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弓形虫氨基肽酶N3的定位和酶动力学研究 |
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论文目录 |
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摘要 | 第6-7页 | Abstract | 第7-8页 | 前言 | 第11-19页 | 1 弓形虫概述 | 第11-15页 | 1.1 弓形虫 | 第11-12页 | 1.2 弓形虫生活史发现 | 第12-13页 | 1.3 弓形虫入侵 | 第13页 | 1.4 弓形虫状况 | 第13-14页 | 1.5 感染弓形虫临床表现 | 第14-15页 | 2 弓形虫氨基肽酶的概述 | 第15-16页 | 3 氨基肽酶N的概述 | 第16-17页 | 4 本研究的目的及意义 | 第17-19页 | 材料与方法 | 第19-29页 | 1 材料 | 第19-21页 | 1.1 虫株及细胞 | 第19页 | 1.2 载体与宿主菌 | 第19页 | 1.3 主要购买试剂 | 第19页 | 1.4 主要仪器 | 第19-20页 | 1.5 主要溶液及培养基 | 第20-21页 | 2 方法 | 第21-29页 | 2.1 寄生虫菌株和生长条件 | 第21页 | 2.2 弓形虫APN3的序列分析 | 第21-22页 | 2.2.1 弓形虫APN3的序列同源性比对 | 第21页 | 2.2.2 弓形虫APN3的系统进化树的构建 | 第21-22页 | 2.2.3 弓形虫APN3的分子建模 | 第22页 | 2.3 弓形虫APN3编码基因的获取 | 第22-24页 | 2.3.1 引物设计 | 第22页 | 2.3.2 目的基因提取及克隆 | 第22-24页 | 2.4 弓形虫APN3的表达及纯化 | 第24-25页 | 2.4.1 弓形虫APN3在大肠杆菌中的表达 | 第24页 | 2.4.2 弓形虫APN3的蛋白纯化 | 第24-25页 | 2.5 弓形虫APN3的生化特性分析 | 第25-26页 | 2.5.1 弓形虫APN3的酶活性测定 | 第25页 | 2.5.2 弓形虫APN3的体外酶活性条件的优化 | 第25-26页 | 2.5.2.1 最佳pH的鉴定 | 第25页 | 2.5.2.2 最适金属离子的筛选 | 第25-26页 | 2.5.3 弓形虫APN3的体外酶动力学分析 | 第26页 | 2.5.4 弓形虫APN3底物偏好性鉴定 | 第26页 | 2.5.5 弓形虫APN3酶抑制剂的筛选与鉴定 | 第26页 | 2.6 弓形虫APN3的亚细胞定位 | 第26-29页 | 2.6.1 弓形虫在宿主细胞内不同生长时间下APN3的定位分析 | 第26-27页 | 2.6.2 弓形虫APN3与微线体蛋白的共定位分析 | 第27页 | 2.6.3 弓形虫APN3与致密颗粒蛋白的共定位分析 | 第27-29页 | 结果 | 第29-35页 | 1 弓形虫APN3编码基因的鉴定和分析 | 第29-30页 | 2 弓形虫APN3的表达 | 第30页 | 3 酶动力学和弓形虫APN3的抑制 | 第30-33页 | 3.1 最佳pH鉴定 | 第30-31页 | 3.2 最适金属离子的筛选 | 第31页 | 3.3 酶动力学分析 | 第31-32页 | 3.4 rTgAPN3水解底物的动力学参数 | 第32页 | 3.5 TgAPN3酶抑制剂筛选 | 第32-33页 | 4 弓形虫APN3的亚细胞定位 | 第33-35页 | 4.1 TgAPN3不同时间下的定位 | 第33页 | 4.2 TgAPN3与微线蛋白和致密颗粒蛋白共定位分析 | 第33-34页 | 4.3 TgAPN3与致密颗粒蛋白细胞体内外共定位分析 | 第34-35页 | 讨论 | 第35-37页 | 结论 | 第37-38页 | 参考文献 | 第38-44页 | 致谢 | 第44-45页 | 附录A (作者简介) | 第45-46页 | 附录B (在研期间发表的论文) | 第46页 |
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