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折叠酶DsbA的制备及协助蛋白质体外复性的研究 |
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论文目录 |
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摘要 | 第1-6页 | Abstract | 第6-11页 | 第一章 文献综述 | 第11-28页 | ·引言 | 第11页 | ·包涵体及蛋白质复性 | 第11-18页 | ·包涵体的形成 | 第11-12页 | ·包涵体蛋白的分离、纯化及溶解 | 第12-13页 | ·蛋白质的体外复性方法 | 第13-16页 | ·稀释和透析复性 | 第14-15页 | ·层析折叠复性 | 第15-16页 | ·折叠促进剂协助复性 | 第16页 | ·两种蛋白质折叠学说 | 第16-18页 | ·折叠酶—DsbA | 第18-26页 | ·二硫键的形成 | 第19-20页 | ·Dsb家族蛋白及DsbA简介 | 第20-21页 | ·DsbA的结构 | 第21-22页 | ·DsbA的性质 | 第22-24页 | ·Dsb家族中各成员的协同作用 | 第24-25页 | ·DsbA协助蛋白质复性的研究 | 第25-26页 | ·本文的研究内容 | 第26-28页 | 第二章 质粒转化及菌种筛选 | 第28-34页 | ·实验材料和仪器 | 第28-31页 | ·质粒和宿主菌 | 第28-30页 | ·溶液 | 第30页 | ·培养基 | 第30-31页 | ·实验仪器 | 第31页 | ·实验方法 | 第31-32页 | ·质粒抽提 | 第31页 | ·感受态细胞的制备 | 第31页 | ·质粒的转化 | 第31-32页 | ·转化子筛选 | 第32页 | ·菌种保存 | 第32页 | ·实验结果及讨论 | 第32-33页 | ·菌种的筛选 | 第32页 | ·转化成功的检测 | 第32-33页 | ·本章小结 | 第33-34页 | 第三章 折叠酶DsbA在大肠杆菌中表达条件的统计优化 | 第34-44页 | ·实验材料和仪器 | 第34-35页 | ·菌种和试剂 | 第34页 | ·培养基 | 第34-35页 | ·实验仪器 | 第35页 | ·实验方法 | 第35-37页 | ·培养过程 | 第35页 | ·分析方法 | 第35-37页 | ·实验设计 | 第37-40页 | ·筛选实验——Plackett-Burman设计 | 第37-39页 | ·优化实验——杂合设计(Hybrid design) | 第39页 | ·验证实验 | 第39-40页 | ·数据处理法 | 第40-41页 | ·筛选实验的数据处理 | 第40页 | ·响应面的拟合与分析 | 第40-41页 | ·实验结果与讨论 | 第41-43页 | ·发酵中重要影响因素的确定 | 第41页 | ·发酵最佳操作点的确定 | 第41-43页 | ·本章小结 | 第43-44页 | 第四章 折叠酶DsbA的纯化 | 第44-57页 | ·实验材料和方法 | 第44-45页 | ·缓冲溶液 | 第44页 | ·凝胶 | 第44页 | ·实验仪器 | 第44-45页 | ·实验方法 | 第45-51页 | ·分析方法 | 第45-46页 | ·细胞破碎 | 第46页 | ·离子交换层析 | 第46-51页 | ·实验结果与讨论 | 第51-56页 | ·响应曲面的拟合 | 第51-54页 | ·最佳操作条件的确定 | 第54-55页 | ·优化后的验证实验 | 第55-56页 | ·本章小结 | 第56-57页 | 第五章 折叠酶DsbA协助溶菌酶体外复性初步研究 | 第57-76页 | ·实验材料和仪器 | 第57-58页 | ·试剂 | 第57页 | ·缓冲液 | 第57-58页 | ·实验仪器 | 第58页 | ·分析方法 | 第58-61页 | ·RP-HPLC分离和测定蛋白质浓度 | 第58-60页 | ·溶菌酶活性测定方法(F.I.P.法) | 第60-61页 | ·实验设计与方法 | 第61-65页 | ·溶菌酶的变性处理 | 第61-62页 | ·筛选实验——Plackett-Burman设计 | 第62页 | ·重要因素考察实验 | 第62-63页 | ·DsbA的固定化方法 | 第63-65页 | ·DsbA半胱氨酸的可逆阻塞 | 第64-65页 | ·DsbA的固定化方法 | 第65页 | ·固定化DsbA协助溶菌酶复性 | 第65页 | ·数据处理 | 第65-66页 | ·实验结果与讨论 | 第66-75页 | ·影响溶菌酶复性过程的因素 | 第66-68页 | ·重要因素的筛选 | 第68-70页 | ·重要因素的考察 | 第70-74页 | ·DsbA介导体系与稀释复性结果比较 | 第74页 | ·DsbA固定化复性溶菌酶结果 | 第74-75页 | ·本章小结 | 第75-76页 | 第六章 结论与建议 | 第76-78页 | ·结论 | 第76页 | ·建议 | 第76-78页 | 参考文献 | 第78-83页 | 致谢 | 第83页 |
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