摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6页 |
第1章 文献综述 | 第10-22页 |
1.1 水产养殖及其病害 | 第10页 |
1.2 迟缓爱德华氏菌 | 第10-12页 |
1.2.1 迟缓爱德华氏菌及迟缓爱德华氏菌病 | 第10-11页 |
1.2.2 迟缓爱德华氏菌致病机理 | 第11页 |
1.2.3 迟缓爱德华氏菌分泌系统 | 第11-12页 |
1.2.4 迟缓爱德华氏菌双组分系统EsrA-EsrB及其调控因子EsrC | 第12页 |
1.3 GAPDH蛋白 | 第12-16页 |
1.3.1 GAPDH蛋白 | 第12页 |
1.3.2 GAPDH在原核生物中的功能 | 第12-13页 |
1.3.3 GAPDH蛋白功能多样性的结构 | 第13-16页 |
1.4 细菌分泌系统 | 第16-18页 |
1.4.1 T1SS分泌系统 | 第16页 |
1.4.2 T2SS分泌系统 | 第16页 |
1.4.3 T3SS分泌系统 | 第16-17页 |
1.4.4 T4SS和T5SS分泌系统 | 第17页 |
1.4.5 T6SS分泌系统 | 第17-18页 |
1.5 主要协助转运蛋白超家族 | 第18-21页 |
1.5.1 MFS的转运机制 | 第18-19页 |
1.5.2 MFS的一般结构特点 | 第19-21页 |
1.6 本课题的主要内容和意义 | 第21-22页 |
第2章 GAPDH分泌途径和条件 | 第22-33页 |
2.1 引言 | 第22页 |
2.2 实验材料 | 第22-24页 |
2.2.1 实验菌株及培养基 | 第22-23页 |
2.2.2 实验试剂 | 第23-24页 |
2.3 实验方法 | 第24-27页 |
2.3.1 细菌胞外蛋白提取 | 第24-25页 |
2.3.2 胞外蛋白检测 | 第25-27页 |
2.4 实验结果与讨论 | 第27-31页 |
2.4.1 经典分泌途径 | 第27-28页 |
2.4.2 不同培养方式对GAPDH分泌的影响 | 第28-30页 |
2.4.3 不同培养基对GAPDH分泌的影响 | 第30-31页 |
2.4.4 不同培养温度对GAPDH分泌的影响 | 第31页 |
2.5 本章小结 | 第31-33页 |
第3章 GAPDH分泌相关基因的全基因组筛查 | 第33-55页 |
3.1 引言 | 第33页 |
3.2 实验材料 | 第33页 |
3.3 实验方法 | 第33-34页 |
3.3.1 构建并筛选GAPDH分泌增加或者减少的菌株 | 第33-34页 |
3.3.2 大规模筛选突变体文库中GAPDH分泌增加或者减少的菌株 | 第34页 |
3.3.3 菌株分泌曲线测定 | 第34页 |
3.4 实验结果与讨论 | 第34-54页 |
3.4.1 筛选条件摸索与筛选方法优化 | 第34-36页 |
3.4.2 对突变体文库筛选结果及验证 | 第36-52页 |
3.4.3 GAPDH分泌调控相关基因与机制 | 第52-53页 |
3.4.4 插入失活株的GAPDH分泌随时间变化的关系 | 第53-54页 |
3.5 本章小结 | 第54-55页 |
第4章 GAPDH的转录水平分析 | 第55-62页 |
4.1 引言 | 第55页 |
4.2 实验材料 | 第55页 |
4.3 实验方法 | 第55-58页 |
4.3.1 菌株培养及菌体收集 | 第55页 |
4.3.2 RNA抽提及逆转录 | 第55-57页 |
4.3.3 相关基因转录水平的检测 | 第57-58页 |
4.4 实验结果 | 第58-61页 |
4.4.1 内参筛选实验 | 第58页 |
4.4.2 GAPDH在不同分泌阶段的转录水平分析 | 第58-59页 |
4.4.3 与GAPDH分泌相关基因的转录水平分析 | 第59-61页 |
4.5 本章小结 | 第61-62页 |
第5章 结论与展望 | 第62-64页 |
5.1 主要结论 | 第62页 |
5.2 展望 | 第62-64页 |
参考文献 | 第64-68页 |
致谢 | 第68-69页 |
所发表论文 | 第69页 |