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葡萄孢属真菌及相关类群COI基因的克隆及序列分析

论文目录

摘要	第8-10页
Abstract	第10-11页
第一章文献综述	第12-19页
1 灰霉病的简介	第12页
2 葡萄孢属真菌及相关类群	第12-13页
3 线粒体	第13-15页
4 对葡萄孢属及相关类群分类的意义及现状	第15-18页
4.1 传统的分类方法	第15-16页
4.2 分子生物学分类	第16-18页
5 研究的目的和意义	第18-19页
第二章菌株的搜集、鉴定及保存	第19-32页
1 试验材料	第19-21页
1.1 所用菌株	第19页
1.2 培养基	第19-21页
1.3 设备仪器	第21页
2 试验方法	第21-26页
2.1 菌株的活化	第21-22页
2.2 培养形态观察	第22页
2.3 菌丝的培养与收集	第22页
2.4 菌丝DNA的提取	第22页
2.5 菌株的分子鉴定	第22-23页
2.6 序列的扩增	第23-24页
2.7 PCR产物的凝胶回收纯化	第24页
2.8 纯化后的片段与载体连接	第24-25页
2.9 目标载体转化大肠杆菌感受态细胞	第25页
2.10 重组质粒的检测	第25-26页
2.11 片段的分析	第26页
3 结果及分析	第26-31页
3.1 菌株的保存	第26-27页
3.2 培养形态观察	第27页
3.3 确定菌株的所属种类及其G3PDH序列和ITS序列	第27-31页
4 讨论	第31-32页
第三章 COI基因的所有外显子克隆及序列分析	第32-42页
1 材料	第32页
1.1 所用菌株	第32页
1.2 培养基及试剂	第32页
2 试验方法	第32-37页
2.1 菌丝的培养	第32页
2.2 菌丝RNA的提取	第32-33页
2.3 RT-PCR(逆转录)	第33页
2.4 使用3'RACE的方法扩增cDNA的3'末端	第33-34页
2.5 引物的设计与合成	第34-35页
2.6 PCR反应	第35页
2.7 特异片段的回收、克隆、测序	第35-37页
2.8 序列分析	第37页
3 结果及分析	第37-41页
3.1 引物设计	第37页
3.2 COI基因所有外显子片段的扩增	第37-38页
3.3 COI基因的所有外显子序列分析	第38-41页
4 讨论	第41-42页
第四章 COI基因的全序列克隆及序列分析	第42-57页
1 实验材料	第42页
1.1 所用菌株	第42页
1.2 设备仪器	第42页
2 试验方法	第42-45页
2.1 菌丝的培养	第42页
2.2 菌丝DNA的提取	第42-43页
2.3 引物的设计与合成	第43页
2.4 PCR反应	第43-44页
2.5 特异片段的回收、克隆、测序	第44-45页
2.6 序列分析	第45页
3 结果及分析	第45-54页
3.1 引物设计	第45-48页
3.2 COI基因全序列的扩增	第48-49页
3.3 COI基因的全序列分析	第49-54页
4 讨论	第54-57页
第五章 COI基因在灰霉病菌鉴定中的应用初探	第57-63页
1 实验材料	第57页
1.1 所用菌株	第57页
1.2 培养基及试剂	第57页
2 试验方法	第57-59页
2.1 菌丝的培养	第57页
2.2 菌丝DNA的提取	第57-58页
2.3 引物的设计与合成	第58页
2.4 PCR反应	第58-59页
3 结果及分析	第59-62页
3.1 区分葡萄孢属和Streptobotrys与其它核盘菌科真菌	第59-60页
3.2 区分B.cinerea与B.pseudocinerea	第60-61页
3.3 区分B.fabae与B.fabiopsis	第61-62页
4 讨论	第62-63页
全文总结与展望	第63-64页
参考文献	第64-70页
致谢	第70-71页
附录	第71-77页

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