| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-22页 |
| ·纤维素酶、半纤维素酶概述 | 第12-16页 |
| ·纤维素酶 | 第12-13页 |
| ·半纤维素酶 | 第13页 |
| ·木聚糖酶 | 第13-15页 |
| ·酶的分子生物学相关技术进展 | 第15-16页 |
| ·多功能木聚糖酶研究进展 | 第16-19页 |
| ·多功能酶概述 | 第17页 |
| ·多功能木聚糖酶分类 | 第17-19页 |
| ·木聚糖酶应用 | 第19-21页 |
| ·造纸工业 | 第19-20页 |
| ·食品工业 | 第20-21页 |
| ·饲料工业 | 第21页 |
| ·其他 | 第21页 |
| ·研究的目的和意义 | 第21-22页 |
| 第二章 来源于青贮饲料菌株 Paenibacillus sp. E18 的木聚糖降解基因簇的克隆 | 第22-34页 |
| ·实验材料 | 第22-23页 |
| ·菌株、质粒和引物 | 第22页 |
| ·引物合成 | 第22页 |
| ·试剂与仪器 | 第22页 |
| ·溶液 | 第22页 |
| ·培养基 | 第22-23页 |
| ·实验方法 | 第23-28页 |
| ·产酶菌株E18 的平板筛选 | 第23页 |
| ·模板DNA 的提取 | 第23页 |
| ·16S rDNA 鉴定 | 第23-24页 |
| ·木聚糖酶基因部分序列的克隆 | 第24页 |
| ·DNA 片段的回收和连接 | 第24-25页 |
| ·重组子筛选 | 第25页 |
| ·DNA 测序 | 第25页 |
| ·两步Tail-PCR 法获得侧翼序列 | 第25-28页 |
| ·结果与分析 | 第28-32页 |
| ·产酶菌株E18 的平板筛选 | 第28页 |
| ·16S rDNA 鉴定 | 第28-29页 |
| ·木聚糖酶基因部分序列的克隆及上下游序列的获得 | 第29-32页 |
| ·本章小结 | 第32-34页 |
| 第三章 重组酶 XynB-E18 在大肠杆菌中的表达及性质分析 | 第34-49页 |
| ·实验材料 | 第34-35页 |
| ·菌株和质粒 | 第34页 |
| ·引物合成 | 第34页 |
| ·试剂与仪器 | 第34页 |
| ·溶液 | 第34-35页 |
| ·实验方法 | 第35-41页 |
| ·原核表达载体pET22b(+)/xynB-E18 构建 | 第35-37页 |
| ·重组木聚糖酶XynB-E18 的分离纯化及蛋白性质分析 | 第37-38页 |
| ·酶学性质测定 | 第38-40页 |
| ·比活力测定 | 第40页 |
| ·水解产物分析 | 第40页 |
| ·不同底物作用活性位点分析 | 第40-41页 |
| ·结果与分析 | 第41-47页 |
| ·原核表达载体pET22b(+)/xynB- E18 的构建 | 第41-42页 |
| ·重组酶的分离纯化及蛋白性质测定 | 第42-43页 |
| ·重组酶酶学性质测定 | 第43-46页 |
| ·比活性测定 | 第46页 |
| ·水解产物分析 | 第46-47页 |
| ·不同底物作用活性位点分析 | 第47页 |
| ·本章小结 | 第47-49页 |
| 第四章 讨论 | 第49-53页 |
| ·筛选环境及培养条件的选择 | 第49页 |
| ·青贮饲料环境的选择 | 第49页 |
| ·培养条件的选择 | 第49页 |
| ·应用简并引物 PCR 克隆木聚糖酶基因的可行性 | 第49-50页 |
| ·基因结构分析 | 第50-51页 |
| ·表达载体的选择 | 第51页 |
| ·重组酶 XynB-E18 性质分析 | 第51-53页 |
| ·酶性质分析 | 第51-52页 |
| ·底物特异性分析 | 第52-53页 |
| 第五章 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 作者简历 | 第62页 |
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