内容提要 | 第4-6页 |
中文摘要 | 第6-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
英文缩略词 | 第12-17页 |
前言 | 第17-19页 |
第1章 绪论 | 第19-32页 |
1.1 酿酒酵母的基因沉默 | 第19-27页 |
1.1.1 酿酒酵母基因沉默的区域 | 第19-21页 |
1.1.2 基因沉默的相关蛋白 | 第21-22页 |
1.1.3 基因沉默的机制 | 第22-24页 |
1.1.4 基因沉默的形成,维持,遗传 | 第24-27页 |
1.2 酿酒酵母的原沉默子 | 第27-29页 |
1.2.1 酿酒酵母的沉默子 | 第27-28页 |
1.2.2 原沉默子ORC结合位点 | 第28页 |
1.2.3 原沉默子Abf1p结合位点 | 第28-29页 |
1.2.4 原沉默子Rap1p结合位点 | 第29页 |
1.3 染色质重构因子 | 第29-32页 |
1.3.1 染色质重构因子Fun30蛋白 | 第30页 |
1.3.2 染色质重构因子IswI蛋白 | 第30-32页 |
第2章 不同原沉默子基因沉默作用的表型 | 第32-48页 |
2.1 方法 | 第33-37页 |
2.1.1 LiAc法转化酵母 | 第33页 |
2.1.2 玻璃珠法提取基因组DNA | 第33-34页 |
2.1.3 Southern blotting | 第34页 |
2.1.4 基因沉默表型分析法 | 第34-35页 |
2.1.5 质粒的构建 | 第35页 |
2.1.6 酵母菌种的构建以及Southern blot法鉴定 | 第35-37页 |
2.2 结果 | 第37-44页 |
2.2.1 Southern blotting法鉴定酵母菌株 | 第37-38页 |
2.2.2 PCR法鉴定酵母菌株 | 第38-39页 |
2.2.3 不同原沉默子对基因沉默的起到不同的作用 | 第39-41页 |
2.2.4 原沉默子拷贝数对基因沉默的影响 | 第41-43页 |
2.2.5 原沉默子位置对基因沉默的影响 | 第43-44页 |
2.3 讨论 | 第44-48页 |
第3章 原沉默子对沉默染色质结构的影响 | 第48-63页 |
3.1 方法 | 第50-52页 |
3.1.1 DNA拓扑结构分析法 | 第50-51页 |
3.1.2 MNase降解实验 | 第51-52页 |
3.2 结果 | 第52-61页 |
3.2.1 不同原沉默子对染色质紧密程度有不同的影响 | 第52-53页 |
3.2.2 Abf1拷贝数对染色质紧密程度的影响 | 第53-54页 |
3.2.3 Rap1位置对染色质紧密程度的影响 | 第54-56页 |
3.2.4 不同原沉默子对异染色质稳定性的影响 | 第56-57页 |
3.2.5 不同原沉默子对染色质核小体分布的影响 | 第57-61页 |
3.3 讨论 | 第61-63页 |
第4章 染色质重构因子对基因沉默及染色质结构的作用 | 第63-77页 |
4.1 材料和方法 | 第63-65页 |
4.1.1 菌株 | 第63-64页 |
4.1.2 试剂 | 第64页 |
4.1.3 方法 | 第64-65页 |
4.2 结果 | 第65-74页 |
4.2.1 Fun30和IswI对HML区域基因沉默影响 | 第65-66页 |
4.2.2 高度负超螺旋的异染色质需要Fun30作用而不需要IswI | 第66-68页 |
4.2.3 Fun30蛋白有助于染色质形成特定结构 | 第68-70页 |
4.2.4 IswI对异染色质的形成没有影响 | 第70页 |
4.2.5 IswI和Fun30对异染色质的形成没有影响 | 第70-71页 |
4.2.6 Fun30对沉默化染色质结构没有影响 | 第71页 |
4.2.7 Fun30对沉默化染色质组蛋白修饰没有影响 | 第71-72页 |
4.2.8 沉默异染色质结构的形成需要Fun30蛋白 | 第72-73页 |
4.2.9 IswI对异染色质结构起维持稳定作用 | 第73-74页 |
4.3 讨论 | 第74-77页 |
参考文献 | 第77-97页 |
作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第97-98页 |
致谢 | 第98页 |