摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-19页 |
·植物抗坏血酸的研究进展 | 第11-17页 |
·抗坏血酸的生物学功能 | 第11-14页 |
·植物抗坏血酸的生物合成 | 第14-15页 |
·植物抗坏血酸的代谢和转运 | 第15-17页 |
·植物D-半乳糖醛酸还原酶的研究进展 | 第17-18页 |
·本试验的目的和意义 | 第18-19页 |
第二章 材料与方法 | 第19-33页 |
·试验材料 | 第19-20页 |
·植物材料 | 第19页 |
·菌株与质粒 | 第19页 |
·酶及生化试剂 | 第19页 |
·主要仪器 | 第19-20页 |
·引物的设计与合成 | 第20页 |
·试验内容与方法 | 第20-33页 |
·猕猴桃总RNA 的提取 | 第20-21页 |
·GalUR 基因全长的获得 | 第21-23页 |
·猕猴桃GalUR 基因植物表达载体的构建 | 第23-25页 |
·猕猴桃GalUR 基因RNAi 表达载体的构建 | 第25-26页 |
·T-AsA、AsA 和DHA 含量的测定 | 第26页 |
·猕猴桃GalUR 基因mRNA 表达的实时荧光定量分析 | 第26-27页 |
·猕猴桃GalUR 基因在大肠杆菌中的表达 | 第27-30页 |
·猕猴桃GalUR 基因的多克隆抗体的制备与Western blot 分析 | 第30-33页 |
第三章 结果与分析 | 第33-51页 |
·GalUR 基因cDNA 全长的克隆 | 第33-38页 |
·猕猴桃总RNA 提取 | 第33页 |
·GalUR 基因cDNA 全长的获得 | 第33页 |
·GalUR 基因重组质粒的鉴定 | 第33-34页 |
·GalUR 基因cDNA 全长的序列测定及生物学信息分析 | 第34-38页 |
·猕猴桃GalUR 基因植物表达载体的构建和鉴定 | 第38-40页 |
·猕猴桃GalUR 基因植物表达载体的构建 | 第38页 |
·猕猴桃GalUR 基因植物表达载体的鉴定 | 第38-39页 |
·植物表达载体pWR/GalUR 转化农杆菌 | 第39-40页 |
·猕猴桃GalUR 基因RNAi 表达载体的构建及鉴定 | 第40-43页 |
·GalUR 干扰表达载体的构建 | 第40-41页 |
·GalUR RNAi 表达载体pHGRV/GalUR 的检测 | 第41页 |
·pHGRV/GalUR 测序结果 | 第41页 |
·GalUR RNAi 表达载体转化农杆菌EHA105 及其检测 | 第41-43页 |
·猕猴桃中抗坏血酸相关指标的测定与GalUR 基因的定量表达 | 第43-45页 |
·猕猴桃果实不同发育时期AsA 含量相关指标及表达水平的变化 | 第43-44页 |
·猕猴桃不同组织AsA 含量相关指标及表达水平的变化 | 第44-45页 |
·猕猴桃GalUR 基因的原核表达 | 第45-50页 |
·GalUR 基因原核表达载体的构建与检测 | 第45-47页 |
·猕猴桃GalUR 基因的诱导表达与SDS-PAGE 电泳分析 | 第47页 |
·GalUR 基因的蛋白特性分析 | 第47-49页 |
·pET/GalUR 表达的融和蛋白的纯化检测 | 第49-50页 |
·猕猴桃不同组织GalUR 基因表达的蛋白的Western blot 分析 | 第50-51页 |
第四章 讨论 | 第51-55页 |
·关于RNA 的提取 | 第51页 |
·关于D-半乳糖醛酸还原酶基因 | 第51页 |
·关于植物表达载体 | 第51-52页 |
·关于转基因 | 第52页 |
·关于外源基因的表达 | 第52页 |
·关于蛋白纯化 | 第52-53页 |
·关于western blot | 第53页 |
·关于猕猴桃GalUR 基因的定量表达 | 第53-55页 |
第五章 结论 | 第55-57页 |
参考文献 | 第57-62页 |
致谢 | 第62-63页 |
作者简介 | 第63页 |