | 第58-63页 |
4.3.1 QQ1和QQ2的表达特异性研究 | 第58-61页 |
4.3.2 QQ1和QQ2蛋白的亚细胞定位 | 第61页 |
4.3.3 QQ1和QQ2与PRE1在酵母体内相互作用的研究 | 第61-62页 |
4.3.4 QQ1和QQ2过表达植株的RNA-seq分析 | 第62-63页 |
4.4 结果与分析 | 第63-71页 |
4.4.1 QQ1和QQ2的表达特性研究 | 第63-66页 |
4.4.2 QQ1和QQ2的亚细胞定位 | 第66页 |
4.4.3 QQ1和QQ2与PRE1在酵母体内相互作用的研究 | 第66-67页 |
4.4.4 QQ1和QQ2过表达植株的RNA-seq数据分析 | 第67-71页 |
本章小结 | 第71-72页 |
第五章 结论 | 第72-74页 |
5.1 结论 | 第72-73页 |
5.2 下一步研究计划 | 第73-74页 |
参考文献 | 第74-81页 |
附录1 论文中用到的引物 | 第81-84页 |
附录2 QQ1、QQ2与AtbHLHTF的多重序列比 | 第84-88页 |
附录3 各种培养基和溶液配置 | 第88-90页 |
攻读硕士学位期间取得的学术成果 | 第90-91页 |
致谢 | 第91-92页 |