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当前位置:教育论文中心首页--硕士论文--大肠杆菌UbiG蛋白甲基供体进入机制研究及新月柄杆菌SkgA蛋白结构探索
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大肠杆菌UbiG蛋白甲基供体进入机制研究及新月柄杆菌SkgA蛋白结构探索
 
     论文目录
 
摘要第5-7页
Abstract第7-8页
第一篇 UbiG蛋白膜结合特性对CoQ合成氧甲基转移过程中甲基供体进入调控的研究第12-52页
    第1章 I型SAM-依赖的氧甲基转移酶UbiG蛋白的研究进展第12-24页
        1.1 辅酶Q的生物学功能概述第12-14页
        1.2 辅酶Q的生物合成途径第14-19页
        1.3 UbiG蛋白的功能及其在辅酶Q生物合成中的作用第19-21页
        1.4 UbiG蛋白的膜结合特性第21页
        1.5 UbiG蛋白的结构生物学研究进展第21-24页
    第2章 实验结果和讨论第24-38页
        2.1 UbiG蛋白及其突变体的克隆、表达与纯化第24页
        2.2 UbiG蛋白与膜脂结合对其与甲基供体亲和力的影响第24-26页
        2.3 UbiG蛋白膜结合区突变对其与甲基供体亲和力的影响第26-28页
        2.4 UbiG△~(165-187)-SAH复合物晶体初筛与优化第28-29页
        2.5 UbiG△~(165-187)-SAH复合物晶体数据收集处理与结构解析第29-31页
        2.6 UbiG△~(165-187)-SAH复合物的模型质量分析第31-33页
        2.7 UbiG△~(165-187)-SAH复合物的整体结构第33-34页
        2.8 UbiG蛋白的甲基供体结合模式与甲基转移机制第34-38页
    第3章 实验材料和方法第38-44页
        3.1 基因克隆,表达与纯化第38-41页
            3.1.1 UbiG蛋白突变体基因克隆及跑胶回收第38-39页
            3.1.2 限制性内切酶双酶切与载体连接第39-40页
            3.1.3 感受态细胞制备与转化第40页
            3.1.4 质粒抽提与PCR鉴定第40-41页
            3.1.5 UbiG与其突变体蛋白的表达纯化第41页
        3.2 结晶,数据收集与处理第41-42页
        3.3 结构解析与修正第42页
        3.4 脂质体制备第42页
        3.5 等温滴定量热(ITC)实验第42-43页
        3.6 甲基供体进入孔道分析第43-44页
    小结第44-46页
    参考文献第46-52页
第二篇 新月柄杆菌SkgA蛋白的结构生物学研究第52-78页
    第一章 SkgA蛋白研究背景介绍第52-60页
        1.1 新月柄杆菌概述第52-54页
        1.2 新月柄杆菌的极性与细胞周期调控系统第54-58页
        1.3 SkgA蛋白在新月柄杆菌饥饿应答调控中的作用第58页
        1.4 依据序列结构信息对SkgA蛋白功能的推测第58-60页
    第二章 实验结果和讨论第60-68页
        2.1 目的基因获取与重组质粒构建第60-61页
        2.2 野生型SkgA与硒代甲硫氨酸SkgA蛋白的表达纯化第61-63页
        2.3 晶体生长与优化第63-64页
        2.4 衍射数据收集处理与结构解析尝试第64-66页
        2.5 硒代甲硫氨酸SkgA蛋白的结晶与数据收集第66-68页
    第三章 实验材料和方法第68-75页
        3.1 skgA基因的克隆与重组质粒的构建第68-70页
            3.1.1 引物设计与PCR扩增第68-69页
            3.1.2 核酸内切酶双酶切与载体连接第69页
            3.1.3 转化与质粒扩增第69-70页
            3.1.4 质粒提取与PCR鉴定第70页
        3.2 SkgA与硒代甲硫氨酸SkgA蛋白表达与纯化第70-72页
            3.2.1 表达鉴定第70-71页
            3.2.2 诱导表达与收集破碎第71页
            3.2.3 镍亲和层析第71-72页
            3.2.4 葡聚糖凝胶过滤层析第72页
            3.2.5 阴离子交换层析第72页
        3.3 晶体生长与优化第72-73页
        3.4 数据收集与处理第73-75页
    小结第75-76页
    参考文献第76-78页
附录第78-80页
致谢第80-82页
在读期间发表的学术论文与取得的研究成果第82页

 
 
论文编号BS3609790,这篇论文共82
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