| 摘要 | 第4-6页 |
| abstract | 第6-7页 |
| 第1章 引言 | 第12-19页 |
| 1.1 养殖鳗鲡的常见疾病 | 第12-13页 |
| 1.2 渔用疫苗的研究概况 | 第13-15页 |
| 1.3 创伤弧菌和迟缓爱德华氏菌外膜蛋白(OMPS)的免疫原性研究 | 第15-16页 |
| 1.4 本研究内容、方法和意义 | 第16-18页 |
| 1.4.1 研究内容 | 第16页 |
| 1.4.2 研究方法 | 第16页 |
| 1.4.3 研究意义 | 第16-18页 |
| 附表 | 第18-19页 |
| 第2章 鳗鲡病原性创伤弧菌与爱德华氏菌外膜蛋白全长基因克隆,体外拼接及重组表达载体的构建 | 第19-41页 |
| 2.1 前言 | 第19页 |
| 2.2 材料与方法 | 第19-26页 |
| 2.2.1 菌株和质粒 | 第19页 |
| 2.2.2 仪器设备 | 第19-20页 |
| 2.2.3 试剂及其试剂配制 | 第20-21页 |
| 2.2.4 创伤弧菌和迟缓爱德华氏菌基因组DNA的提取 | 第21页 |
| 2.2.5 迟缓爱德华氏菌外膜蛋白ompA基因全长的克隆 | 第21页 |
| 2.2.6 迟缓爱德华氏菌外膜蛋白ompA基因的结构预测 | 第21-22页 |
| 2.2.7 双基因的连接 | 第22-23页 |
| 2.2.8 重组表达载体的构建 | 第23-25页 |
| 2.2.9 重组质粒的筛选和鉴定 | 第25-26页 |
| 2.2.10 双基因G-Vibrio-Edwa的亲水性、免疫原性分析与蛋白质结构预测 | 第26页 |
| 2.3 结果 | 第26-38页 |
| 2.3.1 迟缓爱德华氏菌外膜蛋白ompA基因全长的PCR扩增 | 第26-27页 |
| 2.3.2 爱德华氏菌(B79)外膜蛋白ompA基因理论表达产物的结构与功能分析 | 第27-30页 |
| 2.3.3 基因连接、双酶切及重组质粒鉴定 | 第30-32页 |
| 2.3.4 连接基因G-Vibrio-Edwa推测的融合表达产物结构和免疫原性预测结果 | 第32-38页 |
| 2.4 讨论 | 第38-41页 |
| 2.4.1 迟缓爱德华氏菌外膜蛋白基因的筛选 | 第38页 |
| 2.4.2 创伤弧菌和迟钝爱德华氏菌外膜蛋白基因的连接 | 第38-39页 |
| 2.4.3 表达载体的构建 | 第39-41页 |
| 第3章 鳗鲡创伤弧菌与迟缓爱德华氏菌外膜蛋白双基因连接表达载体的表达与纯化 | 第41-51页 |
| 3.1 前言 | 第41页 |
| 3.2 材料与方法 | 第41-46页 |
| 3.2.1 试验材料 | 第41-43页 |
| 3.2.2 不同条件下OMP-Vibrio-Edwa的原核表达 | 第43-45页 |
| 3.2.3 OMP-Vibrio-Edwa蛋白的镍柱纯化与蛋白复性 | 第45-46页 |
| 3.3 结果 | 第46-49页 |
| 3.3.1 OMP-Vibrio-Edwa的诱导表达 | 第46-47页 |
| 3.3.2 目的蛋白(OMP-Vibrio-Edwa)的镍柱纯化与复性 | 第47-49页 |
| 3.4 讨论 | 第49-51页 |
| 3.4.1 影响外源蛋白基因在大肠杆菌内表达的因素 | 第49页 |
| 3.4.2 融合蛋白纯化方法的选择 | 第49-51页 |
| 第4章 重组外膜蛋白的免疫原性研究 | 第51-62页 |
| 4.1 前言 | 第51页 |
| 4.2 材料与方法 | 第51-55页 |
| 4.2.1 试验材料 | 第51-53页 |
| 4.2.2 试验方法 | 第53-55页 |
| 4.3 试验结果 | 第55-60页 |
| 4.3.1 攻毒感染相对保护率 | 第55-57页 |
| 4.3.2 血细胞转化 | 第57-58页 |
| 4.3.3 血清特异性抗体效价 | 第58-59页 |
| 4.3.4 血清、粘液和肝肾组织悬液溶菌酶含量 | 第59-60页 |
| 4.4 讨论 | 第60-62页 |
| 第5章 总结与展望 | 第62-64页 |
| 5.1 论文主要成果 | 第62页 |
| 5.2 论文主要创新点及展望 | 第62-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-69页 |
| 附录 | 第69-71页 |
| 在学期间发表的学术论文 | 第71页 |
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