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枯草芽孢杆菌溶栓酶的分离纯化及其酶学性质研究 |
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| 中文摘要 | 第1-9页 | | ABSTRACT | 第9-10页 | | 1 文献综述 | 第10-19页 | | ·豆豉溶栓酶的溶栓机制 | 第11-12页 | | ·豆豉溶栓酶的菌种 | 第12页 | | ·豆豉溶栓酶的分离纯化 | 第12-15页 | | ·豆豉溶栓酶的理化性质 | 第15页 | | ·酶的分子量 | 第15页 | | ·酶的等电点 | 第15页 | | ·酶的稳定性 | 第15页 | | ·酰胺水解酶活性 | 第15页 | | ·豆豉溶栓酶基因的克隆和表达 | 第15-17页 | | ·豆豉溶栓酶的功能实验 | 第17页 | | ·体外溶血作用 | 第17页 | | ·对体外凝血时间(CT)和优球蛋白溶解时间(ELT)的影响 | 第17页 | | ·体内抗栓、溶栓作用 | 第17页 | | ·本项实验的研究意义及应用前景 | 第17-19页 | | 2 材料与方法 | 第19-26页 | | ·材料 | 第19页 | | ·菌株 | 第19页 | | ·试剂 | 第19页 | | ·方法 | 第19-26页 | | ·培养基 | 第19页 | | ·溶栓酶的分离纯化 | 第19-20页 | | ·SDS-PAGE分析 | 第20页 | | ·溶栓酶活性测定 | 第20页 | | ·酶活标准曲线制作 | 第20页 | | ·四肽底物法测酶活 | 第20页 | | ·蛋白质含量测定 | 第20页 | | ·溶栓酶性质的研究 | 第20页 | | ·豆豉溶栓酶成熟肽编码区的PCR扩增和克隆 | 第20-24页 | | ·枯草芽孢杆菌基因组的提取 | 第20-21页 | | ·PCR反应 | 第21-22页 | | ·PCR产物胶回收 | 第22页 | | ·PCR产物与T载体连接 | 第22页 | | ·感受态的制备 | 第22-23页 | | ·转化 | 第23页 | | ·SDS碱裂解法提取质粒 | 第23-24页 | | ·目的基因的双酶切 | 第24页 | | ·双酶切DNA片段与表达载体连接 | 第24页 | | ·蛋白质表达与转化 | 第24-25页 | | ·蛋白质的表达 | 第24-25页 | | ·蛋白质的纯化 | 第25页 | | ·SDS-PAGE | 第25页 | | ·溶栓酶功能试验 | 第25-26页 | | ·体外抗凝血试验 | 第25页 | | ·溶栓试验 | 第25-26页 | | 3 结果与分析 | 第26-40页 | | ·枯草芽孢杆菌溶栓酶的分离与纯化 | 第26-29页 | | ·枯草芽孢杆菌溶栓酶的纯化 | 第26页 | | ·溶栓酶活力的标准曲线 | 第26-27页 | | ·溶栓酶蛋白质浓度的标准曲线 | 第27-28页 | | ·SEPHADEX-G100柱层析分离纯化溶栓酶 | 第28-29页 | | ·溶栓酶的理化性质 | 第29-33页 | | ·最适温度 | 第29页 | | ·热稳定性 | 第29页 | | ·最适PH | 第29-30页 | | ·PH稳定性 | 第30页 | | ·金属离子的影响 | 第30页 | | ·有机溶剂影响 | 第30-33页 | | ·甲醇对溶栓酶的影响 | 第31页 | | ·乙醇对溶栓酶的影响 | 第31-32页 | | ·异丙醇对溶栓酶的影响 | 第32-33页 | | ·溶栓酶基因的克隆和表达 | 第33-38页 | | ·PCR扩增溶栓酶基因的结果 | 第33页 | | ·PMD18-T-DFE载体的构建 | 第33-35页 | | ·序列测定和同源性比对 | 第35-36页 | | ·序列测定 | 第35页 | | ·同源性比对 | 第35-36页 | | ·PET32A-DFE表达载体的构建 | 第36-37页 | | ·目的蛋白在大肠杆菌中的表达 | 第37-38页 | | ·溶栓酶功能测定 | 第38-40页 | | 4 讨论 | 第40-42页 | | 5 结论 | 第42-43页 | | 参考文献 | 第43-46页 | | 附录 | 第46-49页 | | 致谢 | 第49页 |
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论文编号BS1461040，这篇论文共49页
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