第一部分:拟南芥中一种有效的耐盐基因挖掘方法 | 第1-36页 |
摘要 | 第7-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
第1章 绪论 | 第9-25页 |
·拟南芥及其研究简介 | 第9页 |
·盐芥及其研究简介 | 第9-10页 |
·根瘤农杆菌简介 | 第10-12页 |
·根瘤农杆菌 | 第10页 |
·Ti质粒 | 第10-11页 |
·T-DNA的转移和整合机制 | 第11-12页 |
·T-DNA载体简介 | 第12-15页 |
·T-DNA 载体构建理念 | 第12-13页 |
·T-DNA 载体分类 | 第13-14页 |
·迷你双元载体系列 | 第14-15页 |
·拟南芥浸花转化 | 第15-16页 |
·植物的盐胁迫 | 第16-17页 |
·耐盐研究的遗传模式体系 | 第17-18页 |
·植物的耐盐机制 | 第18-21页 |
·解毒 | 第18-19页 |
·动态平衡 | 第19-20页 |
·生长调控 | 第20-21页 |
·GATEWAY克隆技术简介 | 第21-23页 |
·以重组为基础的SMART-cDNA文库的合成 | 第23-25页 |
第2章 结果 | 第25-30页 |
·拟南芥耐盐转化体库的构建 | 第25页 |
·高通量耐盐突变体的筛选 | 第25-27页 |
·耐盐突变体的初筛 | 第25页 |
·耐盐突变体的复筛 | 第25-27页 |
·耐盐突变体盐芥cDNA的克隆 | 第27-29页 |
·ST5-18在拟南芥中的功能重演 | 第29-30页 |
第3章 讨论 | 第30-33页 |
·挖掘新的耐盐基因的一个简单有效的方法 | 第30-31页 |
·ST5-18在拟南芥中的功能重演分析 | 第31-32页 |
·挖掘功能(耐盐)基因方法的改进 | 第32-33页 |
第4章 材料和方法 | 第33-36页 |
·拟南芥生态型和生长条件 | 第33页 |
·盐芥cDNA表达文库转入到农杆菌中 | 第33页 |
·拟南芥转基因种子库的创建 | 第33-34页 |
·高通量耐盐突变体的筛选 | 第34页 |
·耐盐突变体的复筛 | 第34页 |
·PCR扩增盐芥cDNA和cDNA的测序 | 第34-35页 |
·分离得到的盐芥cDNA耐盐功能的确认 | 第35-36页 |
第二部分:拟南芥耐氧化突变体 OT24-1 的筛选和分析 | 第36-60页 |
摘要 | 第36-37页 |
ABSTRACT | 第37-38页 |
第1章 绪论 | 第38-42页 |
·激活标记简介 | 第38-39页 |
·植物中的氧化胁迫 | 第39页 |
·甲基紫精及植物对甲基紫精耐受机制的研究 | 第39-40页 |
·ABC膜转运蛋白概述 | 第40-42页 |
第2章 结果 | 第42-54页 |
·耐氧化突变体OT24-1 的筛选及其遗传分析 | 第42-44页 |
·耐氧化突变体OT24-1的筛选 | 第42页 |
·耐氧化突变体OT24-1paraquat抗性的遗传分析 | 第42-44页 |
·T-DNA插入位点的鉴定 | 第44-45页 |
·多个突变位点分析以确认OT24-1对paraquat的抗性 | 第45-48页 |
·基因at1g66950的表达模式及其编码蛋白的定位 | 第48-50页 |
·基因at1g66950的表达模式分析 | 第48-49页 |
·at1g66950编码的PDR5类似蛋白(ABC转运蛋白)定位在质膜上 | 第49-50页 |
·OT24-1的离体叶片与野生型的一样对paraquat敏感 | 第50-51页 |
·OT24-1植株体内paraquat的吸收被部分地削弱 | 第51-54页 |
第3章 讨论 | 第54-57页 |
·高等植物中paraquat的抗性是由多种因素决定的 | 第54页 |
·降低的paraquat的吸收量使OT24-1具有paraquat的抗性 | 第54-55页 |
·有待进一步验证的假说 | 第55-57页 |
第4章 材料和方法 | 第57-60页 |
·拟南芥耐氧化突变体的筛选 | 第57页 |
·突变体萌芽分析 | 第57页 |
·遗传分析 | 第57页 |
·PCR筛选salk株系纯合体以及基因at1g66950缺失表达的确认 | 第57-58页 |
·重组载体的构建和转基因植株的获得 | 第58页 |
·GUS组织化学染色法 | 第58页 |
·转基因植株中GFP 融合蛋白的定位 | 第58-59页 |
·质膜原生质体中绿色荧光的观察 | 第59页 |
·paraquat损伤分析 | 第59页 |
·paraquat吸收研究 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-68页 |
致谢 | 第68-69页 |
硕士在读期间发表的论文 | 第69页 |