| 致谢 | 第5-6页 |
| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 常用中英文缩略词表 | 第16-17页 |
| 文献综述 | 第17-24页 |
| 引言 | 第24-50页 |
| 1.1 材料 | 第25-31页 |
| 1.1.1 实验动物与细胞系的来源 | 第25页 |
| 1.1.2 相关质粒与菌株的来源 | 第25页 |
| 1.1.3 主要试剂与耗材 | 第25-27页 |
| 1.1.4 相关试剂与缓冲液的配制 | 第27-30页 |
| 1.1.5 主要实验仪器 | 第30-31页 |
| 1.2 方法 | 第31-50页 |
| 1.2.1 实验动物的饲养与样品采集 | 第31页 |
| 1.2.2 chNLRX1保守序列与ORF的扩增 | 第31-36页 |
| 1.2.2.1 设计chNLRX1保守区引物 | 第31-32页 |
| 1.2.2.2 鸡组织RNA提取与反转录 | 第32-33页 |
| 1.2.2.3 chNLRX1保守区的扩增与TA克隆 | 第33-36页 |
| 1.2.3 RACE扩增与基因拼接 | 第36-38页 |
| 1.2.3.1 RACE扩增引物的设计 | 第36页 |
| 1.2.3.2 RACE扩增模板的制备 | 第36-37页 |
| 1.2.3.3 5'RACE与3'RACE | 第37-38页 |
| 1.2.3.4 chNLRX1全基因的拼接 | 第38页 |
| 1.2.4 chNLRX1序列比对与分析 | 第38页 |
| 1.2.5 chNLRX1重组质粒的构建 | 第38-40页 |
| 1.2.5.1 感受态细胞的制备 | 第38-39页 |
| 1.2.5.2 chNLRX1连接不同载体的引物设计 | 第39页 |
| 1.2.5.3 重组质粒的构建与鉴定 | 第39-40页 |
| 1.2.6 chNLRX1原核表达与抗体制备 | 第40-42页 |
| 1.2.6.1 chNLRX1抗原表位的筛选 | 第40页 |
| 1.2.6.2 原核表达 | 第40-41页 |
| 1.2.6.3 chNLRX1-part蛋白的大量诱导与纯化 | 第41页 |
| 1.2.6.4 Western blot检测 | 第41-42页 |
| 1.2.7 chNLRX1真核转染与亚细胞定位 | 第42-44页 |
| 1.2.7.1 真核转染质粒的抽提 | 第42-43页 |
| 1.2.7.2 准备细胞与细胞转染 | 第43-44页 |
| 1.2.7.3 chNLRX1在细胞内的表达定位 | 第44页 |
| 1.2.8 线粒体分离与融合蛋白的检测 | 第44-45页 |
| 1.2.8.1 分离线粒体与胞浆并提取蛋白 | 第44页 |
| 1.2.8.2 Western blot检测chNLRX1融合蛋白的表达 | 第44-45页 |
| 1.2.9 相对定量RT-qPCR检测组织中chNLRX1表达 | 第45-47页 |
| 1.2.9.1 组织cDNA待测样本的制备 | 第45页 |
| 1.2.9.2 RT-qPCR引物 | 第45-46页 |
| 1.2.9.3 制作标准曲线与特异性验证 | 第46页 |
| 1.2.9.4 各组织样本的RT-qPCR检测 | 第46页 |
| 1.2.9.5 数据处理与分析 | 第46-47页 |
| 1.2.10 LPS诱导DF-1细胞中NLRX1表达 | 第47-48页 |
| 1.2.10.1 LPS刺激DF-1细胞 | 第47页 |
| 1.2.10.2 待检样品的制备 | 第47页 |
| 1.2.10.3 RT-qPCR检测 | 第47页 |
| 1.2.10.4 数据处理与分析 | 第47-48页 |
| 1.2.11 鸡白痢沙门氏菌感染诱导chNLRX1的表达 | 第48页 |
| 1.2.11.1 鸡白痢沙门氏菌的培养与计数 | 第48页 |
| 1.2.11.2 鸡白痢沙门氏菌感染HD11细胞 | 第48页 |
| 1.2.11.3 待检待检样品的制备与检测 | 第48页 |
| 1.2.11.4 数据处理与分析 | 第48页 |
| 1.2.12 腺病毒介导shRNA干扰chNLRX1表达 | 第48-50页 |
| 2 结果与分析 | 第50-63页 |
| 2.1 chNLRX1基因克隆 | 第50-51页 |
| 2.2 chNLRX1序列分析 | 第51-54页 |
| 2.3 chNLRX1原核表达与抗体制备 | 第54-56页 |
| 2.4 chNLRX1真核表达重组质粒的构建 | 第56-57页 |
| 2.5 chNLRX1真核转染与亚细胞定位 | 第57-58页 |
| 2.6 RT-qPCR检测方法的建立 | 第58-59页 |
| 2.7 chNLRX1的组织相对表达量 | 第59-60页 |
| 2.8 LPS诱导DF-1细胞中chNLRX1表达变化 | 第60页 |
| 2.9 鸡白痢沙门氏菌对细胞中chNLRX1的诱导变化 | 第60-61页 |
| 2.10 腺病毒介导siRNA干扰效果的评价 | 第61-63页 |
| 3 讨论 | 第63-65页 |
| 4 结论 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-75页 |
| 作者简介 | 第75页 |
广告服务 
